GLP实验设施和动物的管理

陈小让，陈玉堂，王纯耀

(郑州大学药物安全评价研究中心，郑州 450052）

1 动物管理人员培训与管理

动物实验设施和动物实验室在药物安全性评价研究中占有极为重要的位置。几乎所有的安评项目都在动物实验室做，而且实验周期长，费用高，如果没有相应的专业知识和硬件设施，安评实验项目几乎无法完成［1］。

1.1 动物管理人员 尤其是实验室负责人应该有相应的资历、学历、经历和能力方能胜任。动物实验人员一般是农林大专院校的毕业生，主要承担实验动物的管理、验收、检疫、实验等工作，具有一定的专业知识，经培训后能配合专题负责人做动物实验。

1.2 饲养人员 动物饲养工人主要承担饲养管理。由于他们不具备实验动物或医学药学相关的专业知识，进入安评中心后必须经过系统培训并达到饲养工作岗位要求方能上岗。每一个动物饲养人员都要参加河南省实验动物上岗培训，并取得培训合格证书。

1.3 特殊岗位培训 某些岗位工作人员必须要有岗前培训，持证上岗。例如高压灭菌器等压力容器的使用。

2 动物实验设施

动物实验设施设计要合理，布局配置适当，不同种属、级别的动物要有不同的饲养设施，该设施要符合实验动物设施环境的国家标准，并通过省级实验动物管理委员的验收。动物实验设施包括空调通风净化系统及电脑自动控制系统。动物实验设施工作人员应熟悉整个空调通风净化系统管道的走向，初、中、高效过滤器的位置及更换频率仪器监测温度、湿度、压差等指标。电脑自动控制系统由专业人员24 h监控并记录在案，一旦发生偏离，及时给SD和QAU联系，做出是否影响实验的判断。屏障系统使用的高压灭菌器应定期检修和保养，并记录在案。压力表和阀门应每年校验，保存好校验资料。

2.1 实验动物房的管理 良好实验室管理规范(good laboratory practice，GLP）实验室动物房包括SPF(specific pathogen free）动物房和普通级动物房。

2.1.1 SPF级动物实验室 该实验的洁净度达到7级，其环境中不带有主要潜在感染或条件致病和对科学实验干扰大的病原。在SPF屏障系统动物饲养室，GLP特别重视人流、物流、动物流、气流的走向和温度、湿度、压差的控制。GLP没有明确规定SPF屏障系统一定要采取单走廊、双走廊、三走廊形式，但无论哪种走廊形式都要形成单向气流压差。最好在SPF屏障系统饲养室入口处制作标有人流、物流、动物流、气流走向的平面图和人员进出动物饲养室的流程图［2］。

SPF及动物饲养室物品的管理包括:①垫料:应选用吸湿性好，尘埃少，无毒性，无油脂的材料经消毒灭菌后才能使用。使用时垫料先从垫料库房包装后运入洗消前室，在洗消前室把垫料分装在各个笼盒内进行灭菌，灭菌后的垫料暂放在清洁物品储藏室，动物实验人员使用时，从清洁物品储藏室取出使用，使用后的垫料及污物沿污物走廊返回洗消前室。垫料和饲料应该遵守先进后出的原则。②饲料和水:动物的饲料和饮水应定期检验，确保其营养标准以及影响实验结果的污染因素低于规定的限度，检验结果应作为原始资料保存。SPF级动物饲料为辐照后的密封包装饲料，动物实验人员核查饲料的种类及数量，在传递窗污染区域一侧，对饲料外包装用75%酒精喷雾消毒。然后放入传递窗。打开紫外线灯，照射30 min。打开清洁区域一侧的传递窗，取出饲料，移入储藏室备用。动物饮用水分装在动物饮用水瓶内，高压消毒后移入储藏室。③笼具:实验动物笼具运至洗消前室，耐高温的笼具高压消毒，不耐高温的笼具酒精喷雾后进入传递窗照射30 min，消毒后的笼具运至储藏间备用。④其他物品:其他物品包括实验材料、笼卡、供试品等。耐高温的经过高压灭菌后进入动物饲养室，不耐高温的在传递窗污染区域一侧75%喷雾后进入传递窗紫外线照射30 min后移入动物饲养室。

