AFP联合AFP-L3、GPDA和CA125在原发性肝癌诊断中的可能价值

郑 飞，王春晖，周文平

(中国人民解放军沈阳军区总医院肝胆外科，沈阳 110840)

原发性肝癌发病隐匿，早期诊断十分困难[1]。大多患者确诊时已处于中晚期，因而容易错失治疗良机[2]。尽早发现原发性肝癌具有主要的临床意义。血清肿瘤标志物检测以其简捷、廉价的优势成为原发性肝癌早期诊断的常用手段。甲胎蛋白(α-fetoprotein，AFP)是公认的原发性肝癌肿瘤标志物，但有30%～40%的漏诊率[3-5]。近年的研究显示，单个肿瘤标志物检测原发性肝癌的灵敏度和特异度均不高，多种肿瘤标志物联合检测能提升检测灵敏度和特异度[6-10]。AFP联合甲胎蛋白异质体(human alpha-fetoprotein Lens culinaris agglutiin 3,AFP-L3)、甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶(glycylproline dipeplidyl aminopeplidase，GPDA)和糖类抗原125(carbohydrate antigen 125，CA125)在诊断原发性肝癌方面的研究却十分有限。本研究以原发性肝癌患者、乙型肝炎患者以及正常体检者为研究对象，测定了AFP、AFP-L3、GPDA和CA125的血清水平，并评价了单个及多项肿瘤标志物联合检测对诊断原发性肝癌的可能价值。

1 资料与方法

1.1研究对象 选取中国人民解放军沈阳军区总医院2010～2012年度收治的患者和体检人群，受试对象在充分了解本研究后签署了知情同意书。原发性肝癌组65例，男35例、女30例，年龄31～78(54.3±13.9)，原发性肝癌的诊断依据中国抗癌协会肝癌专业委员会修订的《原发性肝癌的诊断与分期标准》(2001版)[11]；乙型肝炎组57例，男29例、女28例，年龄38～77(56.8±11.0)，乙型肝炎的诊断依照中华医学会传染病与寄生虫学分会、肝病学分会联合修订的《病毒性肝炎防治法案》(2000版本)[12]；正常组共60例，男27例、女33例，年龄41～65(54.9±6.8)，均为本院体检中心体检合格者，确认无心、肺、肝、肾等器官病变，无消化系统和血液系统病史。采用肝穿刺活检、病理切片、B型超声、CT、MRI、血管造影等检查手段对所有病例进行确诊。3组间在性别、年龄方面的差异无统计学意义，具有可比性。

1.2血样收集 清晨空腹条件下抽取受试者静脉血2 mL，并立刻离心分离出血清，吸取血清适当分装并储藏于-20 ℃冰箱备用。

1.3仪器试剂和方法 采用亲和吸附法测定AFP-L3，所用AFP-L3亲和吸附离心管及Abbott I2000全自动免疫分析仪配套试剂均为北京热景生物技术有限公司生产。经过吸附离心后的AFP-L3洗脱液与原血清样本一同在Abbott I2000全自动免疫分析仪中测定AFP-L3和AFP的含量，计算AFP-L3占总AFP的比例(%)，比例AFP-L3>10%判定为阳性，AFP>20 μg/L判定为阳性。采用速率法测定GPDA水平，GPDA测定试剂盒购自浙江夸克生物有限公司，并在Beckman全自动生化分析仪LX20上进行，GPDA>120 U/L判定为阳性。CA125采用电化学发光法测定，所用试剂为Abbott Axysym化学发光仪配套试剂，在Abbott Axysym化学发光仪上进行，CA125>35 kU/L判定为阳性。

2 结 果

2.1AFP、AFP-L3、GPDA和CA125血清水平的比较 原发性肝癌组AFP、AFP-L3、GPDA和CA125四种肿瘤标志物的血清水平比乙型肝炎组和正常对照组的对应物都高，差异有统计学意义(P<0.05)。乙型肝炎组AFP、AFP-L3、GPDA和CA125肿瘤标志物的血清水平比正常组高(均P<0.05)。乙型肝炎组AFP、AFP-L3、GPDA和CA125肿瘤标志物的血清平均水平均超过正常参考值(表1)。

