2013年莱州市感染性腹泻病原菌检测分析

刘宗东　史玲杰　胡彬

【摘 要】目的：了解莱州市感染性腹泻病原谱的构成及在不同时间、人群中的分布状况，为制定综合防治措施提供依据。方法：采集2013年莱州市腹泻患者标本，检测病原菌。结果：检测295份腹泻患者标本，检出病原菌90株，检出率为30.51%，病原谱包括沙门氏菌30株（30.33%）、副溶血性弧菌19株（21.11%）、铜绿假单胞菌12株（13.33%）、致泻大肠杆菌11株（12.22%）、河弧菌6株（6.67%）、气单胞菌5株（5.56%）、志贺氏菌4株（4.44%）、拟态弧菌、类志贺邻单胞、创伤弧菌各1株（1.11%），未检出霍乱弧菌和耶氏菌。不同人群中男性为31.71%（52/164），女性为29.01%（38/131），差异无统计学意义（χ2 =0.25，P>0.05）；年龄组31～40岁为44.86%（13/29），41～50岁为42.42%（14/33），不同年龄组差异有统计学意义（（χ2 =10.32，P<0.05）），10.8、9月检出率依次为50.00%（16/32）、39.39%（26/66）、35.85%（19/53），不同月份差异显著（χ2=18.39，P<0.05），结论：莱州市感染性腹泻病原菌种类繁多。但主要以沙门氏菌和副溶血性弧菌为主，腹泻多发生在夏秋季节，应继续加强检测工作。

【关键词】感染性腹泻；病原菌；病原谱

【中图分类号】R472 【文献标识码】B 【文章编号】1004-7484（2014）02-0906-02

莱州市疾病预防控制中心自2010年起承担山东省腹泻症候群检测工作，每年5～10月份对哨点医院肠道门诊腹泻病例采集粪便样本，进行病原菌分离鉴定。为了解莱州市感染性腹泻病原谱的构成，今后防控病原菌引起腹泻病提供依据，我们对 2013年莱州市腹泻患者病原菌检测结果进行分析。

1 材料与方法

1.1 材料 标本来自2003年莱州市16个乡镇医院肠道门诊，选择每日排便3次或以上、且大便性状有改变（呈稀便、水样便、粘脓便或脓血便等）的门诊病例。

1.2 方法

1.2.1 标本采集与处理 用5支无菌棉拭多点采集粪便标本，插入50ml旋盖密封离心管的C-B运输培养基中（购自杭州天和微生物试剂有限公司），12h内送莱州市疾病预防控制中心进行沙门氏菌、志贺氏菌、致泻大肠杆菌、铜绿假单胞菌、耶氏菌、霍乱弧菌、副溶血性弧菌、河弧菌、气单胞菌、拟态弧菌、类志贺邻单胞、创伤弧菌等病原菌检测。在装有标本的培养基中，将棉签分别放入碱性蛋白胨水（APW）、mEC、SBG、改良PBS增菌液，同时直接接种麦康凯（Mac）和XLD平板。

1.2.2 分离培养 于增菌液中，选择生长最茂盛的培养基表面或菌膜下表层，取2～3滴加入霍乱01、0139胶体金试纸中，同时取一接种环APW增菌液分别划线接种硫代硫酸盐柠檬酸钠胆盐蔗糖琼脂（TCBS）、庆大琼脂、科玛嘉弧菌显色培养基和康凯琼脂（Mac）（北京陸桥技术有限责任公司产品），自mEC增菌液接种0157显色培养基，SBG增菌液接种沙门氏显色培养基，改良PBS4℃增菌后接种耶氏菌选择培养基和MAC平板。自从庆大琼脂上选择5～10个可疑菌落做霍乱弧菌血清凝集实验；从TCBS琼脂、科玛嘉弧菌显色培养基上选择5～10个单菌落，做其他弧菌鉴定实验；从Mac、XLD平板上选择单菌落做气单胞菌和类志贺邻单胞菌、大肠杆菌的鉴定实验。

1.2.3 生化检测 自培养基平板上挑取可疑菌落接种（KIA/MIU）进行生化初筛、粘丝实验和氧化酶实验阳性者初步鉴定为弧菌，保存于半固体中进一步集中筛选【1】，菌株经VITEK 2 COMPACT（法国BioMérieux公司）生化系统鉴定。

1.2.4数据统计分析 数据采用E xcel2003软件进行统计分析和χ2检验。

2 结果

2.1 病原谱特点 2013年5～10月共检测295份腹泻患者标本，检出病原菌90株，检出率为30.51%，其中沙门氏菌30株（30.33%）、副溶血性弧菌19株（21.11%）、铜绿假单胞菌12株（13.33%）致泻大肠杆菌11株（12.22%）、河弧菌6株（6.67%）、气单胞菌5株（5.56%）、志贺氏菌4株（4.44%）、拟态弧菌、类志贺邻单胞、创伤弧菌各1株（1.11%），未检出霍乱弧菌和耶氏菌。

