种公牛精液品质鉴定

卜三平 马 博 （巴音郭楞职业技术学院 新疆 库尔勒 841000）

种公牛精液品质鉴定

卜三平 马 博 （巴音郭楞职业技术学院 新疆 库尔勒 841000）

从2012年9月份至2013年3月份，对宁夏四正生物工程技术研究中心种公牛站的10头荷斯坦种公牛的精液进行了7项指标测定。测定精液各项平均指标都超出国家标准，平均每头次射精量是4.086ml，精液密度平均每头次是10.73亿/ml，其中冻精活力、剂量、鲜精活力、精子前进运动数等均超出国家标准，分别为3.28%、0.025ml、4.36%、248万个/支。精子畸形率平均为16.46%，比国家标准低1.54%。细菌数平均是46.76个，比国家标准低753.24个。根据所测7项指标结果分析，宁夏四正生物工程技术研究中心种公牛站的精液品质是优良的。同时也反应种公牛的科学化饲养管理和种公牛生殖器官的正常发育。

种公牛 精液 品质

为了对宁夏四正生物工程技术研究中心种公牛站的生产情况作以判断，现对10头荷斯坦种公牛7个月的精液品质鉴定进行统计分析。根据国家制定精液品质鉴定的7项指标对精液量、精子密度、精子活力、前进运动精子数、精子畸形率、细菌数等分析宁夏四正生物工程研究中心种公牛站精液的品质。

1 材料和方法

1.1 材料 （1）精液稀释机(MD91K1314、法国)、精子密度测定仪(RS232型、法国)、电视显微系统(OOS921、台湾)、超净化工作台、电热恒温水浴箱(H.H.S215、上海)、细管分装一体机(MRS.3、法国)、打印机、低温操作柜(OO708S、澳大利亚)、显微镜(1000～2000倍)、液氮容器(CF400、法国)、冰箱、电热蒸馏器、高压消毒锅、细管(0.25ml)、稀释液、滴管、载玻片、盖玻片、集精管、精液。（2）年龄3～8岁的10头荷斯坦种公牛。

1.2 方法 测定宁夏四正生物工程技术研究中心种公牛站10头荷斯坦种公牛精液的7项指标结果与国家标准进行比较。鉴定种公牛的精液品质。

2 结果

2.1 精液的外观、色泽、气味 荷斯坦种公牛的鲜精外观呈浓厚乳白色和灰白色，有时也呈现淡黄色，不透明，稍带有腥味。由于鲜精的密度大，精液在静止状态时精液呈现翻腾滚动的云雾状态。

2.2 精液量 对种公牛采得射出精液的容量。对种公牛的采精时，如果采精的频率和采精时所间隔的时间不同都对精液量有很大的影响，而且会使精液的品质下降。四正生物工程技术研究中心种公牛站对种公牛的采精时采取了严格的措施。种公牛站对种公牛采精时采取3周采4d，每个采精日采2次精，其2次间隔30min左右(见表1)。

表1 10头荷斯坦种公牛精液量平均值统计 (ml/头次)

表1对种公牛站的10头荷斯坦种公牛每月可用精液量平均值进行统计，种公牛的每月可用精液量平均值都在正常范围内(参考值2～10ml/头次)。

2.3 精子密度 精子密度是一项评定精液品质的最重要指标，是确定稀释比例，推算有效精子数，对受胎有直接影响的重要因素。四正生物工程技术研究中心种公牛站用RS232型精子密度测定仪测定原精密度。使用RS232型精子密度测定仪测定精子的密度时，只能测定原精液的密度，不能测定含卵黄或乳类等有色稀释液的密度(见表2)。表2是对种公牛站的10头荷斯坦种公牛的精子密度每月的平均值进行统计。

表2对10头荷斯坦种公牛每月的平均精子密度测定，精子的平均密度为10.73亿/ml，比国标规定的密度下限(6.00亿/ml)高出4.73亿/ml，有的个体最低密度7.87亿/ml，比国家标准高出1.87亿/ml。

表2 10头荷斯坦种公牛精子密度平均值统计 (亿/ml)

2.4 精子品质的综合制定(见表3)

表3 10头荷斯坦种公牛精液品质指标(2012年9月～2013年3月)

