皮炎颗粒三方的制备与质量研究*

王 磊，梁 颖，付 彬，王 雷

(天津市中医药研究院附属医院，天津300120)

药物制剂

皮炎颗粒三方的制备与质量研究*

王 磊，梁 颖，付 彬，王 雷

(天津市中医药研究院附属医院，天津300120)

目的:研究皮炎颗粒三方的制备方法，建立其质量标准。方法:采用一步干燥制粒法制备皮炎颗粒三方;薄层色谱法鉴别黄芩、苦参;高效液相色谱法测定制剂中黄芩苷的含量。结果:制备颗粒均匀;供试品色谱中，在与对照品、对照药材色谱相应的位置上显相同颜色的斑点。黄芩苷的进样量在0.47～1.70 mg之间，峰面积与进样量呈线性关系。平均回收率为100.39%(n=6)，RSD为0.43%。结论:一步干燥制粒法制备皮炎颗粒三方，方法简便，质量标准可以控制本制剂的整个生产过程。

皮炎颗粒三方，一步干燥制粒法，质量标准

皮炎颗粒(Ⅲ)具有清热、利湿、解毒之功效，用于治疗湿热型湿疹、荨麻疹等皮肤病，为我国中西医结合治疗皮肤病专家边天羽主任医师经验方。在制粒工艺上引进喷雾干燥技术，并根据天津市食品药品监督管理局医疗机构制剂再注册的要求，对其质量标准进行修订、完善，降低颗粒剂生产周期，提高颗粒剂生产工艺及药品的质量控制检测水平。

1 仪器与试药

1.1 仪器超声清洗仪(1990 QTD，超声波频率:40 KHz，深圳固特超声医疗设备有限公司)，岛津20A高效液相色谱仪(日本岛津)，离心机(800型，转鼓转速: 0～4000 r/min，金坛市白塔金昌实验仪器厂)。

1.2 试药黄芩苷对照品(中国药品生物制品检定所，110715－201117)，苦参对照药材(中国药品生物制品检定所，121019－200304)，乙醇为色谱纯，乙酸乙酯、甲醇等均为分析纯，皮炎颗粒三方(本院自制，批号2013070218，2013070319，2013070420)。

2 制剂的制备［1］

取土茯苓、地黄、茵陈、薏苡仁、黄芩、金银花、玄参、茯苓皮、白鲜皮、苦参、栀子等11味饮片加水煎煮两次，第一次2 h，第二次1 h，滤过，滤液合并，减压浓缩至相对密度为1.18～1.22(80℃)的清膏，加入清膏量20%～23%的淀粉、0%～1%的二氧化硅为辅料，喷雾干燥，制成1 000 g颗粒。

3 质量标准研究

3.1 黄芩的鉴别［2］

3.1.1 供试品溶液的制备取本品4袋的内容物，研细，加甲醇20 ml，超声处理30 min，滤过，滤液蒸干，残渣加水20 ml使溶解，用盐酸调pH值至1～2，用乙酸乙酯提取两次，每次20 ml，水液备用;合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇0.5 ml使溶解，作为供试品溶液。

3.1.2 对照品溶液的制备取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1 ml含1 mg的溶液，作为对照品溶液。

3.1.3 阴性样品溶液的制备按处方比例，取除黄芩外的其他药材，按制备方法的工艺制成颗粒，再按上述供试品溶液制备方法制得阴性样品溶液。

3.1.4 薄层条件照薄层色谱法(《中国药典》2010年版一部附录ⅥB)试验，吸取供试品、对照品和阴性样品溶液各2～6 μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯－丁酮－甲酸－水(5∶3∶1∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%三氯化铁溶液。

3.1.5 结果供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。结果见图1。

3.2 苦参的薄层鉴别［2］

3.2.1 供试品溶液的制备取本品4袋的内容物，研细，加浓氨试液1 ml、三氯甲烷25 ml，放置过夜，滤过，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷0.5 ml使溶解，作为供试品溶液。

3.2.2 对照药材溶液的制备取苦参对照药材粉末1 g，加浓氨试液1.0 ml、三氯甲烷25 ml，放置过夜，滤过，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷1 ml使溶解，作为对照药材溶液。

图1 黄芩苷薄层色谱图

3.2.3 阴性样品溶液的制备按处方比例，取除苦参外的其他药材，按制备方法的工艺制成颗粒，再按上述供试品溶液制备方法制得阴性样品溶液。

3.2.4 薄层条件照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录ⅥB)试验，吸取对照品、供试品和阴性样品溶液各5 μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯－丙酮－乙酸乙酯－浓氨试液(2∶3∶4∶0.2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液。

3.2.5 结果供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上显相同颜色的斑点。阴性样品溶液无干扰。结果见图2。

图2 苦参薄层色谱图

3.3 含量测定［3］

3.3.1 色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;甲醇－水－磷酸(45∶55∶0.2)为流动相;检测波长为315 nm。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于3 000。

