原种罗氏沼虾杂交后代的繁殖参数研究

范忠刚, 屈长青， 邓 潜, 赵永贞， 张 彬

(1. 安徽大学 生命科学学院, 合肥 230601; 2. 广西水产科学研究院, 南宁 530021； 3. 抗衰老中草药安徽省工程技术研究中心， 阜阳 236041)

罗氏沼虾(Macrobrachiumrosenbergii)又称马来西亚大虾、淡水长臂大虾，其味鲜美、食性广、生长快、生长周期短，是目前国内主要的3大淡水经济虾类之一[1]。自从20世纪70年代引入中国以来，由于长期种群内繁殖，种质资源衰退现象严重，主要表现为生长速度缓慢、抗病能力下降、性成熟提前、个体小等[2,3]。这使得“蝎子虾”(一种性早熟的雄虾)现象频发，“蝎子虾”的大量出现改变了塘虾群体结构，原因是一方面具有生长潜质的黄钳雄虾(OC)与个体最终形态的蓝钳雄虾(BC)被早熟的蝎子虾(小雄虾，SM)取代，雄虾个体规格大幅度下降。另一方面，因为蝎子虾会在池塘中与性成熟的雌虾交配，导致池塘中的部分雌虾因为怀卵期间不蜕壳的自然生理机制而未能按时蜕壳生长。最终影响了塘虾的整体大小规格，使得池塘饲养单产大幅度降低，严重影响了经济效益。因此，罗氏沼虾亲虾的种质衰退问题得到了史无前例的重视。近年来有关罗氏沼虾种质改良的报道主要集中在选择育种，而有关罗氏沼虾杂交选育的报道较少。本实验以孟加拉引进种群Macrobrachiumrosenbergiidacqueti(Sunier，1925年)和越南引进种群Macrobrachiumrosenbergiirosenbergii(De Man，1879年)为父母本做正、反杂交，并对杂交组合的繁殖参数进行统计分析，以期为罗氏沼虾杂交育种提供参考。

1 试验材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 试验场地

试验操作根据虾场里日常生产安排于2011年5月和2012年3月在广西水产科学研究院罗氏沼虾良种场各进行1次。罗氏沼虾亲本为广西水产科学研究院罗氏沼虾良种场保种繁育用的孟加拉引进种群Macrobrachiumrosenbergiidacqueti(Sunier，1925年)和越南引进种群Macrobrachiumrosenbergiirosenbergii(De Man，1879年)，选取性腺发育成熟度接近的个体作为亲本材料。杂交选育所用的设施、用具、药品、饵料等均由本场提供。

1.1.2 仪器与设备

生物显微镜，游标卡尺，电子称，电子分析天平。

1.2 试验方法

1.2.1 设计杂交组合

正交：越南引进种群♀×孟加拉引进种群♂；

反交：孟加拉引进种群♀×越南引进种群♂。

1.2.2配对

2011年5月以孟加拉引进种群和越南引进种群为父母本做正、反杂交配对。父本80尾，母本160尾；2012年3月，以孟加拉引进种群和越南引进种群为父母本做正、反杂交配对。父本70尾，母本140尾。在配对池挂标志牌，注明亲本名，配对日期。杂交配对亲虾如图1、图2、图3和图4。

图1 原种孟加拉雄虾

图2 原种孟加拉雌虾

图3 原种越南雄虾

图4 原种越南雌虾

1.2.3 日常管理

隔天轮换投喂新鲜螺肉、玉米粒、煮熟的鸡蛋和鱼肉，并保持水质清洁。pH值控制在7.0～7.5之间；氨氮和亚硝酸控制在0.2 mg/L以下；水温控制在27℃～28℃。亲本中若发现有死亡个体应及时补充。

1.2.4 杂交组合的繁殖参数检测

检测受精率、体重相对繁殖力、体长相对繁殖力、性腺系数。受精率(%)=受精卵数量/怀卵量×100%；

体重相对繁殖力(%)=受精卵数量/体重×100%；体长相对繁殖力(%)=受精卵数量/体长×100%；性腺系数(%)=性腺重量/体重×100%

2 试验结果与统计分析

2.1 杂交配对产生性腺发育基本一致的怀卵虾数量

配对1周后，配对池中开始有部分雌虾在雄虾的护佑下完成生殖蜕壳并与其交配。2周后，可在夜间观察到怀卵虾贴近水面游动或攀附气管。此阶段胚胎开始出现眼点，卵黄减少,胚胎开始呈弯弓形状，随着发育逐渐向后伸长，尾节直达头胸部。用显微镜可以观察到胚胎心跳。杂交配对怀卵虾收获情况如表1。

表1 杂交配对怀卵虾收获情况

2.2 杂交组合的繁殖参数测量结果

在体重为22～32 g的5尾正交组雌虾中，怀卵量均值为25740粒/尾，受精率为60.0%～69.7%(均值为64.58%)，体重相对繁殖力均值为976.2粒/g，体长相对繁殖力均值为2370.34粒/cm,性腺系数均值为9.586%；在体重为25.6～35.1 g的5尾反交组雌虾中，怀卵量均值为30242粒/尾，受精率为60.9%～67.3%(均值为67.3%)，体重相对繁殖力均值为941.92粒/g，体长相对繁殖力均值为2674.44粒/cm,性腺系数均值为8.838%。具体测量结果见表2和表3。

表2 正、反交组的受精率统计

表3 正、反交组怀卵量、相对繁殖力与性腺系数测定结果

2.3 杂交组合的繁殖参数均数比较

通过对正反交组合各取5例雌虾进行繁殖参数测定，经SPSS17.0计算和统计分析，各杂交组的各项繁殖参数的平均值组间差异不显著(P﹥0.05).正、反交组合的繁殖参数均数比较见表4。

表4 正、反交组合的繁殖参数均数比较

3 讨论

杂交选育是动植物遗传改良的重要手段，也是水产养殖业育种的重要途径之一，在鱼[4-7]、虾[8-10]、蟹[11]、贝[12,13]中均有相关报道。笔者通过SPSS 17.0软件对孟加拉引进种群Macrobrachiumrosenbergiidacqueti(Sunier，1925年)和越南引进种群Macrobrachiumrosenbergiirosenbergii(De Man，1879年)的正反交各杂交组的各项繁殖参数的平均值进行单因子方差分析，结果表明正反交各杂交组的各项繁殖参数的平均值组间差异不显著(P>0.05)(如表4)。罗氏沼虾的产卵量因个体大小和性腺发育情况不同而异，李增崇通过对体重32～64 g的10尾雌虾进行测定，发现其抱卵量分别为46800～88400粒，平均每克体重抱卵量1061.2～1529.4粒[14]。本研究中正反交组中雌虾的平均怀卵量为25740.200～30242.200粒，与李增崇的测定结果相比偏少。这可能是实验雌虾偏小和性腺发育情况不同的缘故。但本研究中受精卵粒相对较大，达到941.9～976.2粒/克。更大的卵粒会发育成更大的幼体，有助于提高种群的生存能力。

当然，不可否认的是当前的罗氏沼虾养殖技术要比上世纪80年代的更加先进，许多养殖品种的性状都得到了有效改良。因此，本研究只能在既定层面上阐述原种罗氏沼虾杂交选育得到的研究结果，以期为今后开展原种罗氏沼虾的杂交选育提供参考。

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