骨科药酒的薄层鉴别研究

胡玉良

（广州中医药大学附属中山中医院，广东 中山 528400）

骨科药酒的薄层鉴别研究

胡玉良

（广州中医药大学附属中山中医院，广东 中山 528400）

目的：建立骨科药酒的薄层鉴别方法。方法：采用薄层色谱法对方中药材进行定性鉴别研究。结果：在薄层色谱中分别检出大黄、当归、川芎、木香、石菖蒲、栀子的特征斑点，阴性对照均无干扰。结论：该方法简便、专属性强、重现性好，可用于骨科药酒的质量控制。

骨科药酒；大黄；当归；川芎；木香；石菖蒲；栀子；薄层色谱法

骨科药酒为我院制剂，由大黄、当归、川芎、木香、石菖蒲、栀子等 15味中药制成，具有活血化瘀、舒筋通络的功效，临床上用于治疗急慢性跌打瘀伤。为控制该制剂质量及保证临床疗效的稳定，对骨科药酒中的主要药味大黄、当归、川芎等进行了薄层色谱研究，参考《中国药典》及有关文献的方法进行改进并多次试验摸索，找寻可作为骨科药酒质量控制的方法。

1 实验材料与仪器

1.1 实验材料

骨科药酒（由我院制剂室提供，批号：20120804、20120928、20121109），大黄（121249-201003）、当归（120927-201014）、川芎（120918-200809）、木香（120921-201008）、石菖蒲（110757-201008）、栀子（120986-201007）等，均由原中国药品生物制品检定所提供。硅胶G薄层板（青岛海洋化工厂分厂，批号为：20120418），薄层层析硅胶G（青岛海洋化工有限公司分厂，批号：013012），羧甲基纤维素钠（广州市化学试剂玻璃仪器批发部，批号：960501）；其余试剂均为分析纯。

1.2 实验仪器

KQ3200E医用超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）、JA1203电子天平（上海天平仪器厂）、电热恒温水浴锅（上海衡平仪器仪表厂）、直热式电热恒温干燥箱（广州东方电热干燥设备厂）。

2 方法与结果

2.1 大黄的薄层鉴别

取本品10 mL，加水 5 mL，盐酸 1 mL，置水浴中加热30 min，立即冷却，用乙醚提取 2次，第1次 20 mL，第 2次 10 mL，合并乙醚提取液，挥干，残渣加乙酸乙酯 1 mL使溶解，作供试品溶液。另取大黄对照药0.5 g，加乙醇15 mL，超声处理20 min，滤过，滤液蒸干，残渣加水5 mL，盐酸1 mL，使溶解，置水浴上加热30 min，同法制成对照药材溶液。缺大黄阴性样品，按供试品溶液制备方法处理，制成阴性对照溶液。 照《中国药典》（2010年版）一部薄层色谱法[1]试验，吸取上述 3种溶液各5 μL，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶 G薄层板上，以石油醚（30～60℃）-甲酸乙脂-甲酸（15∶5∶1）的上层溶液为展开剂[2]，展开，取出，晾干，氨熏至斑点显色清晰，分别于日光下和紫外光灯（365 nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰。结果见图1。

图1 大黄TLC图

2.2 当归、川芎的薄层鉴别

取本品10 mL，加乙醚20 mL，超声处理10 min，取乙醚液，蒸干[3]，残渣加乙醇1 mL使溶解，作为供试品溶液。另取当归、川芎对照药材各0.5 g，分别加乙醚20 mL，超声处理10 min，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇 1 mL使溶解，作为对照药材溶液。缺当归、川芎阴性样品，按供试品溶液制备方法处理，制成阴性对照溶液。照《中国药典》（2010年版）一部薄层色谱法[1]试验，吸取上述 4种溶液各5 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯（4∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365 nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相对应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照无干扰。见图2。

图2 当归、川芎TLC图

2.3 木香的薄层鉴别

取本品 20 mL，水浴加热，挥去乙醇，加乙醚20 mL，密塞，超声处理 15 min，取乙醚液，挥干，残渣加乙酸乙酯[4]1 mL使溶解，作为供试品溶液。另取木香对照药材0.5 g，加乙醚20 mL，同法制得对照药材溶液。缺木香阴性样品，按供试品溶液制备方法处理，制成阴性对照溶液。依照《中国药典》（2010年版）一部薄层色谱法[1]试验，吸取上述3种溶液各5 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-环己烷-甲醇（5∶3∶0.1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以 5%香草醛硫酸溶液，于105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰。见图3。

