冬季输注温热液体对急性失血性休克实验的影响*

姜洪波，冯素萍,黄艳芬,杜爱林△,尉 娜

(1. 新乡医学院第三附属医院； 2.新乡医学院 生理学与神经生物学教研室，河南 新乡 453003)

急性失血性休克实验是机能学实验中一个重要的实验。失血性休克是由于血容量急剧减少(一般大于总血量的20%),使组织器官血液灌流不足,从而产生机能、代谢严重障碍的一种全身性病理过程。本实验通过观察休克发生、发展的过程中血压和微循环等的变化，加深对“休克发病的关键不在于血压，而在于血流”的理论知识的认识。家兔急性失血性休克模型中能够观察到微循环的流动为整个实验的关键，只有观察到微循环,才能进一步放血完成急性失血性休克实验模型的制备[1]。然而在教学实践中，尤其在冬季，很多家兔由于温度低等多种因素影响，在急性失血性休克实验模型的制备前就已经观察不到微循环的血液流动，致使无法观察急性失血对微循环的血液流动的影响，影响了教学效果，可能与家兔体温下降有关。本实验主要观察温热液体对观察家兔微循环模型成功率的影响。

1 材料与方法

1.1 动物 健康家兔36只，体重2.0～3.0 kg，新乡医学院实验动物中心提供。随机分为2组，常温组18只, 静脉输注液体温度(20.83±2.55)℃；温热组(n=18)，静脉输注液体温度(40.89±1.18 )℃。

1.2 器械和药品电脑，BL-420F生物信号采集处理系统，哺乳类实验器械1套，兔手术台1个，灌流盒1个，动脉夹1个，气管插管1个，注射器50 mL、20 mL、5 mL各1个、1 mL 3个，压力换能器、刺激电极、动脉插管、三通、棉线、纱布、小烧杯各1个，生理盐水、20%氨基甲酸乙酯、0.1%肝素、 0.01%肾上腺素、0.01%去甲肾上腺素、0.01%异丙肾上腺素、2% 654-2等药品配好备用。

1.3 步骤和项目

1.3.1 抓取、称重、麻醉、固定 抓取家兔颈背部皮肤，用另一只手托住家兔臀部，称重后记录家兔重量，用20%氨基甲酸乙酯按每公斤体重1 g的剂量从耳缘静脉先快速注入三分之一的剂量，后以每分钟1 mL的速度缓慢注入，家兔麻醉的标志为夹家兔后趾疼痛反射消失。麻醉后用绳子将动物背位固定于手术台上，以备手术。

1.3.2 颈部手术 用粗剪刀剪除颈部正中手术野的兔毛，沿颈部正中线切开皮肤5～7 cm，用止血钳钝性分离皮下组织及肌肉，暴露出气管并游离气管2～4 cm，在气管下穿线备用。用两把止血钳分别夹住气管两侧的皮肤和肌肉的边缘，并将其拉向两侧，即可见到气管两侧与气管平行的左、右颈总动脉及与其相伴而行的一束神经，这束神经中包括缓冲神经(三根神经中最细，以往称为减压神经)、交感神经和迷走神经(三根神经中最粗)。①气管插管：用组织剪在家兔甲状软骨下方3—4软骨环之间做一横向切口，其长度约为气管周径1/2，再向家兔头端方向做一纵向切口，长度约1 cm，使总切口呈倒“T”型。把气管插管斜面向下朝向肺脏方向插入，旋转180度，用备用棉线结扎固定，并在气管插管分叉处二次结扎固定。②分离左侧缓冲神经、交感神经、迷走神经，神经注意保持湿润，从而保证兴奋性。分离左侧颈总动脉，分离右侧颈外静脉穿线备用，注意先分离神经后分离血管，以免血管出血影响神经分离。分离神经先细后粗。③右颈外静脉插管：先用动脉夹夹闭静脉近心端，等待静脉充分充盈后结扎静脉远心端，用眼科剪朝向心脏方向与静脉成20～45度角剪开静脉，切口大小约为静脉周径1/3—1/2，静脉插管和输液管相连，排完空气后斜面向下朝向心脏方向插入静脉(二次结扎固定，以防插管滑脱)，撤掉动脉夹，调整输液速度，以15～20滴/min为宜，常温组(n=18)，静脉输注液体温度(20.83±2.55)℃；温热组(n=18)，静脉输注液体温度(40.89±1.18)℃。④全身肝素化：从耳缘静脉(或右侧颈外静脉)注射125 U/mL的肝素，首次剂量为1 mL/kg，以后每隔1 h注射1 mL肝素维持血液抗凝状态。⑤左颈总动脉插管：先将带有三通接头并与压力换能器相连的动脉插管充满125 U/mL肝素溶液，结扎动脉远心端，待动脉充分充盈后用动脉夹夹闭近心端，用眼科剪朝向心脏方向与动脉成20～45度角剪开动脉，切口大小约为动脉周径1/3—1/2，向心脏方向插入、二次结扎固定，轻轻松开动脉夹，观察动脉插管无出血后再撤掉动脉夹。

