两类中药方对消化性溃疡患者热休克蛋白70及瘦素表达的影响比较

李长军 张平

武装警察部队湖北省总队医院消化内科，湖北武汉430061

两类中药方对消化性溃疡患者热休克蛋白70及瘦素表达的影响比较

李长军 张平

武装警察部队湖北省总队医院消化内科，湖北武汉430061

目的观察健脾温中和疏肝理气类中药对消化性溃疡(PU))患者热休克蛋白70(HSP70)及瘦素(Leptin)表达的影响。方法2011年10月～2013年4月武装警察部队湖北省总队医院41例活动期并幽门螺杆菌(HP)阳性患者，脾胃虚寒型(对照组)19例与肝胃气滞型(治疗组)22例，均在西药基础上分别加用健脾温中和疏肝理气汤剂，6周后行胃镜及HP复查；以酶联免疫吸附分析方法(ELISA)对患者血清HSP70及Leptin进行检测。结果HP根除率、胃镜疗效，两组比较，差异无统计学意义(P＞0.05)；HSP70及Leptin含量，治疗前两组比较，差异无统计学意义(P＞0.05)；治疗后，HSP70含量对照组增加显著高于治疗组(t=3.531，P＜0.01)，Leptin含量治疗组提高明显高于对照组(t=2.487，P＜0.05)。结论健脾温中和疏肝理气类中药对消化性溃疡患者血清HSP70及Leptin表达促进作用存在强度区别，西医医师应重视中药的对证作用。

消化性溃疡；中医证型；中药方剂；热休克蛋白70；瘦素

由于独特的预防和治疗作用，尤其在某些疾病上发挥着化学药品不可替代的重要作用，各大医院采购品种繁多的中成药［1］，我国约70%的中成药由综合医院西医医师开出，但不合理使用率高达四成。许多中成药也被联合运用于消化性溃疡(peptic ulcer，PU)治疗，PU病理过程中相关因子的变化及中药或中成药对相关因子的影响及该影响对优势疗效的作用有许多与单用西药的对照性报道［2］。由于不少中成药已从传统的以主治证命名方式改变为有的以功效和作用命名，有的以治疗某病命名，甚至冠以通俗效能名，虽然方便了临床医师运用，但也易产生对病不对证等问题。中药治病，处方基于中医辨证，鉴于以辩证分型为基础的分类中药方剂机制对照研究不多，以及西医医师缺乏中医辨证的相关知识与经验，本文对中西医结合治疗PU过程中不同类别中药对患者热休克蛋白70(heat shock protein，HSP70)及瘦素(Leptin)表达的影响进行比较分析，望提高西医医师对中成药对证作用的重视，并对西医医师尽量准确对证使用中成药提出建议。

1 资料与方法

1.1 一般资料

2011年10月～2013年4月武装警察部队湖北省总队医院门诊患者41例，均经胃镜检查证实为活动期溃疡，并经活检排除胃癌；幽门螺杆菌(helicobacter pylori，HP)快速尿素酶检测及14C尿素呼气试验均为阳性；男32例，女9例，年龄22～52岁；胃溃疡9例，十二指肠溃疡32例。患者4周内未服用抗生素、铋剂、抑酸剂及对HP有抑制作用的药物，有严重心、肺、肝、肾及内分泌疾病；多发性及复合性或有严重并发症；疑有恶变或有外科手术指征；特殊类型胃溃疡或十二指肠溃疡(如胃泌素瘤患者)；不愿、不便参与及有心理精神疾患者，均不列入观察。脾胃虚寒型(对照组)19例，男15例，女4例，年龄23～50岁，胃溃疡4例，十二指肠溃疡15例；肝胃气滞型(治疗组)22例，男17例，女5例，年龄22～52岁，胃溃疡5例，十二指肠溃疡17例。各组年龄、性别、职业、饮酒、吸烟、饮食习惯等差异无统计学意义(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 主要试剂与仪器

人热休克蛋白70 ELISA试剂盒(美国RD公司)；人瘦素ELISA试剂盒(安徽安科生物工程股份有限公司)；Elx800自动酶标仪(美国Bio.TekInstruments公司)。