表3对10头荷斯坦种公牛精液的鲜精活力、细管剂量、冻精解冻后活力、前进精子运动数、精子畸形率、细菌数进行统计分析：鲜精精子的平均活力是69.36%，超出国家标准4.36%，解冻后的剂量、活力分别是0.205ml、38.28%，分别超出国家标准是0.025ml、3.28%，精子前进运动数的平均精子数是1048万个/支，超出国家标准248万个/支。精子畸形率为16.46%，比国家标准低1.54%，细菌数平均是46.76个，比国家标准低753.24个。

2.5 精子的活力 精子的活力是精子运动的能力。可分两个方面进行检测，一方面是新鲜精液的活力检测，另一方面是冷冻后精液解冻后精液的活力检测。精子的运动有三种类型即摆动、旋转、曲线或直线前进运动，前进的速度有快有慢。精子运动的快慢主要取决于精子本身能量代谢水平。这种代谢活动受温度影响很大，温度适宜时速度快，温度偏低时速度慢。（1）鲜精精子的活力评定：种公牛站在测定新鲜精液精子活力时温度在38℃进行检测。对10头荷斯坦种公牛的鲜精精子的活力进行统计鉴定，在400倍的电视显微镜下测定10头荷斯坦种公牛鲜精精子的平均活力是69.36%，在正常的活力范围内。比国家标准(标准≥65%)高出4.36%。有的个体荷斯坦种公牛的鲜精的活力是65%，其下限仍符合要求。（2）冻精解冻后的活力评定：将每头荷斯坦种公牛的冻精取2支(吸管剂量0.25)分别在38℃的水浴恒温箱内解冻，解冻后10头荷斯坦种公牛有效精液的剂量是0.205ml，比国家标准(标准≥0.18ml)高出0.025ml，有的个体吸管剂量是0.197ml，下限仍然符合要求。解冻后立即在400倍的电视显微镜下测定精子的活力，测的解冻后精子的活力平均值是38.28%。比国家标准(标准≥35%)高出3.28%，有的个体解冻后精子的活力35%，其下限仍符合要求。

2.6 前进运动精子数 测定每头荷斯坦种公牛每一剂量解冻后呈直线运动的精子数。将稀释后的解冻精液取一小滴混匀用血球记数的方法测定，测定每头荷斯坦种公牛直线前进运动的平均精子数是1048万个/支，比国家标准(标准≥800万个/支)高出248万个/支。有的个体每剂量冻精解冻后的直线前进精子数是882万个/支，下限仍符合要求。

2.7 精子畸形率 精子的正常与否同受胎效果密切相关，如果在精液中，畸形(或异常)精子超过正常值，不仅降低受胎率，还有可能造成遗传障碍，畸形率越高，受胎率越低。因此，定期测定精液中的精子畸形率就成为评定精液品质优劣的基本指标。对10头荷斯坦种公牛的精子畸形率进行了严格的检测。精子畸形率平均值是16.46%，低于国家标准(标准≤18%)，有的个体荷斯坦种公牛精子畸形率是18%，其下限仍符合要求。

表4 国家制定的精液品质指标

2.8 细菌数 精液中含有的病原微生物及菌落数量是评定精液品质检查的重要指标，并作为海关进出口精液的重要检查项目。四正生物工程技术研究中心种公牛站的荷斯坦种公牛所采取的鲜精中的病原菌依国家检疫法检验，如果含有病原菌的精液不能使用。按照常规细菌检查方法测定精液中病原菌数，即取一定量的精液均匀铺在琼脂平面培养基上，经38℃恒温箱培养48h后计数，统计种公牛站10头荷斯坦种公牛精液细菌数的平均数是46.76个，低于国家标准(标准≤800个)。

3 讨论与小结

根据精液品质鉴定的7项指标对宁夏四正生物工程研究中心种公牛站的10头荷斯坦种公牛精液各项指标进行检测，通过检测结果说明宁夏四正生物工程研究中心种公牛站的种公牛的精液各项指标都超出并达到国家标准。反映了种公牛站对种公牛在不同年龄阶段、不同季节都达到了良好的饲养和管理水平。使种公牛在不同年龄阶段生殖器官得到较好的生长发育。也是衡量精液在稀释、保存、冷冻和运输过程中品质变化及处理效果的标志，并作为掌握种畜繁殖能力及改善饲养管理的依据。

[1] 王建辰 章孝荣. 动物生殖调控[M]. 合肥: 安徽科学技术出版社. 1998.

[2] 陈伟生. 牛冷冻精液生产质量管理手册[M]. 北京: 中国农业出版社. 农业部牛冷冻精液质量监督检验测试中心. 2006

S823.2

A

1007-1733(2014)02-0001-03

2013–11–06）