大鼠眼内眦采血的体会

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(德州学院医药与护理学院，山东 德州 253023)

大鼠血浆或血清是研究药物、疾病等最常用的生物样本，体积较小的实验动物短期内多次采血比较困难[1]，因此合适的采血方法是获取宝贵血液样本的关键。我们在实验中发现采用大鼠眼内眦采血法，每只眼睛可以一次性采血1.5 mL。现将采血的操作体会总结如下。

1 材料与方法

1.1 材料

实验动物为清洁级SD大鼠，共60只，雌雄各半，体质量200～300 g；玻璃毛细管，内径0.9～1.1 mm。

1.2 方法

左手戴上皮手套，将大鼠放在45°的斜面上，用中指和食指按住老鼠的头部，并且使老鼠的眼球外凸(便于取血)，左手掌按压大鼠以便固定。以酒精擦拭大鼠眼内眦，将消毒并用肝素钠处理的毛细管(长约3～4 cm)插入眼眶下前方，保持毛细管与鼠面成40°左右夹角以便找准静脉丛位置。用玻璃管刺入时能明显感到一层弹性薄膜，旋转刺破薄膜，有种落空感，此时若没有血液流出，调整毛细管插入深度(大约3～5 mm)，血液便成股流下，用肝素钠处理的EP管在眼球下方接血即可。

2 结果

使用此方法采血量大于1.5 mL，3 h后可对同一只眼进行相同操作，采血量大于1.5 mL。取血后置室温径直1 h，3 000 rpm，离心10 min，所得血清呈淡黄色的。若出现红色血清，则说明出现溶血现象。

3 讨论

大鼠的采血方法主要有腹主动脉采血法、眼内眦采血法、尾尖采血法、尾静脉采血法、断头采血法和颈静脉采血法等[2]。当科研试验要求短期内多次多量采血时，需避免采取存在以下缺点的方法：取血量少，需使用麻醉剂，创伤大，采血后不能存活，不能连续多次采血等。我们采用的眼内眦采血法是在大鼠非麻醉状态下进行的，避免了麻醉剂对血液生化指标的影响，并且能够短时间内进行多次多量的采血。

采用该方法的注意事项包括：①采血场所要保持充足的光线及适宜的室温[3-4]；②采血用具及大鼠采血部位要求消毒，否则易致大鼠眼部感染；③熟练操作要领，一旦使大鼠致盲，不利于后续实验；④用EP管接血时切忌在眼部反复刮，以免导致溶血；⑤在对大鼠进行眼眦取血之前，最好剪掉大鼠的胡须，以免流出的血液粘到胡须上不利于接血。

通过对60只大鼠眼內眦采血的摸索，发现此方法具有较多优点，如对大鼠的创伤较小、采血量较多、可多次取血、不用麻醉等。只要掌握正确的操作方法，多加练习，就能成功进行多次多量的采血。

[参考文献]

[1] 吴晓晴,郝晨霞.160只小鼠心脏采血的操作体会[J].实验动物科学与管理,2004,21(1):53-54.

[2] 车兆义,邹 悦,宋清斌.大鼠实验中几种常用的采血方法探讨[J].局解手术学杂志,2008,17(2):84-85.

[3] 周晓春,陈 龙,刘绍晨.200只大鼠内眦取血的操作体会[J].承德医学院学报,2005,22(4):328-329.

[4] 施新猷.现代医学实验动物学[M].人民军医出版社,1999：101.