PD12890的含量测定方法的建立

赵 铃 余春梅 王正凤 吴 军

(西南药业股份有限公司，中国 重庆400038)

PD12890 化学名为（4aR，10bR）-（+）-3，4，4a，10b-四氢-4-丙基-2 H，5H-苯并吡喃 (4，3-b)-1，4-噁嗪-9-酚盐酸盐，性状为类白色粉末，无臭，它是多巴胺D3受体选择性激动剂，D3受体的选择性是D2受体的1000倍和D4受体的10000倍[1]。

图1 PD12890的化学结构式Figure 1 Structural formula of PD12890

多巴胺受体激动药主要具有抗帕金森、抗精神分裂症、治疗药物依赖和抗高泌乳素血症的神经内分泌等作用[2]。基于D3受体选择性激动剂可用于治疗药物依赖，PD12890可望进行相关制剂的研发，且具有广阔的应用前景。

目前PD12890的质量标准在国内外药典都未见收载，仅查阅到的相关文献报道为工艺合成方面[3]，也无质量控制标准的文献报道，为更好的控制本品质量，本文在2010年版中国药典[4]的基础上，采用高效液相色谱法，进行含量测定，为建立PD12890的质量标准提供参考。

1 材料与仪器设备

1.1 材料

PD12890 对照品（20130001）；PD12890 原料药（自制，批号：09120，09255，09375）。乙腈和甲醇为色谱纯；水为超纯水。

1.2 主要仪器设备

Agilent 1100高效液相色谱仪，包括G1315B二极管阵列检测器，G1313A自动进样器，G1316A柱温箱，Agilent 1100色谱工作站 （美国安捷伦科技有限公司）；AB204-E分析天平（瑞士METTLER TOLEDO公司）；BT-25S分析天平（北京赛多利斯仪器系列有限公司）。

2 溶液的制备

2.1 对照品溶液的制备

精密称取经减压干燥至恒重的PD128907对照品0.0550g置50mL容量瓶中，加流动相溶解定容作为储备液（1.1mg/mL）。再精密量取储备液5mL置10ml容量瓶中，加流动相稀释配制成含PD128907为0.55mg/mL的对照品溶液。

2.2 供试品溶液的制备

精密称取本品约55mg置100mL的容量瓶中，加流动相溶解定容至刻度，用0.45μm微孔滤膜过滤，取续滤液备用。

3 色谱条件

色谱柱：Agilent ZORBAX SB-C18（4.6×150mm，5μm）；流动相：乙腈-甲醇-水（20：50：30）；紫外检测波长 293nm；柱温：30℃；流速为1.0mL/min；理论塔板数按PD128907峰计算应不低于3000。对照品溶液和供试品溶液分别进样20μL，记录色谱图（见图2、图3）。

图2 对照品溶液Figure 2 Reference substance solution

图3 供试品溶液Figure 3 The test solution

系统适用性实验

在上述色谱条件下，精密量取2.1项下的对照品溶液品溶液20μL注入液相色谱仪，记录色谱图。主峰PD128907与杂质峰的保留时间分别为：4.471和9.139min，分离效果良好，理论塔板数按PD128907峰计算不低于5000。

4 方法与结果

4.1 线性关系的考察

分别精密量取2.1项下的对照品储备液，加流动相配制成一系列不同浓度的标准品溶液（n=6），分别进样HPLC分析，每一对照品溶液进样一针，记录各色谱峰的峰面积。以进样量浓度C（mg/mL）对峰面积A进行线性回归，得到回归方程：A=12379C-28.345，r=0.9998。结果表明PD128907进样量在0.385-0.660mg/mL范围内线性关系良好。

4.2 进样精密度实验

按3项下的色谱条件，精密吸取对照品溶液重复进样5次，测定PD128907的峰面积平均值为 6756.8，PD128907峰面积的 RSD为1.24%，显示仪器的精密度良好。

4.3 重复性实验

按2.2项下方法，平行配制供试品溶液（批号：09120）6份，各吸取20μL按照3项下色谱条件进样分析，记录色谱峰面积变化，PD128907峰面积的RSD为1.36%，表明方法的重复性好。

4.4 稳定性实验

新配制供试品溶液（批号：09120），分别于 0，2，4，6，8、12h 进样，测定色谱峰面积的变化，计算PD128907峰面积的RSD为1.13%，表明供试品溶液在12h内稳定。

4.5 回收率实验

精密称取已知纯度（99.7%）的PD128907样品适量，加入流动相，配制成高、中、低3个不同的浓度，每个浓度3份，共9份，照2.2项下的方法制备供试品溶液，测定PD128907的含量，结果高、中、低3个浓度的平均回收率分别为99.4%，99.6%，99.8%，RSD分别为0.3%，0.2%，0.3%，结果见表 1。

表1 回收率实验结果(n=9)Table 1 Results of recovery test(n=9)

4.6 样品的测定

取本品3批，按2.2项下的方法制备各批号供试品溶液。精密量取对照品溶液和供试品溶液各20μL，注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算含量，测定结果见表2。

表2 PD128907样品测定结果Table 2 Results of PD128907 samples determination

5 讨论

本文对色谱柱、溶剂、检测波长、流动相组合及流速等分别进行考察，最终确定选择色谱柱为 Agilent ZORBAX SB-C18（4.6×150mm，5μm），流动相组成为乙腈-甲醇-水（20：50：30）时，可将有效将主药成分与杂质峰分离。选择流速为1.5mL/min，可进一步缩短样品的分析时间，但PD128907的峰形变宽，基线噪音增大，故选择流速为0.8mL/min，所得峰形尖锐，基线噪音变小，这样可节约流动相成本及分析时间。在200nm～400nm范围内进行扫描，在293nm有最大吸收，因此选择293nm为测定波长。

6 结论

经方法学考察，该方法简单快速，专属性强，重现性好，可用于PD128907原料药的含量测定。

［1］朱爱芝.多巴胺D3受体配体研究现状[J].国外医学·放射医学核医学分册，2002,26(2)：5-8.

［2］杨彤,陈怡禄.多巴胺受体激动药的中枢神经药理研究进展[J].医药导报，2009,8(9)：1177-1179.

［3］蔡进,李铭东,等.多巴胺D3受体选择性激动剂PD12890的合成[J].江苏药学与临床研究,2006,14(1)：21-24.

［4］国家药典委员会.中华人民共和国药典（二部）[S].北京：中国医药科技出版社,2010：附录XC.