HPLC 法测定生脉饮(人参方)中五味子醇甲的含量

李 斌

(黑龙江省黑河市药品检验所，黑龙江黑河164300)

生脉饮(人参方)为《中国药典2010年版一部》收录的品种，由红参、五味子、麦冬组成，有益气复脉、养阴生津的功效，其质量标准只有鉴别、检查项，无含量测定项［1］。为确保生脉饮药品质量，我们对生脉饮(人参方)的质量标准控制进行摸索，采用高效液相色谱法(HPLC)测定制剂中五味子醇甲的含量，方法如下。

1 仪器与试药

日本LC－2010AHT高效液相色谱仪，甲醇为色谱纯，五味子醇甲对照品由中国药品生物制品检定所提供(批号:110857－200709)，五批生脉饮(人参方)分别由北京同仁堂药厂提供批号为:20120322、20120324、20120326、20120921、20120923，生脉饮(人参方)五味子阴性由黑河三精药厂制备(除五味子不加，处方其他药按工艺生产)。

2 方法与结果

2.1 波长选择:取五味子醇甲对照品溶液，在紫外区200～400 nm进行扫描，确定最大吸收波长为250.1 nm。

2.2 色谱条件及专属性:色谱柱为AgilentC18(250 mm×4.6 nm);流动相为甲醇 － 水(58:42);流速 1.0 mL/min;柱温 30 ℃;检测波长 250 nm［2］。

2.3 五味子醇甲对照品溶液制备:精密称取五味子醇甲对照品12.18 mg，置50 mL量瓶中，加甲醇使溶解并稀释至刻度，精密吸取3.0 mL，置10 mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得作为对照品溶液。(制成每1 mL含0.073 mg的溶液)，即得。见图1。

2.4 供试品溶液制备:精密量取装量差异项下的本品25 mL，用乙酸乙酯振摇提取5次，30 mL/次，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇适量使溶解，转移至10 mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45 μm)滤过，作为供试品溶液。见图2。

2.5 五味子阴性溶液制备:以相同的处方比例，按生脉饮(人参方)制备工艺制备不含五味子药材的阴性样品，精密吸取此样品25 mL，按供试品溶液的制备方法制备不含五味子的阴性溶液。见图3。

2.6 线性关系考察:精密吸取五味子醇甲对照品溶液1、5、10、15、20、25 μL 在上述色谱条件下重复进样 2 次，测定峰面积值，以峰面积平均值和浓度进行回归处理，得回归方程为:Y=1948084X+5295.66，r=1.0000。线性范围在 0.073 ～1.825 μg 呈良好的线性关系。专属性:

图1 五味子醇甲对照品溶液色谱图

图2 供试品溶液色谱图

图3 五味子阴性溶液色

2.7 系统适应性:精密吸取五味子醇甲对照品溶液10 μL，重复进样5次，测定结果RSD为0.8%。

2.8 稳定性试验:取批号为20120322供试品溶液，每隔4 h进样10 μL，测定五味子醇甲峰面积值，共测定6次，测定结果 RSD 为0.9%

2.9 精密度(重复性)试验:取批号为20120322供试品溶液进行6次平行试验，测定五味子醇甲的含量，每次进样量10 μL，测定结果平均值每毫升含五味子醇甲为0.022 mg(RSD 为 0.9%)。

2.10 准确度试验:采用加样回收法，精密称取进行重复性试验的生脉饮(人参方)批号为20120322样品10 mL，精密量取3 mL五味子醇甲对照品溶液加入，按供试品制备法制备，按五味子醇甲含量测定方法进行测定，计算加样回收率，结果见表1。

表1 回收率试验结果

2.11 样品含量测定:取各供试品溶液，按上述色谱分离条件，进样10 μL，测定五味子醇甲峰面积，计算含量，结果见表2。

3 小结与讨论

生脉饮(人参方)中五味子为处方中臣药，有收敛固色、益气生津、补肾宁心的功效，临床多用于抗肝损伤、抗氧化、增强代谢、中枢镇静等，主要成分为五味子中木脂素(五味子醇甲、五味子乙素等)［3］，选择五味子醇甲进行对处方中五味子含量评价，是因为南五味子中五味子醇甲含量非常低，所以选择五味子醇甲作为含量评价，可以防止投料时南北五味子混用。对五味子中五味子醇甲进行了含量测定，可以控制生脉饮(人参方)的质量。

表2 样品测定结果 (n=2)

本实验采用高效液相色谱法测定有效成分五味子醇甲的含量，本法能达到有效分离各组分的目的，具有灵敏度高、操作简单、分离效果好、阴性无干扰等优点，试验证明五个批号生脉饮(人参方)中五味子醇甲含量均值为0.023 mg/mL，根据制剂含量方法学验证中范围规定为平均值的80%，推算生脉饮(人参方)中五味子醇甲含量应不低于0.018 mg/mL。

［1］ 国家药典委员会.中华人民共和国药典一部［S］.北京:中国科技出版社，2010:653.

［2］ 国家药典委员会.中华人民共和国药典一部［S］.北京:中国科技出版社，2010:760.

［3］ 肖培根.新编中药志第二卷［M］.北京:化学工业出版社，2002:123.