健康儿童血清25－羟基维生素D参考区间的调查

熊翠莲 陈益明 王忠平 褚雪莲 冉启美

（杭州市余杭区妇幼保健院，浙江杭州 311100）

·临床与检验·

健康儿童血清25－羟基维生素D参考区间的调查

熊翠莲 陈益明 王忠平 褚雪莲 冉启美

（杭州市余杭区妇幼保健院，浙江杭州 311100）

目的了解本地区不同年龄和不同季节健康儿童血清25－羟基维生素D［25（OH）D］正常参考区间。方法选择杭州市余杭区妇幼保健院体检健康的1天～15岁儿童757例。按不同年龄分成≤1岁、＞1～2岁、＞2～3岁、＞3～4岁、＞4～6岁共5组。按不同季节分成春季、夏季、秋季、冬季共4组。采用电化学发光免疫分析法，检测其血清中25（OH）D水平，确定相应的参考区间，并比较不同组间25（OH）D水平。结果757例1天～15岁健康儿童血清25（OH）D水平为（36.61±11.20）ng／mL，其中，男性为（36.14±11.07）ng／mL，女性为（37.26±11.36）ng／mL，不同性别儿童之间比较差异无统计学意义（P＞0.05）。不同年龄儿童血清25（OH）D水平比较，差异有统计学意义（F＝91.965，P＜0.01），健康儿童随着年龄的增长，其血清25（OH）D水平逐渐下降；不同季节之间比较，差异有统计学意义（F＝6.396，P＜0.01）。健康儿童血清25（OH）D水平在冬季时水平最低，秋季时水平最高。结论不同年龄、不同季节健康儿童血清25（OH）D水平不同，临床在诊断儿童血清维生素D缺乏时，应根据年龄和季节来判断结果。

儿童；25羟基维生素D；参考值；维生素D缺乏

目前血清25（OH）D的正常参考区间均为国外人群的成人标准，对于儿童等特殊人群的正常参考区间没有提供信息，要求各实验室考虑到性别、年龄、季节、地理纬度和人种不同而产生的维生素D水平差异［1－2］。因此，本研究利用Rochecobase 601全自动电化学发光免疫分析仪对1天～15岁健康儿童进行25（OH）D检测，以研究25（OH）D随年龄和季节变化趋势，建立本地区健康儿童25（OH）D的参考区间，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2012年4月～2013年5月在杭州市余杭区妇幼保健院健康体检儿童检测的25（OH）D结果，共计757例，其中男438例，女319例，年龄1月～15岁。按不同年龄关系分为≤1岁、＞1～2岁、＞2～3岁、＞3～4岁、＞4～6岁共5组；按不同季节分组，根据本地区的气候特点将每年的阳历3～5月划为春季，6～8月划为夏季，9～11月划为秋季，12～2月划为冬季，共4组。

表1 757例儿童血清25（OH）D水平（±s）

表1 757例儿童血清25（OH）D水平（±s）

项 目n25（OH）D（ng／mL）年龄（岁）≤111441.79±10.35＞1～225042.11±9.85＞2～311638.67±8.94＞3～47634.81±8.74＞4～620126.33±7.46性别男43836.14±11.07女31937.26±11.36季节春季16836.97±11.32夏季37535.39±11.42秋季17639.49±10.54冬季3833.72±8.76

1.2 排除标准 临床诊断为肝功能异常、肾功能异常、佝偻病、维生素D缺乏、营养不良、贫血、低钙、低磷、低锌、妊娠合并症、甲状旁腺疾病、甲状腺功能亢进症、高血压、心血管疾病等；血样标本黄疸、溶血、脂血者；其它检查异常者；资料不全，并删除最低值和最高值，所有研究对象均由接诊医师当面告知家属并同意接受检测。

1.3 仪器与试剂 德国罗氏公司Cobas E601型全自动电化学发光免疫分析仪、原装配套25（OH）D试剂，定标血清及低值、高值2个水平质控品，批号为05894913190，有效期内使用。检测方法采用竞争法原理，检测范围为4～70ng／mL。

1.4 统计学处理 由医院LIS系统数据库导出的Excel形式数据，应用SPSS16.0统计软件，25（OH）D结果是否正态分布采用One－sample Kolmogorov－Smirnov检验，以（±s）表示25（OH）D的95%置信区间。男女性别间比较采用独立样本t检验，不同年龄组间的比较采用单因素方差分析（One－Way ANOVA）及LSD检验，组间两两比较采用Dunnett法分析，由于方差不齐，不同季节间的比较采用单因素方差分析（One－Way ANOVA）及Brown－Forsythe检验［3］，进一步两两比较采用Tamhane法。

2 结 果

2.1 正态性检验 将得到的757例数据经SPSS 16.0统计软件处理，分别按不同性别、年龄、季节将数据拆分为不同组，再用One－sample Kolmogorov－Smirnov检验，儿童25（OH）D结果为正态分布（均P＞0.05），因此采用（±s）95%置信区间来确定其25（OH）D水平。757例不同年龄儿童血清25羟基维生素D分布图，见图1。

图1 757例不同年龄儿童血清25（OH）D分布图

2.2 性别差异 757例健康儿童血清25（OH）D参考区间为（36.61±11.20）ng／mL，其中男孩438例25（OH）D水平为（36.14±11.07）ng／mL，女孩319例25（OH）D水平为（37.26±11.36）ng／mL，男女性别之间比较差异无统计学意义（P＞0.05）。