2.4 石菖蒲的薄层鉴别

取本品20 mL，加石油醚（60～90℃）20 mL[1]，超声处理 30 min，分取石油醚液，蒸干，残渣加石油醚（60～ 90℃）1 mL使溶解，作供试品溶液。另取石菖蒲对照药材0.2 g，加石油醚（60～90℃）20 mL，同法制成对照药材溶液。缺石菖蒲阴性样品，按供试品溶液制备方法处理，制成阴性对照溶液。照《中国药典》（2010年版）一部薄层色谱法[1]试验，吸取上述 3种溶液各 5 μL，分别点于同一硅胶 G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯（4∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，于紫外光灯（365 nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相对应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照无干扰。结果见图4。

图3 木香TLC图

图4 石菖蒲TLC图

2.5 栀子的薄层鉴别

取本品40 mL，加在中性氧化铝柱（100～200目，5 g,内径2 cm）上，用乙醇40 mL洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加乙醇 1 mL使溶解，作供试品溶液。另取栀子对照药材1 g，加75%乙醇10 mL，置温水浴中浸泡 2 h，滤过，滤液作为对照药材溶液。缺栀子阴性样品，按供试品溶液制备方法处理，制成阴性对照溶液。照《中国药典》（2010年版）一部薄层色谱法[1]试验，吸取上述 3种溶液各5 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水（15∶40∶22∶10）为展开剂，在10℃以下展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在 110℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰。结果见图5。

图5 栀子TLC图

3 讨论

大黄的鉴别中，样品加水及盐酸后置水浴中加热处理，在水解同时，除去乙醇，简化了操作。鉴于当归、川芎均为伞形科植物，含有相同的活性成分，如阿魏酸、蒿本内酯等，相互干扰，故采用缺当归、川芎双阴性的方法，同时鉴别两种药材。实验中样品和对照药材处理多用超声法，方法简便，提取效果好。

本研究中所列薄层方法只采用了对照药材，未使用对照品，条件允许情况下，可增加相应药材的对照品作为参照物，使方法更完善。曾对处方中的其他药味进行了研究，但结果均是阴性有干扰或样品主斑点不明显。原因可能是样品中药味众多，混合后化学成分发生了变化，或者是不同药材中含有相同成分物质（如乳香、没药）导致干扰，有待进一步研究。

本研究所采用的方法稳定，斑点显色清晰，专属性及重现性好，可作为骨科药酒质量控制的方法。

[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典（2010年版）一部[M].北京：中国医药科技出版社，2010.

[2] 梁毅，高平，张勤.活血止痛合剂的薄层鉴别研究[J].时珍国医国药，2008，19（9）：2210-2212.

[3] 李焰红,王瑞媛.一柱天酒质量标准研究[J].山东医药工业，2003，22（6）：17-18.

[4] 郝丽静，冯天铸.五香止痛散质量标准研究[J].时珍国医国药，2007，18（12）：3076.

Study on the Orthopaedic Medicated Wine by TLC Identification Method

Hu Yuliang（Zhongshan Hospital of Guangzhou University of TCM，Guangdong Zhongshan 528400，China）

Objective：To establish a TLC identification method for orthopaedic medicated wine.Methods：Using TLC method to identify qualitatively the medicines in the wine.Results：The characteristic spots of rheum,angelica sinensis,ligusticum wallichii,radix vladimiriae,rhizome and jasmine were detected respectively by TLC and the negative controls showed no interference.Conclusion：This method was convenient and characteristic with good reproducibility,and it can be used for the quality control of orthopaedic medicated wine.

Orthopaedic Medicated Wine；Rheum；Angelica Sinensis；Ligusticum Wallichii；Radix Vladimiriae；Rhizome；Jasmine；TLC

10.3969/j.issn.1672-5433.2014.05.007

2014-02-08）

胡玉良，女，主管药师。研究方向：医院药学。E-mail：86841068@qq.com