1.3.3 实验装置的连接 先打开BL-420F生物信号采集处理系统，把压力换能器的输入线插入BL-420F生物信号采集处理系统上的信号输入孔，刺激电极插入刺激输出孔，打开电脑进入BL-420F生物信号采集处理系统，调整三通的位置，使血压波动传递到压力换能器，选择相应通道，实验观察。

1.3.4 动脉血压的调节 ①正常血压[2]。②向心脏方向快速牵拉一侧颈总动脉插管，观察血压的波动。一般表现为颈动脉窦压力感受器向中枢传入冲动增加,中枢使迷走神经紧张增加,交感神经紧张降低,导致心率减慢,心输出量减少,外周血管阻力降低,动脉血压下降。③向心脏方向持续牵拉一侧颈总动脉插管，观察血压的波动。一般表现为动脉血压下降但没有快速牵拉一侧颈总动脉插管幅度大，并且缓慢回升，提示压力感受器对刺激的快速变化敏感。④夹闭另一侧颈总动脉3～5 s，观察血压的波动。夹闭另一侧颈总动脉,颈动脉窦神经向中枢传入冲动减少, 中枢使迷走紧张降低,交感紧张加强,表现为外周阻力增加,心率加快,心输出量增加,从而导致动脉血压上升。⑤将缓冲神经双重结扎并从中间剪断，分别刺激缓冲神经中枢端和外周端，观察血压的波动。缓冲神经为传入神经，刺激缓冲神经的外周端对血压和心率没有明显影响；适宜的刺激刺激缓冲神经的中枢端会引起血压降低。

1.3.5 观察微循环 在家兔左侧腹部做一5～7 cm的切口，打开腹腔，找到回肠袢，把它拉出体外，把肠系膜平铺到恒温微循环灌流盒里(盒内盛有38 ℃台氏液，液面高度约为盒内小平台高度的1/2)小平台上，肠系膜上覆盖保鲜膜，防止污染显微镜。注意小平台、肠系膜、保鲜膜之间不要有空气，空气会影响观察效果。用显微镜观察肠系膜微循环的流动，能够观察到肠系膜微循环的流动为实验成功。

1.3.6 制备家兔急性失血性休克模型 ①少量放血:从左颈总动脉三通处连接50 mL注射器(内装1 mL肝素)放血量约为总血量(总血量按70 mL～80 mL/kg计算)的10%，同时密切观察微循环的血流速度变化。②大量放血:再次打开三通开始放血，放血量约为总血量的10%～20%，边放血边观察微循环的血流速度的变化，直至血流速度明显变慢为粒流、粒摆流或停止，可认为出现休克。

1.3.7 实验性抢救 将50 mL注射器内放出的家兔血液通过静脉回输，加快输液速度为50～60滴/min，并根据休克发生发展的病理变化和提供的药品，设计抢救方案。

1.3.8 处死动物 空气栓塞法。

2 结果

常温组家兔微循环模型成功率72.22%(13/18),而温热组微循环模型成功率88.89%(16/18)，二者相比P<0.05，具有统计学意义。

3 讨论

本实验的核心内容是观察急性失血性休克发生、发展的过程中血压和微循环等的变化，尤其是微循环的变化，加深对“休克发病的关键不在于血压，而在于血流”的理论知识的认识。如果在制备急性失血性休克模型的放血前，由于温度低、失血等原因，家兔就已经休克，无法观察到家兔微循环的血液流动，更无法观察失血对家兔微循环的影响，会严重影响本实验的教学效果。因此观察到家兔微循环的血液流动是本实验成功的关键所在，也是本实验成功的标志。本实验温热组家兔失血性休克模型成功率88.89%(16/18)，明显高于常温组成功率72.22%(13/18)。可能与常温液体输入相比，温热液体输入后,可使家兔体温相对稳定有关，不至于在麻醉状态下体温下降过快。体温相对稳定有利于血管舒张,增加血管床面积,降低外周阻力,使有效循环血量增加,组织灌流改善,有益于增加心输出量,改善心功能。

[1] 常全忠.机能实验学[M].北京：人民卫生出版社，2007:126-131.

[2] 李东亮，王合轩.生理学实验方法[M].2版. 北京：军事谊文出版社，1999:73-76.

[3] 王建荣，张黎明，刘玉春，等.溶液温度对失血性休克兔循环功能的影响[J]. 中华护理杂志,2004, 39(12): 896-898.