1.3 方法

1.3.1 中医分型及疗效判定标准参照《中药新药临床研究指导原则》(试行)［3］，中医辨证分型标准：必备胃痛隐隐，喜暖喜按主症，兼具其余主症中1项加次症2项为脾胃虚寒型；必备胃脘胀痛，两胁胀闷，兼具其余主症中1项加次症2项为肝胃气滞型。胃镜疗效判定标准：临床痊愈为溃疡及周围炎症全部消失；显效为溃疡消失，仍有炎症；有效为溃疡缩小50%及以上；无效为溃疡缩小不及50%。

1.3.2 治疗方法两组患者均给予泮托拉唑(海南海力制药有限公司，批号：11120290)40 mg/d，餐前0.5 h服用，2次/d；阿莫西林胶囊(珠海联帮制药股份有限公司中山分公司，批号；18578)1000 mg/d、克拉霉素分散片(黑龙江肇东华富药业有限责任公司，批号：100901) 500 mg/d，2次/d，餐后即服；10 d后，泮托拉唑20 mg，1次/d；1个月后，雷尼替丁(杭州民生药业有限公司，批号：4110101)300 mg/d，2次/d。对照组加服自拟健脾温中汤(由党参20 g，炒白术15 g，炙甘草10 g，干姜6 g，肉桂3 g等组成，由本院制剂室制作成煎剂，每袋100 mL，下同)，200 mL/d，2次/d，饭前1 h服用；治疗组加服自拟自疏肝理气汤(由柴胡15 g，陈皮15 g，香附10 g，枳壳12 g，炙甘草6 g等组成)，饭后1 h服用，均每7天为停服1 d。6周后进行胃镜等复查。

1.3.3 标本采集和处理治疗前后，每例患者取胃窦及胃体黏膜组织各2块做尿素酶试验；清晨空腹，用带分离胶的血清采集管采前臂静脉血6 mL，室温静置1 h，离心取上清2 mL分装2个EP管，分置.27℃、.85℃冰箱保存。

1.3.4 血清标本检测方法按ELISA试剂使用说明进行操作，在酶标仪450 nm波长下测定光密度值(OD值)，以曲线回归方程计算样品浓度，再乘以稀释倍数。

1.4 统计学方法

采用SPSS 16.0软件，计量资料数据以均数±标准差(±s)表示，采用t检验。计数资料以率表示，采用χ2检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 HP根除率

对照组17/19(89.47%)，治疗组20/22(90.91%)，两组比较，差异无统计学意义(χ2=0.024，P=0.877＞0.05)。

2.2 胃镜疗效

对照组19例，痊愈15例(78.95%)，显效2例(10.53%)，有效1例(5.26%)，无效1例(5.26%)，总有效率94.73%。治疗组22例，痊愈18例(81.82%)，显效2例(9.09%)，有效1例(4.55%)，无效1例(4.55%)，总有效率95.45%。两组临床痊愈率比较，差异无统计学意义(χ2=0.054，P=0.817＞0.05)。

2.3 血清HSP70及Leptin含量

治疗前两组血清HSP70及Leptin含量比较，差异无统计学意义(t=0.052，t=0.197，P＞0.05)。治疗后，对照组HSP70含量显著增加(t=25.241，P＜0.01)，治疗组亦明显增加(t=2.136，P=0.045＜0.05)，对照组增加显著高于治疗组(t=3.531，P=0.001＜0.01)；治疗组Leptin含量显著提高(t=97.018，P＜0.01)，对照组明显提高(t=0.264，P=0.472＜0.05)，治疗组提高明显高于对照组(t=2.487，P=0.017＜0.05)。表明健脾温中与疏肝理气类中药对PU患者HSP70及Leptin的表达促进作用存在强度区别。见表1。

