参芪扶正注射液对病毒性心肌炎小鼠SOD 活性和MDA 含量的影响

范柳芳，陈金水，吴天敏，许昌声，王华军

病毒性心肌炎（VMC）临床统计发现发病率逐年上升，但具有明确疗效的治疗药物却屈指可数。近年，VMC的研究较多集中于对临床VMC 患者的观察，动物研究相对较少。林国珍等［1］的研究表明，VMC的发病与氧自由基过表达密切相关。本课题研究了参芪扶正注射液抗氧化作用治疗VMC小鼠。

1 材料与方法

1.1 实验病毒、动物 柯萨奇B3病毒（CVB3），Nancy株，购自中国科学院武汉大学医学院病毒所。120 只4～6 周龄雄性BALB／c健康小鼠，体重为16g～20g，购自上海斯莱克实验动物责任有限公司。

1.2 实验试剂、药物 丙二醛（MDA）及超氧化物歧化酶（SOD）测定试剂盒均购自南京建成生物工程研究所（批号A 003－1）。病毒唑注射液购自福州海王福药制药有限公司。参芪扶正注射液由丽珠集团利民制药厂生产。

1.3 动物分组、取材 将小鼠随机分为5 组，空白组（A：20只），首次腹腔注射Eagle’s液0.1mL，0.5min后0.4mL生理盐水腹腔注射，持续30d。模型组（B：28 只）、病毒唑组（C：24只）、参芪小剂量组（D：24只）、参芪大剂量组（E：24只），首次腹腔注射5×102TCID50CVB3稀释液0.1mL后，0.5min后分别腹腔注射0.4mL生理盐水、0.4mL 病毒唑注射液、0.4mL 参芪扶正注射液、0.9mL参芪扶正注射液，持续30d。第3天、第10天、第30天，各组随机抽取一定数量的小鼠，运用眼球摘除取血法采集血约1.0 mL，离心后，－20℃冰箱中保存，以检测SOD 活性、MDA 含量。

1.4 血清SOD、MDA 检测 分别运用黄嘌呤氧化酶法、硫代巴比妥酸法，按照SOD、MDA 检测试剂盒说明书步骤操作。1.5 统计学处理 计量资料以均数±标准差表示，采用SPSS13.0软件处理数据。

2 结 果

与模型组相比：第3天（急性期）时，参芪大剂量组、病毒唑组SOD 活性升高，MDA 含量降低（P＜0.05），两组之间无统计学意义；第10天（急性期）时，各治疗组均能不同程度改善SOD活性，MDA 含量（P＜0.05，P＜0.01），参芪大剂量组变化最明显（P＜0.01），并且与病毒唑组相比较有统计学意义（P＜0.01）；参芪小剂量组与病毒唑组相比无统计学意义；第30 天（慢性期）时，参芪大剂量组、参芪小剂量组SOD 活性升高，MDA 含量降低（P＜0.05），两组之间无统计学意义（P＞0.05）；与病毒唑组相比较，参芪大剂量组有统计学意义（P＜0.05）。详见表1、表2。

表1 参芪对VMC小鼠血清SOD活性的影响

表1 参芪对VMC小鼠血清SOD活性的影响

与空白组比较，1）P＜0.05，2）P＜0.01；与模型组比较，3）P＜0.05，4）P＜0.01；与病毒唑组比较，5）P＜0.05，6）P＜0.01

组别 第3天 第10天 第30天A 组230.71±10.84 224.96±12.27 222.54±10.42 B组 162.98±11.732） 146.52±9.072） 188.36±2.622）C组 186.70±1.682）3） 184.00±3.912）4） 199.96±2.501）D 组 173.63±3.202） 179.74±5.002）3） 210.16±6.611）3）E组 190.28±8.562）3） 204.52±3.022）4）6） 206.04±4.855）3）

