猪瘟ELISA抗体检测试剂盒的应用效果比较试验

李晓薇 李永强 钟小艳

（1.璧山县璧城畜牧兽医站，重庆 402760；2.璧山县养殖业技术服务中心，重庆 402760）

猪瘟（CSF）是由猪瘟病毒感染引起的猪的急性、热性、高度致死性传染病，是严重影响养猪业发展的主要疫病之一。世界动物卫生组织（OIE）将其列为A类16种传染病之一，我国亦将其列为一类传染病，是发生最多、危害最大、流行最广的动物传染病之一。按照农业部国家动物疫病强制免疫计划和省属要求，猪瘟免疫抗体检测采用正向间接血凝试验（IHA）或者酶联免疫吸附试验（ELISA）2种方法，其中，ELISA应用最广[1]。然而，不同厂家生产的试剂盒检测结果是否存在差异，一些技术人员还很难确定。所以，我们选择了2个国内厂家生产的猪瘟ELISA抗体检测试剂盒进行了比对试验，供基层同行参考。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 检测试剂 市售检测猪瘟抗体的2种国产ELISA试剂盒（A、B两厂家）。

1.1.2 血清来源 随机采取免疫信息清晰的84份猪血液样木，分离血清，置4 ℃冰箱保存备用。样品来源为体质健壮、体重不等、兔疫时间、免疫次数不一的商品猪群。

1.2 检测方法

1.2.1 重复性试验 从84份检测样品中随机抽取1份，将样品设6个平行试验孔，分别使用2种试剂盒进行重复性试验，检测试剂盒均在有效期内，检测操作按盒内说明书进行，各试剂检测对照均成立，检测结果按试剂盒要求判定。

1.2.2 2种试剂盒检测猪瘟抗体比较试验 将84份样品分别用2种试剂盒进行猪瘟抗体检测，检测试剂盒均在有效期内，检测操作按盒内说明书进行，各试剂检测均设对照，检测结果按试剂盒要求判定。

2 结果与分析

2.1 重复性试验

同一份样品，用2种不同试剂盒检测，其阴性、阳性结果没有变化。试验所得数据中各个观察值的变异程度不大，试验数据具有较高的参考价值。

2.2 定性比较

了解2种试剂盒的相似性与差异性，可以参考2种试剂盒检测结果的阳性率和2种试剂盒之间的符合率。所检样品的猪瘟抗体阳性率、阴性率见表1。

表1 2种试剂盒检测猪瘟抗体结果

从表1可知，A厂家猪瘟ELISA抗体试剂盒检测猪瘟抗体阳性率为61.90%，阴性率为38.10%；B厂家的抗体阳性率为69.05%，阴性率为30.95%，根据统计分析，两者比较u＜1.96，p＞0.05，表明两厂家试剂盒检测猪瘟抗体阳性率及阴性率差异不显著。

2.3 符合率比较

两厂家试剂盒检测猪瘟抗体的阳性符合率为98.08%，阴性符合率为78.13%，总符合率为90.48%，具有较高的符合率，见表2。但B厂家的试剂盒比A厂家试剂盒的亲和性更高，敏感性更强。

表2 2种试剂盒检测猪瘟抗体比较

3 讨论

（1）大多数试验情况都需要高敏感性和高特异性，但在单一试验中，两者却很难同时具备。本试验中，A厂家试剂盒的阳性率较低，其敏感性不高，但特异性更强；B厂家试剂盒阳性率较高，敏感性更强但特异性更差。在实际生产中，抗体的动态监测和免疫效果评价要求试剂盒有较高的敏感性。相反，引种监测以及个体淘汰则要求检测试剂盒有较高的特异性。所以，要明确检测目的不同对于试剂盒敏感性和特异性的要求，合理地选用试剂盒，更好的为实际生产服务。

（2）综上所述，从本次试验结果分析来看，两厂家生产的猪瘟ELISA抗体检测试剂盒阳性率、阴性率差异不显著，且阳性符合率、阴性符合率及总符合率较高，相比进口试剂盒更加低廉，在实际基层工作中可以灵活应用；保证免疫监测工作的完成，为指导生产、防制猪瘟的暴发提供可靠的依据。同时，解决了试剂盒实际供应及监测经费紧张等问题。

[1]庞然，张小敏，周斌，等. 4种商品化试剂盒检测猪瘟病毒抗体的比较分析[J].中国兽医杂志，2011，（9：40-42.