血管内皮生长因子在乳腺癌表达的作用及意义*

刘春富 ，李 卫 ，许 军 ，宫金伟

（1.哈尔滨医科大学附属第四医院普外科，黑龙江 哈尔滨 150001；2.哈尔滨市第一人民医院骨科，黑龙江 哈尔滨 150001）

血管生成是肿瘤生长和转移的关键步骤［1］，目前所知血管内皮生长因子（VEGF）是肿瘤血管生成过程中作用最强、特异性最高的促血管生长因子。在大多数实体瘤组织中VEGF呈高水平表达，并与肿瘤的生长及转移密切相关［2－3］。笔者以人类乳腺癌为观察材料，应用免疫组织化学检测法，分析VEGF在乳腺癌组织中的表达情况，以探讨VEGF在乳腺癌组织中的表达与肿瘤临床和病理的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2004年6月至2008年8月我院临床医院手术切除乳腺癌蜡块标本65例。患者均为女性；年龄25～77岁，平均53岁；术前均未经任何抗癌治疗；乳腺癌按世界卫生组织（WHO）1998年分类标准进行病理分型，导管内癌23例，浸润性导管癌20例，髓样癌10例，腺癌8例，湿疹样癌2例，鳞状细胞癌2例；组织学分级，Ⅰ级18例，Ⅱ级22例，Ⅲ级25例；有淋巴结转移46例，无淋巴结转移19例；肿瘤大小不超过3 cm 47例，大于3 cm 18例。每例标本均收集其相应的癌旁组织作对照组织。

1.2 材料与方法

应用链霉素抗生素蛋白－过氧化酶（S－P）免疫组化技术检测VEGF，每例标本做4μm厚的切片，肿瘤切片进行高压抗原修复，DAB显色，并以PBS缓冲液代替第一抗体做阴性对照，以血管内皮细胞着色为阳性对照。VEGF单克隆抗体购自上海长嘉生物技术有限公司，S－P免疫组化试剂盒和DAB试剂盒均购自福州迈新生物技术开发公司。

1.3 阴阳性结果判定标准［4］

以癌细胞胞浆或细胞核呈黄色或棕黄色为阳性，每张切片由2名病理医师双盲观测5个具有代表性的高倍视野，每个视野计数200个肿瘤细胞，依据镜下阳性染色细胞占癌细胞总数的百分率综合判定。阴性（－）：无棕黄色染色或阳性细胞数平均少于10%；阳性（＋）：阳性细胞数平均大于10%。

1.4 统计学处理

应用 χ2检验和相关分析，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

65例乳腺癌组织中VEGF阳性表达率为78.46%（51／65），VEGF阳性染色部位主要为细胞质及细胞膜，肿瘤周边以阳性为主，侵袭缘尤为明显（图1）。详见表1。

图1 VEGF蛋白位于乳腺癌细胞浆呈棕黄色颗粒阳性（×400）

表1 VEGF表达与乳腺癌临床病理特征的关系

3 讨论

乳腺癌的生长和转移是一个复杂的过程，其中血管生成是癌肿物生长中的一个重要事件，肿瘤在表现其生长、转移等生物学行为时与其中的微血管增生有密切关系，无论原发性或转移性肿瘤，其持续生长都必须依赖于新生血管的形成［5］。目前发现，VEGF是可以特异地促进血管内皮细胞生长的一种多功能的细胞因子，可表达人体的多个正常组织及绝大多数的肿瘤组织［6］。VEGF作为肿瘤组织中最主要的促血管生成因子，不仅与乳腺癌血管发生和增殖有关，并直接与其浸润、转移有关［7］。黄选东等［8］用免疫组化RT－PCR法和S－P法检测42例乳腺癌和相应正常乳腺组织中VEGF的表达，结果显示，42例乳腺癌组织中VEGF阳性表达明显高于正常乳腺组织。刘兰芳等［9］认为，VEGF的表达与组织学分级呈正相关，随着组织学分级的增高，VEGF阳性率也升高；李日乐等［10］采用免疫组化检测VEGF在101例浸润性乳腺癌组织中的表达，结果显示，乳腺癌组织中的VEGF表达与组织分化、淋巴结转移、远处转移及早期死亡密切相关。刘鹏等［11］采用免疫组织化学检测109例乳腺癌组织中VEGF的表达情况，结果显示，VEGF强表达组淋巴结转移率高及病理分级也高。本试验结果显示，乳腺癌组织中VEGF表达阳性率明显高于其癌旁正常组织；Ⅲ级乳腺癌组织中VEGF表达阳性率明显高于Ⅰ～Ⅱ级乳腺癌组织，说明VEGF的表达与乳腺癌的分级密切相关。研究结果与相关文献报道一致。本试验还发现VEGF表达与乳腺癌的淋巴结转移情况相关，伴有淋巴结转移的乳腺癌组织中VEGF阳性表达率高，其原因可能是VEGF通过一系列复杂的机制诱导血管的形成，为肿瘤的生长提供充足的营养，从而促进肿瘤体积增大。Ohta等［12］认为，VEGF除了促进血管内皮细胞增殖外，对淋巴管内皮细胞同样具有促分裂和增殖作用，诱导“淋巴管生成”，有利于肿瘤细胞浸润淋巴管，促进肿瘤向淋巴结转移。本试验结果表明，乳腺癌组织中的VEGF表达与肿瘤生长和浸润以及淋巴结转移密切相关。

综上所述，VEGF可促进乳腺癌的浸润和转移，在乳腺癌的发展、转移中起重要作用，检测VEGF的表达可作为乳腺癌恶性程度、浸润转移等生物学行为的参考指标。

参考文献：

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［4］曾谷清，方松清，刘 彦，等.血管内皮生长因子在乳腺癌组织中的表达及其临床意义［J］. 南华大学学报：医学版，2003，31（3）：269 －271.

［5］张文江，刘爱东，庞久玲，等.血管内皮生长因子在乳腺癌中的表达及其意义［J］. 临床医学，2007（4）：43 －44.

［6］张 晓，徐文华，葛银林，等.VEGF基因特异性，siRNA转染后对人乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响［J］.细胞与分子免疫学杂志，2007，23（1）：14 － 17.

［7］廖晓锋.血管内皮生长因子与肝细胞癌［J］.国外医学：外科学分册，2001，28（2）：68 －70.

［8］黄选东，周雪瑞，沈 阳，等.乳腺癌VEGF的表达与肿瘤生物学特性的关系［J］. 临床肿瘤学杂志，2005，10（6）：625 －630.

［9］刘兰芳，申兴斌，赵晓明，等.乳腺浸润性导管癌血管内皮生长因子和雌激素、孕激素受体的表达及意义［J］.陕西医学杂志，2005，34（3）：295－297.

［10］李日乐，田明铭，汤如勇.乳腺癌血管内皮生长因子的表达及意义［J］.中国癌症杂志，1998，8（3）：163 －165.

［11］刘 鹏，孙 慧，宁连胜，等.血管内皮生长因子与乳腺癌临床病理因素及预后的关系［J］. 天津医科大学学报，2002，8（2）：144 －146.

［12］Ohta Y，Watanabe Y，Murakami S，etal.Vascular endothelial grow th factor and lymph nodemetastasis in primary lung cancer［J］.Br JCancer，1997，76（8）：1041 － 1045.