2014年信阳市政府招标H5N1高致病性禽流感疫苗免疫效果评估报告

孙何云 薛邦玉 刘宏斌 马超锋

中图分类号：S858.312.4 文献标识码：B 文章编号：1673-1085（2014）12-0040-03

禽流感是禽流行性感冒（Avian influenza，AI）的简称。是由正粘病毒科流感病毒属A型禽流行性感冒病毒引起的一种禽类（家禽和野禽）传染病。禽流感病毒感染后可以表现为轻度的呼吸道症状、消化道症状，死亡率较低；或表现为较严重的全身性、出血性、败血性症状，死亡率较高。AIV根据其对家禽致病力的不同分为3种，即高致病性、低致病性和无致病性。其中，高致病性禽流感病毒可以直接感染人类，并造成死亡。高致病性禽流感是由H5和H7亚毒株（以H5N1和H7N7为代表）引起的疾病。高致病性禽流感因其在禽类中传播快、危害大、病死率高，被世界动物卫生组织列为A类动物疫病，我国将其列为一类动物疫病。现阶段，预防禽流感病毒感染主要依靠H5N1亚型禽流感灭活疫苗免疫。我国从2004年开始对高致病性禽流感实行强制免疫。信阳市政府招标的禽流感疫苗有H5N1高致病性禽流感灭活疫苗（Re-4+Re-6）和H5N1高致病性禽流感灭活疫苗（Re-6）两种，为了解这两种禽流感疫苗免疫效果，信阳市动物疫病预防控制中心组织相关人员历时3个月，对信阳地区高致病性禽流感防疫状况进行了深入的调查分析，掌握了信阳市禽流感免疫状况的第一手资料，以期为信阳市的重大动物疫病防控提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 样品采集 2014年3月～2014年6月， 各县区动物疫病预防控制中心从信阳地区七县两区规模养殖场及散养户，选取健康家禽，共采集血液样品3653份，通过翅静脉无菌采集全血2～3ml，冷藏条件下送达实验室。

1.1.2 样品的制备 将采集的血液样品于3500r/min条件下离心10min，取上清液于1.5ml灭菌离心管中，-20℃保存备用待检。

1.1.3 检测试剂盒及仪器设备

1.1.3.1 检测试剂盒 禽流感H5亚型（Re-4株）（批号：2013005）、（Re-6株）（批号：2013006）血凝抑制试验诊断抗原和禽流感H5亚型（Re-4株）阴、阳性血清（批号：2013004）及禽流感H5亚型（Re-6株）阴、阳性血清（批号：2013004），购自哈尔滨维科生物技术开发公司。

1.1.3.2 1%鸡红细胞悬液 采集2～3只无禽流感和新城疫等抗体的健康公鸡自行配制。

1.1.3.3 仪器设备 LC-800低速离心机（科大创新股份有限公司中佳分公司）；Eppendorf 10～1000μl单道移液器及25～300μl多道移液器（德国Eppendorf公司）；303系列电热恒温培养箱（上海树立仪器仪表有限公司）。

1.2 方法

1.2.1 禽流感抗体检测采用血凝抑制试验（HI），按照国家标准GB/18936-2003进行。

血凝试验抗体检测方法判定标准：以完全抑制4单位抗原的最高血清稀释倍数判为该血清的HI效价。当阳性对照血清的HI效价与已知效价误差不超过1个滴度，阴性对照血清的HI效价不高于2log2时，试验方可成立。被检血清HI效价≤3log2判为阴性；=判为4log2可疑（可疑样品应重检，重检效价≥4log2判为阳性，≤3log2判为阴性）；≥5log2判为阳性。

1.2.2 群体免疫抗体阳性率达到70%判定为群体合格。

1.2.3 疫苗使用情况调查采取现场调查和问卷调查相结合的方式，根据各县区疫苗调拨使用情况，对2014年上半年政府招标采购每个中标疫苗生产企业的每种疫苗开展了临床免疫安全性调查。主要调查疫苗免疫注射后3d内发生副反应，包括应激反应、应激发病、应激死亡、应激流产等。

2 结果

2.1 信阳市H5N1高致病性禽流感灭活疫苗使用情况调查 见表1、表2、表3。

2.2 高致病性禽流感疫苗应用效果调查结果 2014年上半年全市共调查免疫鸡只500631只，鸡群免疫后3d内出现应激反应的鸡只70只，应激反应率为1.40；应激发病鸡只数0只；应激死亡0只。详见表4。

2014年上半年全市共调查免疫水禽89452只，群体免疫后3d内出现应激反应的水禽15只，应激反应率为1.68；应激发病水禽数0只；应激死亡0只。详见表5。

3 分析

3.1 鸡H5N1高致病性禽流感灭活疫苗（Re-4+Re-6）检测情况分析 从图1可以看到，各县区禽流感抗体合格率均在70%以上，符合国家的群体合格率标准。H5N1高致病性禽流感灭活疫苗（Re-4）抗体，息县、潢川、淮滨、浉河、新县抗体合格率均为100%，平桥为83.33%，其余县区均在90%以上；H5N1高致病性禽流感灭活疫苗（Re-6）抗体息县、潢川、淮滨、新县抗体合格率为100%，平桥为86.66%，其余县区均在90%以上。

从图2可以看到，检测的各个疫苗厂家禽流感抗体合格率均在70%以上，符合国家的群体合格率标准。

3.2 水禽H5N1高致病性禽流感灭活疫苗（Re-6）检测情况分析 水禽H5N1高致病性禽流感灭活疫苗（Re-6）我市检测了辽宁益康和乾元浩两个厂家，抗体合格率分别为80%和92%，均在70%以上，免疫效果良好，特别是乾元浩达到90%以上。

3.3 H5N1高致病性禽流感灭活疫苗免疫的有效性 蛋鸡是我市鸡群中禽流感疫苗主要的受免对象。从表4看到，我市政府采购的几个疫苗生产企业生产的疫苗注射蛋鸡后安全性较好，应激发病、死亡均较少出现。调查中鸡群出现应激反应率1.40。像哈维科、哈药集团、乾元浩的禽流感疫苗注射后的副反应率几乎为零，蛋鸡的产蛋性能受影响较小，在产蛋高峰期之前和之后注射，蛋鸡的产蛋率出现短时期的下降，下降3%左右，一星期后能回到产蛋高峰期。

疫苗免疫后有效性好，保护率较高，未出现临床发病的情况，疫苗保护力较强，保护效果良好。

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