2.3 年龄差异 不同年龄组儿童血清25（OH）D水平比较差异有统计学意义（F＝98.350，P＜0.01），其中2岁以内儿童血清25（OH）D水平处于较平稳状态，2岁以后则开始下降，最明显的是＞4～6岁组和＞3～4岁组，这两组与其它年龄组之间比较，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。详见表1、图2。

2.4 季节差异 不同季节之间健康儿童血清25（OH）D水平，差异有统计学意义（F＝6.396，P＜0.01）。不同季节间的两两比较，春季与夏季之间比较，差异无统计学意义（P＞0.05），秋季与冬季、夏季与秋季之间比较，差异均有统计学意义（均P＜0.01）。详见表1、图3。

图2 不同年龄儿童血清25（OH）D水平变化

图3 不同季节儿童血清25（OH）D水平变化

3 讨 论

维生素D是一些具有胆钙化醇生物活性的类固醇物质，是人体不可缺少的一种脂溶性维生素，血清25（OH）D水平可以作为体内维生素D营养状况的客观指标［4－5］。目前国内的参考标准是在国外成人标准基础上进行参考，不适合作为本国或者本地区的儿童25（OH）D水平界定标准。25（OH）D检测试剂是德国罗氏公司改进前期25（OH）D3试剂稳定性差等缺点后推出的新型产品，本研究采用其Cobas E601型电化学发光免疫分析仪及配套试剂检测757例1天～15岁健康儿童血清25（OH）D水平，得出本地区25（OH）D水平范围为（36.61±11.20）ng／mL（35.81～37.41ng／mL），高于试剂说明书中20～77岁健康高加索成人血清25（OH）D水平的20.60 ng／mL（5.26～47.0 ng／mL），可见，设定本地区儿童25（OH）D水平参考范围是必要的。

本调查结果显示，血清25（OH）D水平与儿童性别无关，差异无统计学意义（P＞0.05），与文献报道［6－7］相似，故本文未对性别进行分组。陈益明等［7］报告结果证明新生儿出生时血清25（OH）D3保持较高水平，1～3个月有所回落，4～12个月时达最高水平，之后随着年龄的增长，血清25（OH）D3水平逐渐下降，基本接近儿童水平。本调查结果也显示不同年龄儿童血清25（OH）D水平比较，差异有统计学意义（P＜0.01），2岁以下儿童25（OH）D水平最高并趋于平稳，2岁以后血清25（OH）D水平逐渐下降，可能原因为：（1）孕妇在不同孕期开始食用一些孕妇保健奶粉，母体内25羟维生素D是通过胎盘进入胎儿并贮存于体内；（2）目前提倡母乳喂养，通过母乳婴儿吸收大量维生素D；（3）与年龄＜2岁儿童经常性补充AD钙奶等营养品有关。

Ohlund等［8］为探讨学龄前儿童维生素D的摄入量与季节、体质量指数和皮肤颜色的相关性，测定了90例瑞典北部学龄前儿童的血清25（OH）D水平，结果表明在其血清25（OH）D水平在夏季不足，并在冬季进一步减少。周颖等［9］采用电化学发光免疫分析法对2316例健康体检人员血清25（OH）D进行分析，结果显示春冬季节25（OH）D水平明显低于夏秋季节，建议春冬季节要特别注意25（OH）D的补充。本调查结果显示，健康儿童血清25（OH）D水平在冬季时水平最低，秋季时水平最高，与上述报道相近。应此，在冬季应增加儿童外出活动，增加阳光照射，以补充维生素D的吸收。

［1］ Vieth R．The urgent need to recommend an intake of vitamin D that is effective．Am J Clin Nutr，2007，85：649

［2］ Souberbielle J C，Body J J，Lappe J M，et al．Vitamin D and musculoskeletal health，cardiocascular disease，autoimmunity and cancer：Recommendations for clinical practice．Autoimmun Rev，2010，9：709

［3］ 朱红兵．应用统计学与SPSS应用．北京：电子工业出版社，2011：280

［4］ 向伟．维生素D缺乏和维生素D缺乏性佝偻病防治进展．中华儿科杂志，2008，46（3）：195

［5］ Misra M，Pacaud D，Petryk A，et al．Vitamin D deficiency in children and its management：review of current knowledge and recommendations．Pediatrics，2008，122（2）：398

［6］ 王忠平，陈益明，熊翠莲，等．2153例儿童血清25－羟基维生素D3水平分析．浙江医学，2013，35（12）：1182

［7］ 陈益明，褚雪莲，王忠平，等．电化学发光免疫分析法检测婴幼儿血清25－羟基维生素D3参考区间的调查．现代预防医学，2014，41（3）：389

［8］ Ohlund I，Silfverdal S A，Hernell O，et al．Serum 25－hydroxyvitamin D levels in preschool－age children in northern Sweden are inadequate after summer and diminish further during winter．J Pediatr Gastroenterol Nutr，2013，56（5）：551

［9］ 周颖，任振唤，钟益芳．丽水地区健康人血清25－羟基维生素D水平季节性分析．中国卫生检验杂志，2013，23（11）：2519

杭州市余杭区科技局科研项目（2012－医学－22）