痛风立消制剂的处方基质筛选

杨 莉， 王佳腩， 顾雪竹，任 方， 杨世梅， 王 沛＊

（1.长春中医药大学继续教育学院，吉林长春 130117；2.吉林省食品药品检验所，吉林长春 130000；3.中国中医科学院中药研究所，北京 100700）

0 引 言

痛风立消是经结构简单价廉的化合物羟基苯甲醛和氯化丙酮加成环合，经黄鸣龙反应，再经酰化、脱甲基、卤代化等步骤制得商品名为痛风立消的具有抗痛风活性的化合物。为了临床应用的目的，对该化合物的制剂基质进行了较为科学的筛选工作。

1 仪器与试剂

1.1 仪器

天平，上海精密仪器有限公司；

干燥箱，上海实验仪器厂有限公司；

药物溶出度仪（型号：RC-2-6C-2），上海药检仪器有限公司；

紫外可见分光光度计，日本岛津。

1.2 试剂

二硫化碳（分析纯），沈阳市试剂五厂；

氯化锌（分析纯），天津市光复科技发展有限公司；

苄基三乙基氯化铵，萨恩化学技术（上海）有限公司；

硫酸镁（无水），上海山浦化工有限公司；

石油醚（60～90℃），天津天泰精细化学品有限公司；

三氯甲烷（分析纯），北京化工厂；

硅胶GF254，青岛海洋化工厂分厂；

微晶纤维素（MCC），湖州展望有限公司。

2 实验方法

2.1 含量测定方法的建立

2.1.1 最大吸收波长的确定

取痛风立消化合物原料（标准品）适量，加氯仿溶解，定容。以氯仿为空白对照，按紫外分光光度法［1－2］在200～400 nm波长范围内进行扫描。确定痛风立消化合物原料（标准品）的吸收波长为284 nm。

2.1.2 标准品溶液制备

取痛风立消化合物原料（标准品）适量，精密称量，置于25 m L容量瓶中，加氯仿溶解、稀释至刻度，摇匀，制得0.1 mg／m L的对照品溶液［3］。

2.1.3 标准曲线的绘制

分别精密吸取对照品溶液0.1，0.2，0.3，0.4，0.5，0.6 m L，分别置于10 m L容量瓶中，加氯仿稀释至刻度，摇匀，制成每1 m L含1，2，3，4，5，6μg的溶液，即得。以氯仿为空白对照，按紫外分光光度法［2］在284 nm波长处测定溶液吸收度（0.086，0.172，0.258，0.312，0.461，0.430），绘制标准曲线。标准品浓度在1.0～6.0μg／m L范围内，线性关系良好。线性关系曲线为：

式中：y——吸光度值；

x——浓度。

结果表明，待测物质在该范围内线性良好。

标准品线性关系考察结果见表1和图1所示。

表1 标准品线性关系考察结果

图1 标准曲线

2.1.4 精密度实验

按绘制标准曲线的方法，分别精密量取标准品溶液0.3 m L共6份，按上述操作进行操作，测定吸收度值，结果RSD为0.198%（n＝6）。表明实验仪器精密度良好，结果的重现性较好，所得数据精确可用。

2.1.5 稳定性试验

分别精密吸取标准品溶液0.3 m L和供试品溶液适量，分别置于10 m L容量瓶中，加氯仿稀释至刻度，摇匀，即得。分别在室温下放置0，2，4，6，8，12 h，再量取溶液适量，过滤，取续滤液，以氯仿为空白对照，按紫外分光光度法［2］在284 nm波长处测定溶液吸光度值，并计算含量及相对标准偏差RSD（%）。

标准品和供试品稳定性试验结果见表2。

表2结果表明，对照品和供试品稳定性的RSD值分别为1.47%，2.65%，表明它们在12 h内较为稳定。

表2 标准品和供试品稳定性试验结果

2.1.6 痛风立消制剂的含量测定

取痛风立消制剂适量，精密称量，置于25 m L容量瓶中，加氯仿溶解、稀释至刻度，摇匀，即得。以氯仿为空白对照，按紫外分光光度法［2］在284 nm波长处测定溶液吸光度，按2.1.3线性关系式求出含量。

2.2 释放度测定

2.2.1 释放条件

释放条件采用中华人民共和国药典附录转篮法［4］进行操作。

2.2.2 测定方法

完全按中华人民共和国药典附录转篮法［4］进行测定，最终绘制时间－溶出度曲线。

2.3 痛风立消制剂制备工艺

运用挤出－滚圆方法制备，称取本品原料粉末，加入MCC等辅料至足量，使用适量润湿、黏合剂制软材后，于多功能制丸机制成微丸，依据预先实验所确定的工艺条件参数控制制丸机转速和滚圆时间。将所得成品微丸于42℃烘箱中烘干4.0～4.5 h，以18～24目筛来筛分。确定的工艺参数为：挤出转速35 r／min，滚圆机频率50 Hz，滚圆时间7 min［5］。

2.4 处方基质的单因素考察

2.4.1 载药量的考察

赋形剂承载着化合物，赋予化合物以一定的形状，临床上称其为剂型，微丸，尤其是以挤出滚圆技术制备的微丸，通常微晶纤维素（MCC）作为辅料是首选，其原因被认为是一种成球促进剂［6］。通过实验发现，采用微晶纤维素（MCC）制成的微丸，与其它辅料相比，有丸粒硬度大、堆密度好、表面光滑、圆整度佳等优点。因此，本实验选取微晶纤维素（MCC）为主要辅料［7］。化合物在制剂中的量是直接影响释放、吸收，乃至于疗效的关键所在。所以，首先考察化合物原料与其辅料质量的配比，分别为1∶3，1∶5，1∶10，1∶12及1∶15，结果见表3和图2所示。

