高效液相色谱仪分析法检测食品中人工色素的技术研究

陈姗姗

【摘 要】 目的：对高效液相色谱仪分析法对食品中人工色素进行测定方法进行分析探讨，为今后的研究工作提供可靠的参考依据。方法：采取Venusil MP C18柱，流动相为甲醇-乙腈（1：1）梯度洗脱，外标法进行定量，对食品中7种人工合成色素进行检测。结果：该方法检测食品中人工合成色素时色素浓度在0.5-20.0mg/l时存在良好线性关系，r>0.9991，加样回收率在78.6%-100.7%之间，RSD值在0.2%-4.3%之间。结论：采取高效液相色谱法对食品中人工色素检测检测时方法可靠，值得推广。

【关键词】 高效液相色谱法 食品 人工色素 技术研究

食品中的人工合成色素为化学合成方法所制备的，以苯、甲苯、萘等化工产品作为原料，经一系列反应合成制得。目前食品中合成色素滥用现象严重，食品合成色素检测已经成为食品检查工作中一项重要内容[1]。本次研究中建立了高效液相色谱法对食品中人工色素进行了检测，现汇报如下。

1 材料与方法

（1）仪器与试剂

实验中所需仪器为我实验室现有高效液相色谱仪，电子天平、旋涡混合仪、超声波清洗机、恒温水浴锅、高速离心机、纯水器。

实验试剂包括：甲醇、乙腈均为色谱纯，乙酸铵、乙酸铅为分析纯，日落黄（0.500mg/mL）、柠檬黄（0.500mg/mL）、苋菜红 （0.500mg/mL）、亮蓝（0.500mg/mL）、胭脂红（0.500mg/mL）、赤藓红（100mg/L）以及诱惑红（100mg/L）标准品。

（2）样品来源：本次实验中样品来源于周边超时、零售摊点以及菜市场食品。

（3）方法：（a）标准品配制：将上述7种标准品经浓度为20%的甲醇进行溶解制成质量浓度为100mg/l的混合标准储备液，在4℃条件下保存。将制备好的混合标准储备液经浓度为20%的甲醇稀释成不同浓度（0.5、1.0、2.0、5.0、10.0、20.0mg/l）的标准系列溶液，先用现配。（b）色谱条件：实验中所需色谱柱为Venusil MP C18柱，柱温设定为30℃，流动相A相为甲醇乙腈，B相为浓度为0.02mol/l的乙酸铵溶液，流速为1.0ml/min，梯度洗脱：0-12.0 min时A相5%，12-30min时A相自5%-35%，30-35min时A相自35%-98%，35-35.1min是A相在98%-4%，35.1-55min时A相维持5%。进样量为10ul，检测波长分别为：柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄为254nm，诱惑红、赤藓红为500nm，亮蓝为600nm。分别展开线性关系考察、加样回收实验、精密度实验。（c）样品处理：所取样品进行处理后取上清液，在10ml的离心管中在10000r/min条件下离心操作5min，经0.45微孔滤膜过滤后备用。

2 结果

2.1 线性关系考察结果

本次试验中7种人工合成色素0.5、1.0、2.0、5.0、10.0、20.0mg/l不同浓度溶液经1.3.2色谱条件进样检测，以峰面积为纵坐标，以色素浓度为横坐标，的线性回归方程，结果发现，色素浓度在0.5-20.0mg/l时存在良好线性关系，r>0.9991，详见表1。

2.2 加样回收实验结果和精密度

本次实验中在样品中分别添加各色素含量为3、15、40mg/kg的标准品，以1.3.2所示色谱条件进样检测，外标法进行定量，计算回收率和RSD值，结果发现，7中色素加样回收率在78.6%-100.7%之间，RSD值在0.2%-4.3%之间，详见表2。

3 讨论

近几年的实验研究发现，高效液相色谱法在药学、食品等诸多领域均发挥了重要作用，为含量测定、质量控制等工作提供了可靠的参考依据[2]。本次实验中建立的高效液相色谱法在7种食品人工合成色素检测中，色素浓度在0.5-20.0mg/l之间时存在良好线性关系，回收率在78.6%-100.7%之间，相对较高， RSD值在理想范围内，精密度良好，检测效果理想，在大批量样品中多种色素检测中可发挥重要作用，值得对其给予重视并推广，为今后的食品安全检验工作提供参考依据。

参考文献

[1]中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局，中国国家标准化管理委员会.GB/T 23496-2009，食品中禁用物质的检测-碱性橙染料 高效液相色谱法[S]，2009.

[2]路勇，渠岩，冯楠等.超高效液相色谱-串联四极杆质谱法快速筛查食品中的45种工业染料[J].食品科学，2012，33（6）：176-180.endprint