不同番茄中番茄皂苷A的含量比较

卢凤来，陈思呈，2，颜小捷，李典鹏，*

（1.广西植物功能物质研究与利用重点实验室（广西植物研究所），广西桂林541006；2.广西师范大学，广西桂林541004）

不同番茄中番茄皂苷A的含量比较

卢凤来1，陈思呈1，2，颜小捷1，李典鹏1，*

（1.广西植物功能物质研究与利用重点实验室（广西植物研究所），广西桂林541006；2.广西师范大学，广西桂林541004）

采用高压液相色谱－蒸发光散射检测法测定桂北地区不同品种、不同采收期番茄及桂林市市场上新鲜番茄中番茄皂苷A的含量。结果表明番茄中番茄皂苷A的含量与品种有较大的关系，其中大番茄的含量明显低于樱桃番茄的含量，同时不同樱桃番茄中其含量也有显著的差异，活力的含量最高，其含量占干粉含量的0.7%。市场上的新鲜番茄中番茄皂苷A的含量也差异明显。

高压液相色谱－蒸发光散射检测法；番茄；番茄皂苷A

番茄（Lycopersicon esculentum Mill.），又名西红柿，不少地区叫洋柿子、火柿子[1-2]，是茄科番茄属植物。番茄具有丰富的营养成分[3]，与人类健康密切相关。目前国内学者对番茄的研究主要集中在栽培育种，病虫害防治以及番茄红素等脂溶性化学成分的研究上[4-9]，有关番茄皂苷的研究报道还较少。2003年，日本野原等人首次从成熟番茄分离出了番茄皂苷A（esculeoside A），结构式为3-O-β-石蒜四糖基（5S，22S，23S，25S）-23-乙酰氧基-3β，27-二羟基螺旋甾碱烷27-O-β-D-吡喃葡萄糖苷，是番茄中主要的皂苷成分，其含量大约是番茄红素的四倍[10]。药理活性研究发现番茄皂苷A（esculeogenin A）及其苷元体外可抑制泡沫细胞的形成，可显著降低动脉粥样硬化症ApoE缺陷小鼠血浆中胆固醇，甘油三脂，低密度脂蛋白水平，而无其它方面副作用，为一种较好的酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶抑制剂，是有前景的抗动脉粥样硬化症化合物[11]。另外研究还预计番茄皂苷A在体内可代谢成具有抗骨质疏松，抗更年期障碍，及抗肿瘤等生物活性的孕甾体激素[12]。因此除番茄红素外，番茄中尚存在多种水溶性皂苷化合物，其活性也更值得我们研究和注意，番茄皂苷提取物在国际植物药及保健食品市场也日益受到亲睐[13]。

我国是世界上番茄最大的生产国之一。通过对桂林地区的番茄进行初步的提取分离试验，我们发现桂林产的番茄都含有番茄皂苷A，但其含量高低与品种有很大关系。在已建立番茄皂苷A高压液相色谱－蒸发光散射检测法的含量测定方法的基础之上[14]，我们首次比较了不同品种番茄中番茄皂苷A的含量，筛选出优良品种。为番茄的加工利用开辟另一条新路，以更大地促进番茄产业的发展奠定物质基础。

1材料与方法

1．1仪器和试剂

仪器：Agilent1200半制备型高效液相色谱仪；美国Alltech ELSD—2000ES型蒸发光散射检测器；ZORBAX SB-C18分析柱：4.6 mm×150 mm，5μm）；BS110S赛多利斯电子天平：北京赛多利斯天平有限公司；B3500S-MT超声清洗器：必能信超声有限公司。

标准品与试剂：番茄皂苷A（esculeoside A）由本实验室从番茄中分离获得，经高分辩质谱（HR－MS）和核磁共振谱（NMR）鉴定其结构。甲醇为色谱纯（美国TEDIA公司）；重蒸蒸馏水为自制，其他试剂均为AR级。

1．2样品来源与样品处理

23个不同品种的新鲜成熟番茄采自广西桂林的资源，龙胜，永福等县，并于不同月份在桂林市果蔬批发市场采集了17批次的樱桃番茄样品（样品来源见表1和表2）。采集后取一定量样品，切开，用榨汁机绞碎，准确称量150.0 g冷冻干燥，再粉碎，过40目筛，干燥保存备用。

测定时精确称取番茄粉末1.000 g，置100μmL具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇50mL，摇匀，称定重量，超声处理1 h，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，以0.45μm的微孔滤膜滤过，滤液作为供试品溶液。

1．3色谱条件与标准曲线的绘制[14]