表1 两组患者治疗前后血清HSP70及Leptin含量比较（ng/mL，±s）

表1 两组患者治疗前后血清HSP70及Leptin含量比较（ng/mL，±s）

注：与对照组治疗后比较，*P＜0.05，**P＜0.01；HSP70：热休克蛋白70；Leptin：瘦素

组别例数H S P 7 0治疗前治疗后L e p t i n治疗前治疗后对照组治疗组1 9 2 2 2 . 1 6 2 ± 0 . 0 1 5 2 . 1 6 4 ± 0 . 0 1 0 2 . 2 6 4 ± 0 . 0 1 1 2 . 2 1 3 ± 0 . 0 1 3**3 . 1 7 2 ± 0 . 0 1 4 3 . 1 6 9 ± 0 . 1 1 6 3 . 2 7 4 ± 0 . 0 1 3 3 . 3 1 9 ± 0 . 0 1 2*

3 讨论

中医中药在治疗消化性溃疡方面积累了丰富经验，有许多临床观察和研究［4］，中西医结合治疗PU能提高疗效，能更快地改善临床症状［5］，但对按中医辩证分型确定的不同类中药配方进行较为深入机制对照研究不多。基于任何有效的中药方剂都可能被制作为中成药的考虑，笔者根据辨证分型以对证的自拟方剂合用西药进行PU治疗对照观察，结果胃镜下临床痊愈率，对照组78.95%，治疗组81.82%，与相关中药方剂合用西药疗效接近［6］，再次说明中西医结合治疗能提高PU的疗效。

各种生物受到外界不利或有害因素刺激时都会发生热休克反应并产生热休克蛋白(HSPs)，它们具有参与蛋白折叠、转运、机体免疫和细胞凋亡等多种生理功能［7］。HSP70是热休克蛋白家族主要成员之一，其通过提高细胞对应激的耐受性、抑制炎性反应、抗氧化、抗凋亡等多种途径发挥细胞保护作用。Leptin在机体内作用广泛，在免疫功能，细胞增殖、分化、转移和调亡等方面具有重要的调节作用，其对免疫功能和炎性反应的调节作用是目前的研究热点［8］。有研究显示，黄芪建中汤合失笑散能显著增加消化性溃疡患者血清HSP70及瘦素的表达水平，并通过它们各自的保护机制促进溃疡愈合［9］，笔者观察PU患者治疗后HSP70及Leptin含量两组有显著和明显增加，推测较好的中西医结合疗效可能与上述两种因子通过相关环节与因素的保护作用有关。PU患者HSP70表达较正常人增强［10］，消化性溃疡的发生可使黏膜组织中Leptin的表达增加［11］，PU病理过程中的相关因子因素对HSP70及Leptin的表达应该有激发作用。但也有研究表明，PU患者治疗前Leptin水平与正常人接近，治疗后水平轻度下降［12］，与相关研究结果不一致的原因有待进一步研究，与本研究结果不一致的原因，笔者推测可能与病例选择标准及检验时间不同有关，更有可能是中药的促进表达影响作用。HSP70及Leptin调控机制十分复杂，溃疡病理过程中的组织坏死性毒素、缺氧、胃酸和疼痛等诸多刺激因素可激活HSP70表达，而Leptin的表达促进则受体脂含量、某些激素、炎症等多因素影响。他们的调控与作用涉及相关基因水平的激活与抑制，包含激素、酶类、神经机制等诸多因子因素间环节相互作用与反馈作用。笔者观察发现健脾益气类中药提升HSP70作用强势于疏肝理气类中药，而疏肝理气类中药提升Leptin作用强势于健脾益气类中药，提示两类中药对PU患者HSP70及Leptin的表达的促进强度存在区别。该结果虽不能代表两类中药作用的全面机制，也可能对证使用的表达促进强度差异对机体发挥保护作用是适宜的，但从HSP70及Leptin调控机制及环节作用分析，两种因子的表达差异应该对机体整体病理生理产生不同影响。尽管HSP70及Leptin对机体不良影响研究不多，但上述差异对疗效和机体在不对证使用中药时可能产生的不利影响应引起重视，也提示西医医师使用中成药时要认真考虑对证作用。至于差异的原因仍有待进一步研究，也应加强治疗前与正常人和组内与单用西药治疗的对照观察。

