雌激素治疗对绝经妇女Th1/Th2平衡的影响

卢寨娥 蒋竞

雌激素治疗对绝经妇女Th1/Th2平衡的影响

卢寨娥 蒋竞

目的 探讨雌激素治疗对绝经妇女辅助性T细胞1（Th1）/辅助性T细胞2（Th2）平衡的影响。方法将研究对象分为生育年龄组、绝经组、雌激素治疗组共3组，每组各10例，分离、培养所有研究对象外周血T淋巴细胞，ELISA法测培养液上清液IL-4、IFN-γ质量浓度，并计算IFN-γ/IL-4比值。结果绝经组IFN-γ水平明显高于生育年龄组、IL-4水平显著低于生育年龄组、IFN-γ/IL-4比值显著高于生育年龄组，差异均有统计学意义（P＜0．05或0．01）；雌激素治疗组IL-4水平显著低于生育年龄组、IFN-γ/IL-4比值显著高于生育年龄组，差异均有统计学意义（均P＜0．01）；雌激素治疗组IFN-γ水平明显低于绝经组、IL-4水平显著高于绝经组、IFN-γ/IL-4比值显著低于绝经组，差异均有统计学意义（P＜0．05或0．01）。结论绝经后发生Th1/Th2平衡变化，出现向Th1漂移现象，而雌激素治疗能改善Th1/Th2平衡的偏移。

雌激素 绝经 Th1/Th2细胞

CD4+辅助性T细胞（Th）按产生细胞因子的种类不同分为两大类：辅助性T细胞1（Th1）和辅助性T细胞2（Th2），Th1主要分泌IFN-γ、IL-2、TNF等Ⅰ型细胞因子，参与细胞毒性T细胞介导的细胞免疫，在抗细胞内感染（如病毒感染、结核分枝杆菌感染等）中发挥重要作用；而Th2主要分泌IL-4、IL-5、IL-6、IL-10等Ⅱ型细胞因子，其功能在于刺激B细胞增殖及嗜酸性粒细胞活化，促进抗体（IgG1与IgE）产生，参与体液免疫，在抗细胞外感染与致敏原引起的免疫应答中起重要作用。目前，我国已步入老龄化社会，相关老年疾病如骨质疏松症、心血管疾病、感染性疾病、老年痴呆症、尿失禁等严重影响绝经妇女的生活质量。随着2002年 WHI（Women′s Health Initiative）研究问世，有关激素治疗的临床应用与利弊分析再次成为世界关注的热点。本研究通过给予手术绝经或自然绝经妇女雌激素口服3个月，观察雌激素治疗后Th1、Th2型细胞因子IFN-γ、IL-4水平的变化，了解和明确雌激素治疗对绝经妇女免疫功能的影响。

1 对象和方法

1.1 对象 选取2009-01—2011-l2本院妇产科门诊的女性患者30例，年龄25～35（27±4.57）岁者10例（生育年龄组），具有正常卵巢功能、月经规则；年龄48～60（53±2.48）岁者20例，均因良性疾病（如子宫肌瘤）行手术切除子宫与双侧卵巢，其中10例为绝经组，10例为雌激素治疗组。治疗组绝经妇女具有激素补充疗法适应证，无激素补充疗法禁忌证，在入组前至少3个月未接受激素补充治疗。所有研究对象无免疫系统疾病，1年内未使用过对免疫功能有影响的药物。

1.2 给药方法 生育年龄组及绝经组均口服安慰剂1片/d，连续服用3个月；雌激素治疗组口服戊酸雌二醇片（商品名：补佳乐）1mg/d，连续服用3个月。

1.3 IL-4和IFN-γ水平测定 所有研究对象用药3个月后抽取外周静脉血，分离外周血淋巴细胞，制备T淋巴细胞悬液，取1×106/ml T淋巴细胞置于RPMI 1640中加10%FBS，0.1mM MEM非必须氨基酸，5mM L-谷氨酸盐，100μg/ml链霉素，100IU/ml青霉素，在37℃、5%CO2培养箱中培养24h，培养后取上清液，采用ELISA法测定IL-4和IFN-γ水平。

1.4 统计学处理 采用SPSS11.0统计软件，计量资料均以表示，组间比较采用方差分析。

2 结果

3组对象IFN-γ、IL-4水平及IFN-γ/IL-4比值的比较见表1。

表1 3组对象IFN-γ、IL-4水平及IFN-γ/IL-4比值的比较

由表1可见，绝经组IFN-γ水平明显高于生育年龄组、IL-4水平显著低于生育年龄组、IFN-γ/IL-4比值显著高于生育年龄组，差异均有统计学意义（P＜0.05或0.01）；雌激素治疗组IL-4水平显著低于生育年龄组、IFN-γ/IL-4比值显著高于生育年龄组，差异均有统计学意义（均P＜0.01）；雌激素治疗组IFN-γ水平明显低于绝经组、IL-4水平显著高于绝经组、IFN-γ/IL-4比值显著低于绝经组，差异均有统计学意义（P＜0.05或0.01）。