2.1.2 普通级动物房的管理 普通级动物房的管理没有SPF及动物管理严格，但是实验设施要求要满足动物饲养需要，如笼子大小、换气次数、温度、湿度等。由于大动物体型大、排泄物多，如果换气次数不够，会影响饲养室内空气清洁度，导致有害物滋生，影响动物的健康和安评的实验质量。饲养室内应每周用不同种类的消毒剂进行消毒，实验之前笼具用消毒剂喷雾。饲养室内使用的消毒剂不能影响实验结果，并详细记录消毒剂的名称、浓度、剂量、使用方法和使用时间等。

3 动物实验的管理

3.1 实验动物采购 专题负责人制订实验方案后，通知动物管理负责人并提交动物实验登记表，详细填写专题的名称，专题的代号，所需动物的种类、品种、品系、级别、年龄(体重）、性别、数量、实验起止日期等，并说明供试品是否有毒、有害、有感染性或放射性等实验的特殊条件和要求等，供动物实验室安排饲养和实验场所。根据实验要求进行动物采购。动物实验室与多家持有动物生产许可证有信誉的实验动物供应商有业务来往关系，这些供应商提供的生产许可证和检测报告需归档保存。安评实验大小鼠应是SPF级，豚鼠是清洁级，兔子和犬是普通级。

3.2 实验动物的验收及检疫 实验动物抵达动物实验室后，动物管理人员仔细核对送货单的一般信息，SPF级动物消毒外包装，通过动物专用传递窗送到动物饲养室观察，普通级动物经过外观观察无异常送到动物检疫室检疫，检疫期间观察动物的健康状况，如外观体征、行为活动、腺体分泌、呼吸、粪便、摄食量、体重等。检疫期间观察到一般状态异常，怀疑为感染性疾病时，立即将动物隔离，并向专题负责人报告，并根据实验需要进行细菌学检查，并处死所有感染动物并焚烧感染动物。同时动物检疫室及使用过的器材要进行灭菌，消毒或焚烧。在检疫期间未出现异常的动物才可供实验用。大动物犬如果发现有异常，应放置在隔离室，经治疗未异常后供实验用。

4 动物的饲养管理

动物实验室负责整个动物的实验管理，包括人员进出的登记，笼具消毒，无菌衣的清洗消毒等，在更换笼盒，加水加料时，注意观察动物的一般状态，如精神、活动、毛发、排泄物、摄食量、饮水量等，出现异常及时报告专题负责人。饲养管理人员根据实验要求饲养动物。如实验过程中要求禁食，测定摄食量，半定量加食或其他方面对饲养工作有特殊要求的，饲养管理人员应积极配合。

5 动物尸体及废弃物的处理

动物尸体用塑料袋包装后存放在-12℃以下的冰柜内。动物尸体集中后委托单位进行处理。动物饲养过程中清理出来的废弃垫料应用垃圾袋包装后集中存放于垃圾房内并委托单位处理，有害的尸体及废弃物要经过无害化处理。

6 原始材料归档存放

动物实验期间记录有大量的饲养管理，如动物的摄食量、体重、饮水量及环境指标检测等原始资料，所有记录必须如实，准确，及时完成，定期进行整理并归档。

动物的原始材料包括各种证明材料和记录材料。证明材料包括动物、饲料、垫料的发票，动物合格证，动物微生物检测报告，饲料质量报告，水质分析报告等。记录材料包括饲养室的温湿度，压差等。

7 实验动物的伦理

GLP成立实验动物伦理委员会，实验期间遵守实验动物减少，优化，替代的3“R”原则，科学设计实验，减少动物浪费，珍惜动物。饲养期间善待动物，按照动物的生物特性和实验要求进行饲养和监护。熟练实验技术操作，尽量减少动物痛苦，对动物实行人道主义和安乐死并妥善处理动物尸体，为动物竖立纪念碑，并定期举行纪念活动［3］。

8 讨论

药物非临床安全性评价研究提高我国的新药研究质量，提升了新药研究的水平，降低了新药临床潜在毒副作用的风险。实验设施和动物实验室管理应严格遵守标准操作规程，确保实验结果的准确性，可靠性，全程可追溯，使得药物临床安全性评价研究更加规范。

［1］国家质量监督检验检疫总局.实验动物环境及设施［M］.北京:中国标准出版社，1994.

［2］孔利佳，汤宏斌.实验动物学［M］.武汉:湖北科技出版社，2002，57-68.

［3］山内忠平 著，沈德余 译.实验动物的环境与管理［M］.上海:上海科学普及出版社，1989，33-39.