中医的证，是对致病因素与机体反应性两方面情况的综合，辨证是根据患者的临床表现，辨别出病变当前的位置和性质，既含病因又含机制。客观而言，高年资中医医师能做到辩证精准也属不易，加之中医症状体征、病因病机描述术语及身体部位的概念与西医又存在很大区别，要求西医医师正确辩证极不现实。有学者发现PU患者中医各证型与感染HP关系比较有显著差异性［13］，更有学者对慢性肾功能衰竭不同中医证型与HSP70、尿水通道蛋白2含量等指标的关系作了研究［14］，即便如此，也很难做到西医检查的客观依据与中医辨证所需要素的有机对应。目前，除传统的膏、丹、丸、散外，针剂、口服液等稳定安全的新剂型逐渐进入市场。但许多中成药说明书，功能与主治说明既含中医的证，也含西医的病，或说明治疗西医某病中的某证，或按西医药理直接写明某作用，如此势必导致不熟悉中医辩证的西医医师按病开药，或按药理和效能处方，不考虑对证或对证不准的问题在所难免。中医界应加快与证相关检查、检验客观依据的定性、量化系统研究；中西医结合工作者在中医症状体征、部位术语等方面描述与西医的差异要多作对照融通探索和宣教工作；单方复方机制研究，应将对证药物可能引起对应症状体征改变的原因在机制上以现代医学已有的病理生理及药理认识和发展趋势进行预测，开展如西医的激动与阻滞、抑制与兴奋似的中药宏观归类与微观作用的系列研究。要尽力减少只作与西医相关因子符合性、验证性的研究，避免支离性和分散性，中医辨证分型结果关联中药性味，要把性味概念提升为西医医师易于理解的中药药理依据，中成药说明书也应根据上述工作的开展作必要的内容调整。如此，也许能为西医医师尽量对证准确运用中成药提供便利。

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The influence comparison on expression of heat shock protein 70 and Leptin by two types Chinese herbal medicine prescription in the treatment of peptic ulcer

LI ChangjunZHANG PingDepartment of Gastroenterology,Hubei Provincial Corps Hospital of Chinese People′s Armed Police Forces,Hubei Province,Wuhan430061,China

Objective To observe the expression influence of heat shock protein 70（HSP70）and Leptin on patients with peptic ulcer（PU）treated by traditional spleen.nourishing middle.warming and soothing liver regulating qi prescription.Methods 41 patients with Helicobacter pylori（HP）positive in active stage in Hubei Provincial Corps Hospital of Chinese People′s Armed Police Forces from October 2011 to April 2013,were divided into two groups,of which there were 19 cases with deficiency cold of spleen and stomach（control group）,22 cases with qi.stagnation of liver and stomach（treatment group）.The two groups were treated respectively by spleen.nourishing middle.warming and soothing liver regulating qi decoction while using western medicine,reexamination of gastroscope and HP were taken after 6 weeks. The HSP70 and Leptin content in serum were tested by enzyme.linked immunosorbent assay（ELISA）.Results The HP eradication rat and gastroscopic curative effect were not significantly different between control group and treatment group（P＞0.05）.The HSP70 and Leptin content were no significant differences between control group and treatment group before treatment（P＞0.05）after treatment,the content of HSP70 in control group was significantly higher than that in the treatment group（t=3.531,P＜0.01）,the content of Leptin improved was much higher in treatment group than that in control group（t=2.487,P＜0.05）.Conclusion There are intensive difference on expression of HSP70 and Leptin in serum of patients with peptic ulcer treated by traditional spleen.nourishing middle.warming and soothing liver regulating qi prescription,the medicine physicians should attach much weight to the consistence of TCM syndrome type and Chinese herbal medicine prescription.

Ulcer peptic;TCM syndrome type;Chinese herbal medicine prescription;Heat shock protein 70;Leptin

R259

A

1673-7210（2014）02（a）-0084-03

2013.11.08本文编辑：卫轲)