表1 三组AFP、AFP-L3、GPDA和CA125血清水平比较

AFP：甲胎蛋白；AFP-L3：甲胎蛋白异质体；GPDA：甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶；CA125：糖类抗原125

2.2AFP、AFP-L3、GPDA和CA125单项检测与多项联合检测阳性率的比较 AFP联合AFP-L3、GPDA和CA125的检测阳性率均比每一单项检测阳性率有所提高(P<0.05)；四项联合检测灵敏性提高到92.3%(P<0.05)。乙型肝炎组有不少病例也为AFP、AFP-L3、GPDA和CA125阳性；正常对照组未检测到AFP、AFP-L3、GPDA和CA125阳性的病例(表2)。

表2 AFP、AFP-L3、GPDA和CA125单项检测与多项联合检测阳性率的比较 [例(%)]

AFP：甲胎蛋白；AFP-L3：甲胎蛋白异质体；GPDA：甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶；CA125：糖类抗原125

3 讨 论

原发性肝癌在我国发病率位居第二[1]。AFP作为一种诊断原发性肝癌的重要肿瘤标志物已被医学界公认，并被广泛用于原发性肝癌的排查、确诊、疗效评估以及复发预测等，但AFP在诊断原发性肝癌时存有一定遗漏，给原发性肝癌早期诊断造成了困难[3-5]。研究表明，约10%肝癌患者血清无AFP，且高达30%的肝癌患者的血清AFP水平很低[13]。本研究结果发现，AFP单项检测阳性率为78.5%，该报道和前人结果相呼应[6,14]。传统意义上利用AFP检测原发性肝癌的诊断方法很少，寻找更特异、更敏感的诊断方法是原发性肝癌诊断中的热点和难点。

多种肿瘤标志物联用的血清学检测已成为当今诊断原发性肝癌的主流方法，迄今为止，已有大量研究探究了多种不同肿瘤标志物联合检测在诊断原发性肝癌上的临床效用，但AFP联合AFP-L3、GPDA和CA125的血清学检测在诊断原发性肝癌方面的研究仍十分缺乏[6-7,9-10]。AFP-L3是经由美国食品药品管理局认证的新型肝癌肿瘤标志物，是肝癌细胞特异性AFP，对原发性肝癌的临床诊断具有很高的实用价值[15]。本研究数据显示，AFP-L3单项检测阳性率为76.9%，与AFP单项检测阳性率78.5%相近，与上述文献报道结果一致[15]。GPDA是存于人体组织和血液的二胎萘酰氨酶，Kojima等[16]和朱薇等[17]的临床研究证实，肝胆疾病(特别是肝癌)患者的血清GPDA水平上升显著，其对肝癌诊断具有一定临床价值，然而它的阳性率和特异性却不高。本研究发现GPDA单项检测阳性率为69.2%，该结果与以往文献报道相类似，表明了GPDA在阳性率方面存有局限[18]。CA125是一种肿瘤相关性糖类抗原，它是对胰腺癌和卵巢癌诊断有较高价值的肿瘤标志物，近年研究证实CA125在原发性肝癌患者的血清中也出现上升，尤其在晚期原发性肝癌病例中升高更为显著[8,19]。本研究发现CA125单项检测阳性率为70.8%，该数据得到前人研究结果的支持，证明CA125在原发性肝癌诊断中具有一定作用[6]。

本研究发现AFP联合AFP-L3、GPDA以及CA125后的检测阳性率均比每一单项检测的阳性率有所提高，AFP-L3、GPDA和CA125能作为提高AFP检测阳性率的辅助肿瘤标志物，说明两项联合检测能提高原发性肝癌诊断的阳性率，具有一定的临床实用价值。AFP、AFP-L3、GPDA和CA125四项联合检测后的阳性率提高到92.3%，有显著上升。联合多种肿瘤标志物的血清学检测对提高原发性肝癌的诊断阳性率有显著的贡献，能够弥补单项检测阳性率相对低的不足之处，可以提高检出率并同时减低漏诊率，具有较高的临床应用价值。另外，联合多种肿瘤标志物的血清学检测可能在评估原发性肝癌疗效和转归方面具有一定指导作用，值得在实际临床诊断中推广运用。

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