色谱条件：色谱柱：ZORBAX SB-C18柱（4.6mm× 150mm，5μm）；柱温：30℃；流动相：甲醇-水（梯度洗脱：0→5min：15%→30%甲醇；5→12min：30%→60%甲醇；12→20 min：60%→80%甲醇）；检测时间：25 min；流速：0.8mL/min。ELSD检测器参数：漂移管温度：100℃，空气流速：2.7 L/min。在此条件下，目标化合物能较短时间内与其它化合物基线分离（见图1）。

分别吸取对照品0.122mg/mL溶液5、10、12、15、20μL，注入液相色谱仪中，测定峰面积，以对照品进样量的自然对数为横坐标，以对照品峰面积的自然对数为纵坐标，绘制标准曲线。回归方程为Y=1.648 5X+ 8.130 2，r=0.999 5，结果表明，番茄皂苷A在0.61mg～2.44mg内的对数值与峰面积的对数值具有良好的线性关系。

图1 标准品、活力番茄与大百利番茄色谱图Fig．1 Chromatograms of reference substance，huoli tomato and dabaili tomato

2结果与分析

2.1 不同品种番茄中番茄皂苷A的含量检测

通过采集桂北地区23个不同的番茄品种进行检测，结果见表1与图2。

由表1和图2表明，番茄皂苷A的含量与番茄品种有密切的关系，其中大番茄（大百利、巴顿、圣比利）含量明显低于樱桃番茄，这一结果与Hideyuki Manabe等[15]的研究结果一致。不同樱桃番茄中其含量也有显著的差异，活力的最高，其含量占干粉含量的0.7%，其次为亚蔬11号（0.674%）。

2.2 市场上新鲜樱桃番茄中番茄皂苷A的含量检测

为了了解市场上樱桃番茄中番茄皂苷A含量情况，我们在2010年内的不同月份，到桂林果蔬批发市场购买了适量的樱桃番茄，检测其中番茄皂苷A的含量，结果见表2与图3。

表1 不同品种番茄中番茄皂苷A的含量检测结果Table1 Determination result of esculeoside A in different species of Lycopersicon esculentum M ILL.samples

图2 不同品种番茄中番茄皂苷A的含量检测结果Fig.2 Determination result of esculeoside A in different speciesof Lycopersicon esculentum M ILL.samples

由表2、图3表明，这些样品中番茄皂苷A的含量高低不一。这跟其品种、产地、采收期有很大的关系。由于我们在市场上收集的番茄样品，只知道其产地，但其品种名称并不清楚。要研究不同时期番茄中番茄皂苷A的含量，样品来源应该固定品种固定产地。

表2 桂林市场上新鲜樱桃番茄中番茄皂苷A的含量检测结果Table2 Determination result of esculeoside A in Lycopersicon esculentum M ILL.samples coming from guilin market

图3 桂林市场上新鲜樱桃番茄中番茄皂苷A的含量检测结果Fig.3 Determination result of esculeoside A in Lycopersicon esculentum M ILL.samples coming from guilin market

3结论

通过本实验，了解到不同品种番茄中番茄皂苷A的含量差异，有利于番茄产品加工时原料的选择及番茄资源的综合利用。以获取番茄皂苷A为目的时，应引种栽培番茄皂苷A含量高的品种，同时注意采收的时期，可有效提高其产品的品质。筛选出高含量番茄皂苷A的品种，为开发一种番茄皂苷新型保健食品或药品，综合利用番茄中脂溶性成分和水溶性成分打下物质基础。

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Determination Result of Esculeoside A in Different Lycopersicon esculentum M ILL.samples

LU Feng-lai1，CHENSi-cheng1，2，YANXiao-jie1，LIDian-peng1，*
（1.GuangxiKey Laboratory of Functional Phytochemicals Research and Utilization，Guangxi Institute of Botany，Chinese Academy of Sciences，Guilin 541006，Guangxi，China；2.Guangxi Normal University，Guilin 541004，Guangxi，China）

The content of esculeoside A in Lycopersicon esculentum MILL.sample of different cultivated varieties，different harvest time in the north area of guilin and fresh fruits from guilin market were deternined by high performance liquid chromatography（HPLC）with evaporative light scattering detection（ELSD）.The results showed that the content of esculeoside A is strongly related to the cultivated varieties，which of big tomato is obviously lower than that of cherry tomato.And there was also obvious difference among different cherry tomato，esculeoside A's content of huoli was the highest，which was0.7%of dried power.Morever the obvious difference also exsited in the fresh tomato coming from market.

High performance liquid chromatography with evaporative light scattering detection；Lycopersicon esculentum MILL.；esculeoside A

10.3969/j.issn.1005-6521.2014.15.010

2012-12-27

广西科学基金应用基础研究专项资助项目（合同编号：桂科基0991020）；桂林市科学研究与技术开发计划项目（20100103-3）

卢凤来（1979—），女（壮），助理研究员，硕士，主要从事植物资源开发与利用研究。

*通信作者：李典鹏，研究员，博士，从事植物活性物开发与利用研究。