3 讨论

绝经期妇女卵巢功能衰退，体内雌激素水平下降，出现免疫老化和免疫功能的重塑[1-3]。正常免疫功能的维持依赖于适度的淋巴细胞凋亡及精确的Th1/Th2平衡。大量研究证实，Th1和Th2是一对重要的调节细胞，同时Th1和Th2细胞又互为抑制细胞，Th1细胞分泌的IFN-γ可抑制Th2细胞的分化和功能，Th2细胞分泌的IL-4可抑制Th1细胞的分化和功能。单个细胞表达细胞因子并非随意性的，IL-4和IL-5常同时表达，IL-4和IFN-γ通常相互排斥。故有时Th1或Th2细胞即指产生IFN-γ或IL-4的细胞[4]。研究发现，老年人外周血CD4+T细胞产生的IFN-γ高于年轻组，而IL-4降低[5-7]，提示老年个体有Thl极化现象。

相关研究发现，性激素可影响Th1/Th2平衡[8]。近年来有研究报道，激素补充治疗能够改善绝经妇女Thl/ Th2平衡，影响骨代谢[9-10]。性别和性激素可影响Th1/Th2型细胞因子产物。与女性相比，男性淋巴细胞与植物血凝蛋白共培养后产生高水平的IFN-γ和IL-2，而IL-4和IL-10的水平较低[11]。目前，已有大量证据表明，女性绝经后自发出现的Th1型细胞因子增加与卵巢功能减退有关[12]，表明雌激素水平可影响体内Th1/Th2平衡，引起Th1/Th2平衡向TH1漂移，可能是引发衰老机体免疫功能紊乱，削弱了机体对抗细胞外微生物感染的能力的一个重要原因。本研究结果显示，绝经组妇女IFN-γ水平明显高于生育年龄组，绝经组IFN-γ/IL-4比值显著高于生育年龄组，提示绝经妇女Th1/Th2平衡向Th1漂移，削弱了老年机体对抗细胞外微生物感染的能力；雌激素治疗组IFN-γ水平明显低于绝经组、高于生育年龄组，IL-4水平显著高于绝经组、低于生育年龄组，可见雌激素治疗可以明显改善绝经妇女Th1/Th2平衡向Th1漂移，从而可能增加了机体对抗细胞外微生物感染的能力。

综上所述，随着年龄增长，Th1/Th2平衡向Th1漂移，引起Th1型细胞因子IFN-γ分泌增加，削弱了机体对抗细胞外微生物感染的能力，引发衰老机体免疫功能紊乱。雌激素治疗后可以减少绝经妇女Th1型细胞因子IFN-γ的分泌，从而纠正Th1/Th2失衡，促进抗体（IgG1与IgE）产生，参与体液免疫，而Th2型细胞因子IL-4分泌增加，增强机体对抗细胞外微生物感染的能力，干预免疫衰老，可为激素替代治疗提供有利的理论依据。

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Effects of estrogen therapy on the Th1/Th2balance in postmenopausal women

ObjectiveTo investigate the effects of estrogen therapy on Th1/Th2 balance in postmenopausal women．MethodsThe study included 10 women in child-bearing period,10 postmenopausal women and 10 postmenopausal women with estrogen therapy．The peripheral blood lymphocytes were separated and cultured,the levels of IL-4 and IFN-γ in cultured supernatant were measured by ELISA,and ratio of Th1/Th2(IFN-γ/IL-4)was calculated．ResultsThe IFN-γ level in postmenopausal women was significantly higher,the IL-4 level was lower and the IFN-γ/IL-4 ratio was higher than those in child-bearing period women(P＜0．05 or 0．01)．The IL-4 level in estrogen therapy group was lower and IFN-γ/IL-4 ratio was higher than those in child-bearing period group (both P＜0．01)．The IFN-γ level was lower,the IL-4 level was higher and the IFN-γ/IL-4 ratio in estrogen therapy group was lower than those in postmenopausal group (P＜0．05 or 0．01)．ConclusionThe peripheral blood lymphocytes shift towards Th1in post-menopausal women,and estrogen therapy can regulate the Th1/Th2balance．

Estrogen PostmenopausalTh1/Th2cell

2012-11-06）

（本文编辑：欧阳卿）

浙江省医药卫生科研基金资助项目（2006A106）

315000 宁波市妇女儿童医院妇产科