气相色谱法测定香附挥发油中α-香附酮的含量

徐 程，张利萍

（广州立白企业集团有限公司，广东 广州 510170）

香附为莎草科植物莎草（Cyperus rotundus L.）的干燥根茎。它秋季采挖，燎去毛须后置沸水中略煮或蒸透后晒干，或燎后直接晒干。香附具有疏肝解郁、理气宽中、调经止痛之功效，适用于肝郁气滞、胸胁胀痛、疝气疼痛、乳房胀痛、脾胃气滞、烷腹痞闷、胀满疼痛、月经不调、经闭痛经[1]等症，被历代许多医学家视为妇科良药。

香附的有效成分主要集中在其挥发油中。研究表明，香附的挥发油中含有多种单萜、倍半萜及其氧化物[2]。《中国药典》（2010年版）一部规定了以α-香附酮作为对照品、采用薄层色谱法鉴别香附，而已报道的香附挥发油中α-香附酮的测定多采用高效液相色谱法[3]。

本文采用气相色谱仪，建立了香附挥发油中α-香附酮的测定方法。该方法简便、准确，为香附药材的质量控制提供了科学依据。

1.实验部分

1.1 试剂与器材

岛津GC-2014C气相色谱仪，具有FID检测器；甲醇，色谱纯，Merck；α-香附酮，质量分数99.3%，中国药品生物制品检定所。

1.2 色谱条件

色谱柱:DB-5（30m×0.320mm×0.25mm）毛细管色谱柱，起始温度150℃，以5℃/min恒速升温至260℃，在260℃下恒温5min；进样口:260℃；检测器:280℃；进样量:1mL；分流比:1∶10，分流速度10mL/min。

1.3 标准溶液配制

准确称取香附酮0.05g于100mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，分别移取上液0.5mL、2.5mL、5mL、7mL、10mL于10mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，制得系列标准溶液，备用。

2.结果与分析

2.1 典型色谱图与线性范围

按1.2的色谱条件得到α-香附酮的典型色谱图（图1）。由图1可以看出，α-香附酮的出峰时间在8.2min，与其他物质完全分离，且没有杂质干扰，满足分析要求。

图1 α-香附酮的标准品与样品色谱图

取配制好的系列标准溶液，分别进样1mL，按色谱条件进行分析。以标准溶液浓度为横坐标（x，mg/mL），峰面积为纵坐标（y）绘制标准曲线，得到α-香附酮的线性回归方程y＝21.7926x－128.4379，回归系数r＝0.9996，满足线性要求（图2）。

图2 α-香附酮的标准曲线

2.2 精密度试验

取同一浓度的对照品溶液，在同样的色谱条件下重复进样6次进行检测，测得α-香附酮的相对标准偏差RSD为1.1431%（见表1），表明此方法有很好的精密度。

表1 α-香附酮的精密度试验

2.3 加标回收率试验

准确称取0.05g香附精油样品3份于10mL容量瓶中，分别加入2mL、3mL、4mL的标准储备溶液，再加入甲醇定容至刻度，充分振摇混合均匀，用0.45mm滤膜过滤，按色谱条件分析。试验结果见表2。

表2 回收率试验结果

2.4 样品测定

准确称取香附精油样品0.05g于10mL容量瓶中，加入甲醇定容至刻度，充分振摇混合均匀，制得样品溶液，用0.455mm滤膜过滤。在上述色谱条件下，待仪器就绪后，测试样品溶液，以2次重复测得的峰面积数据计算结果（见表3）。

表3 香附精油样品含量测试数据

3.结论

建立了中药提取物香附挥发油中α-香附酮的检测方法。此方法用甲醇提取香附挥发油中的α-香附酮，经DB-5毛细管色谱柱进行分离后，由氢火焰离子化检测器进行检测。方法简便、快速、准确、重现性好，对于建立香附挥发油的质量控制标准具有重要意义。

[1]中国药典，2010年版.一部[S].2010:241-242.

[2]林晓珊,吴惠勤,黄芳,等.香附挥发油的提取和GC/MS分析[J].2006,27(1):40-44.

[3]侯晓虹,李岩,唐星,等.HPLC法测定香附二氧化碳超临界流体萃取物中α型β-香附酮与香附烯酮含量[J].沈阳药科大学学报,2006,23(6):373-375.