表2 参芪对VMC小鼠血清MDA 含量的影响

表2 参芪对VMC小鼠血清MDA 含量的影响

与空白组比较，1）P＜0.05，2）P＜0.01；与模型组比较，3）P＜0.05，4）P＜0.01；与病毒唑组比较，5）P＜0.05，6）P＜0.01

组别 第3天 第10天 第30天A 组14.13±0.86 15.00±2.09 13.19±1.88 B组 42.19±1.432） 52.30±1.942） 30.46±0.972）C组 29.90±0.872）3） 35.00±1.942）4） 22.71±1.331）D 组 34.77±0.742） 36.96±4.282）3） 20.98±2.101）3）E组 28.69±0.892）3） 29.46±0.812）4）6） 17.56±0.875）3）

3 讨 论

在祖国传统医学中，病毒性心肌炎的归属尚无明确定论。对临床VMC患者的观察以及对VMC小鼠的研究，认为其属于“温病”范畴更为合理，此与陈茂刚等［2］探讨相符。

本研究显示，BALB／c小鼠感染柯萨奇B3病毒后，伤津耗液十分明显，故认为其感受温热邪毒后，耗伤肺胃阴津，扰乱心营，损伤心阴。正气不足，素体虚弱是VMC 发病的根本原因，温热邪毒乘虚侵心、气阴两虚是VMC 发病的关键［3］。由此推出，治疗VMC宜以补气生津为主，因气能生津、气能行津、气能摄津，当以补气为先，气津均源于脾胃运化之水谷津微，脾胃之气充盛，则化生津液力量增强，并且脾健则能运脾化湿，升降枢纽正常，则可维持水液代谢平衡，故予以健脾益气为主之中药参芪扶正注射液。参芪扶正注射液主要由黄芪、党参组成。黄芪性微温，味甘，能补脾益气、补肺固表，党参补中益气生津，二者在配伍中属相须关系，配合运用能增强健脾益气之功效。

临床研究表明，VMC 的发生与脂质过氧化反应增强有关，测定脂质过氧化反应的程度有助于VMC 的病情评价［4］。VMC时，受损的心肌细胞产生的氧自由基破坏了原来的动态平衡，引发了脂质过氧化反应，而氧自由基的清除依赖抗氧化酶系的作用。超氧化物歧化酶是抗氧化酶系中的主要抗氧化酶，其活性高则抗氧化作用强。MDA 是脂质过氧化反应的中间产物，其含量多少体现了氧化损伤的程度。

此次研究结果显示，急性期（第3天、第10天），大剂量参芪扶正注射液升高SOD 活性、降低MDA 含量明显优于病毒唑注射液与小剂量参芪扶正注射液，具有量效依赖性。慢性期（第30天）大小剂量参芪扶正注射液均能提高SOD 活性，降低MDA 含量，不存在量效依赖性。表明参芪扶正注射液具抗氧化作用，其可使VMC 小鼠的SOD 活性升高，清除过表达的氧自由基，改善动态失衡，减少脂质过氧化反应，从而减少中间产物MDA 含量。急性期适当增加剂量，疗效更显著。为临床参芪扶正注射液治疗病毒性心肌炎提供了实验依据，但参芪扶正注射液治疗VMC的具体作用耙点尚有待于进一步研究。

［1］ 林国珍，朱霖，施咏梅.病毒性心肌炎患儿抗氧化能力与营养素含量测定［J］.微量元素与健康研究，2001，18（2）：29－30.

［2］ 陈茂刚.试论病毒性心肌炎属于“温病”范畴［J］.时珍国医国药，2002，5（13）：295－296.

［3］ 马爱萍，经剑颖.益气养阴法治疗病毒性心肌炎疗效观察［J］.临床合理用药，2013，8（6）：93.

［4］ 周晓春，顔勇，王宝忠，等.生黄合剂对病毒性心肌炎小鼠血清SOD活性和MDA 含量的影响［J］.承德医学院学报，2008，1（25）：10－12.