ELISA法检测HIV抗体的室内质控研究

程俊丽

ELISA法检测HIV抗体的室内质控研究

程俊丽

目的 分析ELISA法检测HIV抗体的室内质控技术。方法 采用即刻法进行室内质控,以S/CO值及A值表示HIV。结果 两次质控的统计结果差异无统计学意义(P>0.05), 第8次S/CO值2.581为在控, 第15次S/CO值为2.915, 为最大值, 属于在控。结论 在采用ELISA法对HIV抗体进行检测时,应利用即刻法强化室内质控, 以便能够使检测结果变得更为准确。

HIV抗体；ELISA；检测

HIV抗体筛查是检测HIV感染的重要途径, 在筛查HIV抗体时应用酶联免疫法(ELISA)有助于提高抗体检测效率［1］。本文分析了晋中市疾病预防控制中心应用ELISA法检测HIV抗体的室内质控方法, 报告如下。

1 材料与方法

1. 1 材料 ELISA法检测试剂盒为珠海丽珠酶联免疫试剂盒, 室内质控法为即刻法。第一组质控血清为珠海丽珠L5,第二组为梅里埃, 检测试剂为上海梅里埃检测试剂, 采用自配质控血清。

1. 2 方法 严格按照酶联免疫试剂盒当中的说明书进行ELISA检测, 以S/CO值及A值表示HIV。采用即刻法对两组检验结果进行质控。统计方法如下：如SI下限值及上限值n2s值且n3s值, 则表示警告。如在质控中发现SI下限值及上限值不属于在控状态, 则删除该数值, 并对当次结果进行重新测定。如在控数据多于20个, 则可以依据测定结果建立质控表及绘制质控图, 质控图的绘制工具为EXCEL表格。

1. 3 统计学方法 利用统计软件SPSS 20.0对两次质控结果进行统计分析, 计数资料采用( x-±s)表示, 通过χ2及t检验检验, 如P<0.05则差异有统计学意义。

2 结果

经统计检验发现, 采用即刻法进行ELISA室内质控及按照统计学方法计算之后, 得出的两组统计结果差异无统计学意义(P>0.05)。两组室内质控结果如下：第一组：第8次S/ CO值2.581为在控, 前7次测定时的标准差SD以及变异系数CV偏小, 当标准差及变异系数偏小时, SI上限值就会不断增大；因此采用即刻法对第8次S/CO值进行判定时, 就会出现在控状态。第15次S/CO值为2.915, 为最大值, 属于在控。原因为第15次的变异系数CV值较大, 当CV较大时, SI上限值就会减小, 因此第15次SI值属于在控状态。第二组：第6次S/CO值2.357为在控, 在控产生的原因是前5次测定时的标准差SD以及变异系数CV偏小。第10次S/CO值为2.732, 为最大值, 属于在控, 原因为第10次的变异系数CV值较大。

3 讨论

ELISA是一种常用的HIV抗体检测法, ELISA的基本原理是使固相载体与抗体或抗原结合在一起, 从而使抗体及抗原保持原有的免疫活性［2］。在进行检测时, 固相载体中的抗体及抗原就会与酶标抗体及抗原发生反应, 在两者发生反应之后, 利用洗涤剂分开固相载体当中的抗体及抗原复合物,随后再测定受检物质与酶量即可。由于酶具有较高的化学催化频率, 所以利用 ELISA检测HIV抗体具有敏感度较高的优势。本组HIV抗体的检测人群主要有自愿咨询检测人员、羁押犯人、住院患者以及无偿献血人员, 检测人群符合全国HIV抗体检测的总体形势。虽然ELISA法是一种较为灵敏的检测法, 但为了能够进一步提高HIV抗体检测结果及分析结果的精确性, 还应在进行ELISA检测的过程中利用即刻法控制检测质量。在应用即刻法控制ELISA检测质量时, 应根据实际检测情况建立起合理的质控均值以及标准差, 并处理好特殊检测结果, 以便能够保证质控结果的有效性。

即刻法是一种简便易行的室内质控法, 且具有质控准确有效、质控图可视的优点, 因此在ELISA质控中被广泛使用。本研究应用即刻法完成了ELISA法检测HIV抗体的室内质控, 且得出了较为合理的质控结果。疾控中心每年约复核100份HIV抗体样本, 目前复核量还在不断上升。如在复核时发现样本有反应, 则送往太原市CDC进行确证, 目前在确诊试验中确证的样本已超过60%。

［1］ 曹华.血站ELISA法筛查HIV抗体阳性标本与免疫印迹法检测结果的比较.中外健康文摘, 2012,09(16):59-60.

［2］ 李仁道,万莉青.艾滋病初筛实验室中酶联免疫吸附试验检测HIV抗体影响因素的探讨分析.中国保健营养(下旬刊), 2012, 22(9):3053.

030600 山西省晋中市疾病预防控制中心检验科