益精灵口服液大鼠长期毒性实验研究

王林丽，李卓恒，吕金胜，卢来春

（中国人民解放军第三军医大学大坪医院药学部，重庆 400042）

益精灵口服液根据中医药理论组方原则，以何首乌、枸杞子、菟丝子、怀牛膝、补骨脂、当归、茯苓、陈皮组方，方中药材大多具有增强免疫、改善记忆、营养神经、延缓衰老等作用。为给临床安全用药提供科学依据，笔者采用益精灵口服液对大鼠进行了灌胃30 d的毒性试验研究，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 试药与动物

益精灵口服液（由中国人民解放军第三军医大学第三附属医院提供，批号为 101216，规格为每支 10 mL）。SD大鼠，体重（117±6）g，由中国人民解放军第三军医大学大坪医院实验动物中心提供，动物受试环境为中国人民解放军第三军医大学大坪医院实验动物中心，试验设施使用合格证号SYXK－（军）SYXK－（军）2010－032，动物质量合格证号 SCXK － （军）2010－008。饲料、饮水和垫料均符合试验动物质量控制标准。

1.2 试验动物分组及给药方法［1］

SD大鼠，先留察1周，然后选出健康大鼠80只益精灵口服液，随机分为4组，每组雌雄各10只。将4组大鼠随机分为对照组及益精灵口服液低剂量［0.5 mL／（kg·d）］组、中剂量［2.5mL ／（kg·d）］组、高剂量［5mL ／（kg·d）］组，分别相当于临床患者每日用量的1，5，10倍［按照临床人体用药30mL／d，成人体重以 60 kg／d 计算，相当于 0.5mL ／（kg·d）］服用量，连续灌胃30 d，对照组采用等量生理盐水灌胃。

1.3 检测指标［2］

每周称量体重1次，并根据体重变化调整给药量，于每日晨给药，给药前12 h禁食不禁水，给药后观察记录动物的饮食、粪便、行为等一般状态。给药30 d后各组随机处死雌雄大鼠各5只，取尾静脉血进行血常规检查，包括测定血红蛋白（Hb）、白细胞计数（WBC）、红细胞计数（RBC）；血液生化指标检查，包括天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、总胆红素（TBil）；并取大鼠的心、肝、肺、肾作组织病理学检查。其余大鼠停药继续喂养观察10 d，于停药后第11天处死作组织病理学检查。

1.4 统计学处理

采用SPSS13.0统计软件，组间两两比较采用t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 一般状况

试验期间有个别大鼠死亡，其中对照组无大鼠死亡，低、中、高剂量组各死亡1只，死亡率均为5.00%，经解剖未见异常，低、中、高剂量组大鼠每次给药后其摄食饮水、大小便、活动情况均未见异常。结果表明，各组动物的死亡并无剂量反应关系，经解剖证实应属自然疾病或其他原因所致。

2.2 体重增长

对照组和各试验组大鼠每给药7 d后称重1次，平均体重变化见表1。可见，各组平均体重均有增长，但各剂量组的平均体重变化与对照组比较，差异无统计学意义。

表1 各组大鼠平均体重变化比较（ ± s，g，n ＝20）

表1 各组大鼠平均体重变化比较（ ± s，g，n ＝20）

组别 给药前7 d 14 d 21 d 30 d对照组低剂量组中剂量组高剂量组117.05±3.73117.70±3.48117.55±3.65119.20±3.43118.15±3.17118.95±3.19118.00±3.09119.00±3.45118.55±1.76118.55±3.30117.85±2.99119.15±2.94118.10±2.27118.95±2.87117.65±3.50119.30±3.18118.65±2.89118.90±3.13118.40±3.02119.10±3.13

2.3 肝肾功能生化指标

结果见表2。各剂量组主要肝肾功能生化指标与对照组比较，差异无统计学意义。

表2 各组大鼠主要肝肾功能生化指标比较（ ± s，n＝20）

表2 各组大鼠主要肝肾功能生化指标比较（ ± s，n＝20）

组别 AST（IU ／L） ALT（IU ／L） TBil（μmol／L）雌雄雌雄雌雄对照组低剂量组中剂量组高剂量组0.39±0.010.40±0.010.39±0.020.39±0.020.40±0.010.37±0.010.39±0.020.39±0.023.78±0.193.89±0.203.78±0.243.87±0.023.82±0.353.86±0.313.72±0.273.8±0.180.75±0.040.73±0.050.71±0.050.74±0.050.72±0.040.77±0.050.74±0.040.77±0.06

2.4 血常规指标

结果见表3。各剂量组血常规与对照组比较未见异常。

2.5 组织病理学检查

连续给药30 d后，对照组及各剂量组动物的心、肝、肾、肺未见明显的病理改变。停药11 d后，对照组及各剂量组动物的心、肝、肾、肺也未见明显的病理改变。

3 讨论

本试验采用益精灵口服液以灌胃法给药30 d进行大鼠长期毒性试验研究，根据总投药量计算各组每天平均投药剂量，分别为低剂量［0.5mL ／（kg·d）］、中剂量［2.5mL ／（kg·d）］、高剂量［5mL ／（kg·d）］，相当于临床每日用药量的 1，5，10 倍。试验期间，各剂量组体重增长情况与对照组相比无明显差异，血常规未发生明显变化，结果表明，以相当于临床患者每日用量1，5，10倍的剂量，连续给予大鼠益精灵口服液灌胃30 d，并无毒性反应，说明其临床用药较安全。

表3 各组大鼠血常规指标比较（ ± s，n＝20）

表3 各组大鼠血常规指标比较（ ± s，n＝20）

组别Hb（g／L） WBC（105／L） RBC（1012／L）雄雌雄雌雄雌对照组低剂量组中剂量组高剂量组158.6±2.97159.0±2.45159.4±3.05160.0±2.12159.0±4.74160.4±2.88160.4±1.82158.2±4.506.00±0.346.11±0.285.95±0.275.96±1.605.95±0.236.15±0.295.91±0.216.00±0.246.69±0.156.78±0.066.63±0.166.49±1.786.54±0.096.55±0.076.56±0.176.60±0.15

参考文献：

［1］袁伯俊，王治乔.新药临床前安全性评价与实践［M］.北京：军事医学科学出版社，1997：23－36.

［2］王林丽，李卓恒，吕金胜，等.乳宁口服液对大鼠的长期毒性试验研究［J］. 中国药业，2013，14 （22）：14 －15.