临产孕妇血凝四项生物参考区间验证

郭明卫,陈丽敏

(1、沙河市人民医院检验科，河北 沙河054100；2、邢台县中心医院检验科，河北 邢台054000)

生物参考区间是解释分析检验结果的依据和程度[1]，由于临产孕妇体内一系列的生理性变化，其凝血四项指标凝血酶原时间(PT)、部分凝血酶原时间(KPTT)、凝血酶时间(TT)和纤维蛋白原测定(Fg)是否能沿用正常人生物参考区间有待验证。根据ISO15189：2003《医学实验室-质量和能力的专用要求》，实验室必须建立自己的生物参考区间并定期评审，以确保依据的生物参考区间的有效性。我们结合ISO15189条款要求和已有的推荐方法[2]，验证并探讨该人群生物参考区间，以保证生物参考区间的可靠选用。

1 材料与方法

1.1 标本来源 我院产科正常临产孕妇，年龄23～37岁，平均为25岁，排除高血压、血友病及其他能影响血凝指标的疾病，且肝功能、肾功能无异常，尿蛋白阴性。

1.2 标本采集 抽取临产孕妇静脉血1.8ml加入含0.2ml(0.109mmol/L)枸橼酸钠的真空采血管（湖南安信医用高分子材料有限公司生产）中颠倒混匀8～10次，3000r/min离心10min，选择无溶血、无脂血抗凝血浆检测，2h内完成测试。

1.3 仪器与试剂 北京普利生仪器有限公司生产的C2000-A全自动血凝仪及配套试剂，方法为磁珠法，试剂在有效期内使用，操作过程严格按照实验室SOP文件的有关要求进行。

1.4 方法

1.4.1 验证项目的确定 本文选择临产孕妇PT、KPTT、TT和Fg，参照NCCLSC28-42推荐方法进行验证。

1.4.2 对生物参考区间的验证 收集40名临产孕妇标本，在经过性能评价验证可靠的检测系统上检测，检测结果95%（38名）内落在现用的参考区间内，判定现用生物参考区间有效。若试验数据有3名或3名以上的检测结果落在参考现用的生物参考区间外，先检查检测系统性能、检测程序是否正确，之后考虑该项目是否具有人群生物特性，再进一步调查。重新收集120名健康参考个体，进行测定，检测结果先做离群点的判断，数据中的疑似离群点的判断：将疑似离群点和其相邻点的差值（D）和全距（R）相除，D/R 应≤1/3,＞1/3 考虑为离群点。若有2个或以上疑似离群点，将最小的疑似离群点如上处理，若＞1/3则所有点都删去，若≦1/3则保留所有数据，若有离群点被删除后应立即将其他数据补上[2]。

1.4.3 检测系统/方法准备 参考区间验证前需掌握检测系统的性能和使用的检测方法，对检测系统/方法分析性能进行有效验证和评价，确保实验室检测系统性能的关键指标如不精密度和不准确度的评价方法和可接受标准，确保检测系统/方法准确稳定。检测系统采用配套的质控，并且在检测系统在控的状态下检测试验标本，记录试验数据，保证验证项目结果的可靠。

2 结果

2.1 临产孕妇PT、KPTT和TT生物参考区间验证结果 40名临产孕妇PT、KPTT和TT各测定值均落在现用的生物参考区间范围内，说明该三项生物参考区间均适用于临产孕妇，均通过验证。

2.2 临产孕妇Fg生物参考区间验证结果 40名临产孕妇Fg测定结果有19名超出现用的生物参考区间范围，提示现用的生物参考区间不适用于临产孕妇。按上述验证方法，所得该组人群Fg的参考区间为2.44～5.32g/L，与周光泉等报道基本一致[3]。

3 讨论

血凝四项检验项目已成为产前检查的常规检验项目。本文显示，现用PT、KPTT和TT生物参考区间也适用于临产孕妇。

Fg生物参考区间不适用于临产孕妇，重新确立该组人群的生物参考区间2.44～5.32g/L。其原因为：(1)Fg概况：人血浆Fg是由于肝细胞合成分泌的一种糖蛋白，是血浆中分子量最大、含量最高的凝血因子。除了作为凝血因子直接参与凝血过程外，纤维蛋白还可介导血小板凝集反应。近年来，大量研究证明，血浆Fg水平的变化与应激、动脉血栓形成及弥散性血管内凝血（DIC）等病理关系密切。

(2)临产孕妇血浆凝血因子均有不同程度的增高，而作为体内分子量最大的一种凝血糖蛋白Fg含量显著增高，导致该组人群体内凝血过程处于动态平衡的高凝状态，一方面可以预防或缓解分娩时大量失血，另一方面伴随妊娠高凝状态的同时存在抗凝、纤溶功能降低，增加了孕妇发生DIC等病理情况发生的可能。妊娠是一个正常生理过程，妊娠期血浆Fg升高、于妊娠末期平均值可达4.5 g/L，是正常妊娠的特点[4]。

众所周知，生物参考区间是判断健康与否的标准，实验室必须保证给临床提供一个正确的生物参考区间，否则会导致误诊。但限于一般实验室现行条件，自行制定生物参考区间存在客观难度，因而对实验室的生物参考区间进行验证是必要的也是可行的。当生物参考区间出现偏离时，应当重新确立，确保生物参考区间的准确性。

本文验证表明，现用的PT、KPTT和TT的生物参考区间适用于临产孕妇；由于临产孕妇与正常人的差异，现用的Fg的生物参考区间不适用于临产孕妇，经过重新确立，临产孕妇的生物参考区间为2.44～5.32g/L。

[1]陈桂山.临床生化检验项目生物参考区间适用性验证[J].中华检验医学杂志，2008,31(2):170-174.

[2]陈桂山,杨有业，梁锦胜，等.临床医学生物实验室生物参考区间的建立[J].检验医学，2008,23（4）:421-424.

[3]周光泉,刘堂兵.晚期妊娠妇女纤维蛋白原水平观察[J].实验与检验医学，2011,29(12):657-658.

[4]乐杰.妇产科学[M].第7版.北京：人民卫生出版社，2008:36.