表3 载药量的考察表

图2 不同化合物配比对制剂中化合物释放的影响（n＝7）

结果显示，载药量越大，开始释药速度越快，药物累积释放量也就越多，当30 min左右，各种载药比例的药物释放水平基本趋于一致，到5 min时，各释药组药物释放量均已基本达到完全释放。在同样给药剂量下，如果载药量小，则患者所服用药量就小。但载药量比主要是要结合临床给药剂量来决定，从微丸形成圆整度来看，本实验选择化合物粉末与其辅料质量比的各个比例所形成的丸粒质量差别不明显。在下面实验设计中，将结合临床给药剂量选取1∶5，1∶10，1∶12三个载药配比水平。

2.4.2 润湿剂的考察

润湿剂种类的选择与物料的粘性及载药量有关［8］。根据选择的辅料的性质及其所具有的黏性情况，选择了润湿剂——乙醇作为考察对象，选取了乙醇所占积分数的0%，10%，25%，50%及75%，按照设计的制备工艺，以制剂的外观、得率为指标进行考察，结果见表4。

表4 润湿剂的考察表

上述体积百分比乙醇对制剂中化合物累积释放度的影响，结果如图3所示。

图3 不同体积分数乙醇对制剂中化合物释放的影响（n＝7）

结果显示，药品粉末具有一定粘性，乙醇比例较大时微丸成形性差，几乎不能形成圆整度很好的微丸；由于乙醇的加入量亦受生产场地温度、湿度的影响，所以乙醇的实际加入量只能根据现场所制软材的性状、挤出物的外观性状和经验判断。综上所述，本实验选用10%，25%及50%乙醇为黏合剂作进一步筛选。

2.4.3 赋形剂的考察

经过多次预实验和文献的查阅，以微晶纤维素为主要赋形剂，以壳聚糖作为辅助赋形剂，这样，分别选取壳聚糖的量占整个处方的比例为5%，12.5%，25%，37.5%及50%，其它处方成分用量不变，按照上述制备工艺，以制剂的得率、外观为考察指标，结果见表5。

表5 赋形剂的考察表

分别测定不同时间点的累积释药率，结果如图4所示。

图4 不同处方的比例的壳聚糖对制剂中化合物释放量的影响（n＝6）

壳聚糖作为辅助赋形剂，可以有减缓本品释放的作用。其所占比例越大，释放就越慢。当辅助赋形剂壳聚糖所占比例过高或过低，则药物释放太慢或不完全，达不到30 min速释要求［8］。所以选择壳聚糖所占比例在5%，12.5%及25%作进一步筛选。

2.5 正交设计筛选处方

根据单因素考察结果，选定本品粉末和其辅料的载药质量比例因素（A），壳聚糖所占含量比例（B）及乙醇百分比（C）三个因素，采用正交试验筛选处方，每个因素选定三个水平，设计成三因素三水平实验，见表6。

表6 因素水平设计表

按L9（33）正交设计表安排实验，以微丸的成型性（成颗粒率），丸剂的累积释放因子（S）为主要评价标准，选择最佳处方。试验正交设计方案和结果见表7。

成颗粒率：

成颗粒率越高，细粉率越低，小丸成型性越好。

累积释放因子：

式中：Q5，Q30，Q60——分别代表5，30，60 min时药物的累积释放率。

S值越低，表明所定的标准［10］越接近，因素的水平数越佳。

表7 L 9（33）正交设计实验方案和结果

表7结果显示，因素对成型率影响大小顺序为3＞1＞2；对释放影响的顺序为3＞2＞1。综合2个评价标准，因素最优水平组合为：A1B1C2。

因此，得出制备痛风立消制剂的最优处方为：药物粉末与其辅料质量之比为1∶10（当然，载药质量比例要结合临床给药剂量具体来定），壳聚糖为5%，乙醇百分比为25%。

3 小结与讨论

3.1 处方单因素考察讨论

本实验选取微晶纤维素为辅料，其具有较强的结合力，亦有“干粘合剂”之称。与其它类型辅料相比，使用它制得的微丸硬度适中、堆密度大、表面光滑、圆整度好；选用一定体积分数乙醇作为润湿剂，乙醇挥发性较强，如制软材时间过长，会导致乙醇挥发过多，使得润湿剂（黏合剂）的加入量不便于控制，从而给制粒带来不便，由于时间和条件的关系，未做进一步的考察。查阅相关文献，可考虑加入表面活性剂，表面活性剂的加入能有效防止乙醇（润湿剂）的挥发，同时，还可以克服挤出物表面缺陷，减少挤出物与筛网的摩擦力，从而显著降低挤出操作时的能耗［11］，使成丸表面变得更加光滑；选用壳聚糖为补充赋形剂，壳聚糖是甲壳素经脱N-乙酰基的衍生物，有一定疏水性，生物相容性好，可生物降解，是目前有发展前途的多糖类天然高分子材料。在辅料中加入一定比例的壳聚糖，有减慢药物释放的作用，以免药物释放过快，达不到速释要求。

3.2 最佳处方

以乙醇为润湿剂、微晶纤维素为骨架材料赋形剂、以壳聚糖为减缓释放赋形剂分别进行单因素考察优化，得出最佳处方。即化合物粉末与其辅料质量之比为1∶10，壳聚糖为5%，乙醇百分比为25%。采用该处方比例所制备的微丸圆整度好，硬度适宜，收率高，可满足设计制剂的要求，且药物释放的重现性良好。

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