2.2 不同月份病原菌检出情况 病原菌检出率， 5月为13.04%（3/23），6月为20.37%（11/54），7月为22.39%（15/67），8月为39.39%（26/66），9月为35.85%（19/53），10月为50.00%（16/32），差异有统计学意义（χ2=18.39，P<0.05），见表1。

2.3 不同人群病原菌检出情况 病原菌检出率，男性为31.71%（52/164），女性为29.01%（38/131），差异无统计学意义（χ2 =0.25，P>0.05）；2天～10岁为28.33%（17/60），11～20岁为18.75%（6/32），21～30岁为18.60%（8/43），31～40岁为44.86%（13/29），41～50岁为42.42%（14/33），51～86岁为32.65%（32/98），差异有统计学意义（χ2 =10.32，P<0.05），见表2。

3 讨论

莱州市感染性腹泻患者以中青年为主，病原谱的种类繁多，及时准确检测引起腹泻的病原菌，减少患者病痛和制定防治措施有着十分重要意义[2]，本次检测总阳性率为30.51%，不同于青铜峡市[3]（15.22%），表明感染性腹泻病原谱有着本地地域特点。检出的90株细菌，以沙门氏菌检出率最高位30.33%，沙门氏菌引腹泻或食物中毒的来源是动物性食品，特别是肉类，也可以是家禽、蛋类、奶类食品，以6月和10月检出较高，12.96%、43.75%，这与夏秋季气温高、湿度大，细菌繁殖能力强，食物容易受到细菌污染有关，温度湿润的环境有利于沙门氏菌生长和传播[4]，另外夏秋季节蚊蝇孳生繁多，导致食物受污染的机会增多，增加了人群感染沙门氏菌的机会。因此，沙门氏菌感染患者的增加，提示在日常生活中应加强盐腌渍制品和熟食冷荤类管理，注意蔬菜水果蛋类食品卫生，做好对食品的加工、储存、运输等各个环节监督。在年龄分布上，31-40岁、51-85岁年龄组检出率较高，与何战英[5]等人研究大致相同。

副溶血弧菌为革兰氏阴性嗜盐性海洋细菌，于1950年从日本一次暴发性食物中毒中分离发现[6]。该菌常存在于近海岸的海水、海底沉积物、海产品及盐渍食品中，主要引起食物中毒和急性腹泻，是我国沿海地区食物中毒中最常见的致病菌[7] ，莱州市西邻渤海莱州湾，人群中不同性别检出率无差异，主要原因是该市市民历来有喜食水产品的习惯，副溶血弧菌感染的机会大致均等。带菌水产品是诱发副溶血弧菌的原因食品[8]，因此，市民在食用时应煮熟、煮透，如果水产品生食或加工不当，易造成疾病的发生，故除加强监测外，对市民依据据病原菌特点采取有针对性的健康教育和相关知识宣传培训，增加市民食品安全意识，彻底煮熟以动物和水产品为源的食物，特别是禽类、肉类、蛋类和海产品类食物，以减少病原菌引起的食源性疾病的发生，保障居民的身体健康具有重要意义。

参考文献：

[1] 周伟艳，徐景野，章丹阳，等.应用筛检方法快速检测小海产品中副溶血性弧菌[J].中国卫生检验杂志，2011，21（3）：639-641.

[2] 杨元娟，杨元梅，刘绍英. 128例小兒急性腹泻粪便病原菌的培养分析 [J]. 重庆医学， 2000，29（4）：342-343.

[3] 李广琴，夏艳荣，刘锦平等。青铜峡市2011年腹泻症候群病原菌监测结果分析[J]。宁夏医学杂志，2012，34（7）：672-673

[4] 朱锦德，张晓航，田桢干，等。上海口岸饮食和公共场所从业人员沙门氏菌调查分析[J]。中国病原生物学杂志，2008，3（001）：80

[5] 何战英，刘桂荣，曲梅，等。2008年夏季北京市沙门氏菌腹泻监测结果分析[J]。疾病监测，2009（005）：352-353

[6] 周正任. 医学微生物学 [M]. 第6版. 北京：人民卫生出版社， 2006.

[7] 方伟，杨杏芬，柯昌文. 副溶血性弧菌分型研究进展 [J]. 中华疾病控制杂志， 2008，12（5）：468-472.

[8] 李映霞，吴琪，黄芳，等.广州市海珠区水产品副溶血性弧菌污染状况调查分析[J]。中国卫生检验杂志，2012，21（5）：1175-1176.

基金项目：课题编号：2012ZX10004-201-002.国家科技重大专项课题，

子课题：症候群细菌学研究