3.3.2 溶液制备

3.3.2.1 对照品溶液的制备取黄芩苷对照品适量，精密称定，加70%甲醇制成每1 ml含黄芩苷0.1 mg的溶液，即得。

3.3.2.2 供试品溶液的制备取“装量差异”项下的本品约1.0 g，精密称定，置100 ml量瓶中，加70%乙醇60 ml，超声处理30 min，放置至室温，加70%乙醇稀释至刻度，摇匀，离心，取上清液，即得。

3.3.2.3 阴性样品溶液的制备取除去黄芩的其他饮片，按处方配比，精密称取辅料，按“3.3.2.2”项制备方法操作，制得阴性样品溶液。分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液及阴性样品溶液各10 μl注入液相色谱仪测定。测定结果见图3。

图3 对照品(A)供试品(B)阴性样品(C)HPLC图谱

3.3.3 标准曲线的制备精密吸取“3.3.2.1”项下黄芩苷对照品溶液(100 μg/ml)3.0、4.0、5.0、6.0、7.0和8.0 ml分别置10 ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，精密吸取上述6种溶液各10 μl注入液相色谱仪，按“3.3.1”项下色谱条件分析，测定各自峰面积。以峰面积值为纵坐标，进样量为横坐标，绘制标准曲线，回归方程为Y=3 325 215.95 X－67 119.76(r= 0.999 9)。黄芩苷的进样量在0.47～1.70 mg之间，峰面积与进样量呈线性关系。

3.3.4 精密度试验取对照品溶液，按“3.3.1”色谱条件分析，精密吸取10 μl注入液相色谱仪，重复进样6次，样品中黄芩苷峰面积的RSD为2.01%。结果表明进样精密度符合要求。

3.3.5 重现性试验取同一批号样品(2013070218)，按“3.3.2.2”项下制备方法制备样品液，按照“3.3.1”项下色谱条件分析，分别精密吸取10 μl，注入液相色谱仪，测定并计算各自含量，平均含量为5.17 mg/g (n=6);RSD为0.51%，结果表明，重复性符合要求。

3.3.6 稳定性试验取同一批号样品(2013070218)，按“3.3.2.2”项下制备方法制备样品液，按照“3.3.1”项下色谱条件分析，精密吸取10 μl，分别在0、4、6、10和24 h注入液相色谱仪，测定，黄芩苷RSD为1.04%，结果表明，本品在24 h内测定，结果稳定。

3.3.7 回收率试验取同一批号样品(2013070218)，研细，精密称取1.0 g，共6份;精密加入黄芩苷对照品约24、20及16 mg各2份，按照“3.3.2.2”项下方法制备供回收率测定用供试品溶液，按照“3.3.1”项下色谱条件分析，精密吸取10 μl注入液相色谱仪，测定，计算平均回收率为100.39%(n=6)，RSD为0.43%，结果表明，回收率符合要求，结果见表1。

表1 回收率试验数据

3.3.8 样品测定取样品3批按“3.3.2.2”项下方法操作，按“3.3.1”项下色谱条件分别测定3批样品含量，测定结果见表2。

表2 样品含量测定结果(n=3)

3.3.9 含量限度制定黄芩苷是黄芩的主要成分，在饮片中含量应不得少于6 mg/g［1］。平均每袋装量为3.0 g，每1 g含黄芩苷(C21H18O11)计，应为不低于4.8 mg。

3.4 粒度不能通过一号筛与能通过五号筛的总和不得超过15%，符合(《中国药典》2010年版一部附录ⅪB第二法，双筛分法)测定要求。

3.5 水分不得过6.0%。

3.6 溶化性取供试品1袋，加热水200 ml，搅拌5 min，立即观察，应全部溶化或呈混悬状。可溶颗粒应全部溶化，允许有轻微浑浊;混悬颗粒应能混悬均匀。

3.7 装量差异装量差异限度应在±7%范围内，依(《中国药典》2010年版一部附录ⅠC)颗粒剂装量差异法检查。

4 讨论

本标准黄芩鉴别中，其提取方法也可采用70%乙醇溶解，滤过，蒸干后加水溶解过聚酰胺柱的方法，其结果与“3.1”结果一致。但采用70%乙醇溶解，蒸干过程因溶媒含有水，需较长时间，且过柱有时不完全，有可能影响最终结果。

黄芩苷对照品色谱图中有时主峰有拖尾现象，主要是因为对照品中含有水分略高，可以干燥后使用即可消除拖尾。

1杨新建，黄志军，王雷.皮炎颗粒喷雾干燥工艺研究［J］.天津药学，2004，16(3):13

2中国药典［S］.一部.2010:附录6，附录34，附录65

3杨新建，王雷，梁颖.黄芩苷滴丸质量标准研究［A］.2009全国中药创新与研究论坛学术论文集［C］.北京:2009:353－356

R96

A

1006-5687(2014)01-0024-03

2013-09-02