润肺治纤汤对实验性肺纤维化大鼠肺微血管和心脏影响的观察

甘卉 王忠超 李伟 宋晓环 刘诗音 朱莉 胡金秋 王岚

润肺治纤汤对实验性肺纤维化大鼠肺微血管和心脏影响的观察

甘卉 王忠超 李伟 宋晓环 刘诗音 朱莉 胡金秋 王岚

目的 探讨润肺治纤汤对实验性肺纤维化大鼠的治疗作用。方法 24只Wistar大鼠分为正常组、模型组、治疗组各8只，给药28d后做肺系数测定和肺组织羟脯氨酸（HYP）含量检测，肺组织苏木精-依红（HE）染色观察肺微血管变化并做心脏系数分析。结果 模型组肺系数和肺组织HYP含量较对照组显著增加（P<0.05），肺组织肺纤维化病理变化明显，肺泡间隔厚度较对照组显著增加（P<0.05）；治疗组肺系数、HYP含量、心脏系数与模型组比较显著降低（P<0.05），肺组织微血管减少程度轻于模型组。结论 润肺治纤汤能够减轻实验性肺纤维化大鼠肺组织微血管密度的进行性减少，对心脏具有一定的保护作用。

肺纤维化；大鼠；肺微血管；心脏

肺纤维化是最常见的肺间质疾病，主要病理变化为肺泡上皮损伤和成纤维细胞增殖，纤维组织增生，使肺泡间隔明显增厚［1］，随着肺纤维化的加重肺微血管密度进行性减少［2］，肺呼吸功能进行性降低，目前尚无良好治疗方法。润肺治纤汤对博莱霉素所致肺纤维化大鼠肺组织SOD活性显著升高，可使肺组织MDA含量显著下降，对大鼠实验性肺纤维化模型具有一定治疗作用［3］。本文探讨润肺治纤汤对实验性肺纤维化模型大鼠肺组织微血管及其对心脏的影响，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 一般资料 体质量（210±10）g Wistar大鼠 24 只，随机分正常组、模型组、治疗组各8只。动物模型复制参见文献[4-6]，造模第2d起治疗组每天4ml药物灌胃，正常组、模型组每天等量生理盐水灌胃。

1.2 药物 润肺治纤汤：由麦门冬、丹参、银杏叶、黄芪等中药组成；各组中草药煎液、浓缩为每毫升相当于原生药材1g的药液储存冰箱备用［7］。

1.3 动物处死与指标检测 造摸后28d处死动物，心肺完整取出并分离，分别称重计算心脏系数、肺系数；右心室重量分析:取出心脏,剪离右心室（RV）和左心室（LV）加室间隔（S）,用分析天平分别称重后,计算心系数RV/BW，右心系数RV/(LV+S)的比值，BW为动物体重［8］。左肺用多聚甲醛从支气管注入后置于多聚甲醛固定，常规包埋、切片、HE染色、光镜下观察其肺血管病理改变。右肺组织Hyp含量检测，方法按试剂盒说明书操作。

1.4 统计学方法 采用统计软件SPSS进行统计分析，正态计量资料用“±s”来表示，组间比较采用t检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 肺组织匀浆液HYP含量变化 模型复制28d后治疗组肺组织HYP的含量低于同期模型组（P<0.05，见图1）。

2.2 肺系数与心脏系数 (见图2)

2.3 镜下形态观察 28d对照组大鼠肺组织结构完整清晰；模型组大鼠肺结构破坏明显，肺泡间隔明显增宽，肺泡间隔肺泡上皮和成纤维细胞数量增多，肺泡壁毛细血管几乎见不到；治疗组大鼠肺结构较为完整，肺泡间隔增厚明显减轻，肺纤维化病理变化较模型组明显减轻，肺泡间隔增厚较模型组明显减轻，可见肺泡壁毛细血管（见图3）。

图1 各组大鼠肺组织HYP含量的比较

图2 各组大鼠肺系数与心脏系数比较

3 讨论

肺纤维化是一种渐进性的严重危害人类健康的疾病，是慢性非肿瘤疾病中预后较差的一种疾病，目前在欧洲和美国对肺纤维化还没有被认可的治疗药物[9]。本实验采用羟脯氨酸含量测定法评估肺纤维化程度，给药28d后模型组大鼠肺系数、HYP显著地高于正常组，表明肺纤维化动物模型复制成功［1］。博莱霉素引发大鼠肺组织炎症，受损组织修复的过程中，微血管增生是肺损伤早期的主要病理变化。在7～14d期间，与正常组比较，模型组大鼠肺血管生成活跃，血管的生成随时间进一步增加，14d后胶原纤维沉积随时间推移逐渐增多而肺血管数量逐渐减少，给药28d肺微血管少见，肺纤维化肺间质微血管数量的显著减少［2］。因润肺治纤汤中诸药相伍有润肺、抗炎、提高免疫力、改善肺纤维化的作用，能非常显著地提高肺组织SOD的活力［3］，改善氧化与抗氧化平衡，可抑制或减轻脂质过氧化作用，从而保护组织细胞免受损伤。给药28d后治疗组大鼠肺系数、HYP显著低于模型组，病理组织学显示治疗组大鼠肺结构较为完整，肺泡间隔较模型组显著减小，说明肺胶原纤维沉积较模型组明显减轻肺泡间隔核数量较模型组显著减小，说明肺泡壁成纤维细胞和肺泡上皮增殖明显减轻。治疗组心脏系数特别是右心系数显著低于模型组，可能机制为肺血管阻力增加不明显，右心负担增大不明显。综上提示：润肺治纤汤对博莱霉素致肺纤维化大鼠可改善肺微循环，减轻肺循环阻力，从而减轻右心脏负担的作用。

图3 各组大鼠肺组织病理变化比较

[1] 金晓光，代华平，庞宝森，等.博莱霉素致大鼠肺纤维化模型肺组织的动态病理变化及其发生机制[J].中国病理生理杂志，2009,25(4):708-714.

[2] 何彦侠，辛建保.实验性肺纤维化形成过程中肺组织血管生成的动态变化[J].中国组织化学与细胞化学杂志，2005,14(1):89-93.

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[7] 柯雪帆，赵章忠，张玉萍,等.《伤寒论》和《金贵要略中的药物剂量问题》[J].中国中药杂志，1983，8(12):36-44.

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[9] 赵玉珂,赵铭山.秦静吡非尼酮对特发性肺纤维化治疗的研究进展[J].当代医学,2013,19(9):12-13.

10.3969/j.issn.1009-4393.2014.10.008

吉林省教育厅“十二五”科研项目［2012］第417号

吉林 130031 长春医学高等专科学校 （甘卉 王忠超 李伟宋晓环 刘诗音 朱莉 胡金秋 王岚）