金线莲多糖口服液调节免疫功能实验研究

张赛男

（赣南医学院药学院，江西 赣州 341000）

论 著

金线莲多糖口服液调节免疫功能实验研究

张赛男

（赣南医学院药学院，江西 赣州 341000）

目的：研究金线莲多糖口服液对小鼠免疫功能的影响。方法：用不同剂量的金线莲多糖口服液对小鼠进行灌胃，测定对小鼠免疫器官、巨噬细胞吞噬功能、溶血素水平和脾淋巴细胞增殖的影响。结果：金线莲多糖口服液可明显提高小鼠脾脏指数、胸腺指数和吞噬指数，促进小鼠溶血素生成和脾淋巴细胞增殖。结论：金线莲多糖口服液有增强小鼠免疫功能的作用。

金线莲多糖口服液；小鼠；免疫功能

金线莲属多年生草本植物，民间有“药王”、“金草”之称［1］，具有广泛药用价值［2］。金线莲有许多重要药理活性的物质［3］，主要以黄酮和多糖为主，多糖类成分具有调节机体免疫［4］、抗衰老作用［5］。金线莲多糖口服液是金线莲经超高压辅助浸提，超滤纯化得到多糖的基础上，辅以柠檬酸、白砂糖、蜂蜜制成，主要成分为金线莲多糖。我们观察了金线莲多糖口服液对健康小鼠免疫功能的影响，总结如下。

1 材 料

金线莲多糖口服液制备：金线莲干品粉碎后过60目筛，超高压辅助浸提，提取液4000r/min离心20min，得多糖粗提液。粗提液经100ku超滤膜超滤分级，再经10ku的超滤膜分离纯化，冷冻干燥得到金线莲多糖粉。金线莲多糖粉按计量配置不同浓度，辅以1%蜂蜜，0.05%柠檬酸，4%白砂糖制备成金线莲多糖口服液。

实验动物：健康昆明种小鼠，福建省医学研究所实验动物中心提供，共50只，雄性，体质量为18～22g。

2 分组与方法

小鼠实验前先适应4天，并自由饮水、摄食，复查合格后将小鼠随机分为5组。以多糖含量设50、100、150、200mg/kg 4个剂量组和1个对照组，分别编号为1～5，并按20mL/（kg·d）连续经口灌胃20天，对照组给予等量的生理盐水灌胃，20天后测定相关指标。

3 指标测定

免疫器官指数测定：小鼠称重后断头处死，无菌摘出脾和胸腺称重，按［免疫器官指数（mg/g）=免疫器官质量÷小鼠体质量］公式计算脾和胸腺指数。

巨噬细胞吞噬功能测定：参照廉宜君、陈韩英等的方法进行吞噬指数测定［6］。

血清溶血素的测定：每只小鼠腹腔注射2%（v/v）SRBC悬液0.2mL，5天后采血检测血清溶血素，小鼠溶血素的量以半数溶血值（HC50）表示。

脾淋巴细胞增殖测定：测定方法参照许丹妮、许健等所用方法测定［7］。

4 数据处理

实验数据处理采用统计软件SPSS进行分析。

5 结 果

各组脾脏指数、胸腺指数和吞噬指数见表1。

表1 各组脾脏指数、胸腺指数和吞噬指数比较（±s）

表1 各组脾脏指数、胸腺指数和吞噬指数比较（±s）

注：与第5组比较，△P＜0.05、△△P＜0.01。

组别 剂量（mg/kg） 脾脏指数 胸腺指数 吞噬指数1 50 4.43±0.17 4.96±0.31 0.037±0.053 2 100 4.78±0.24△5.36±0.46△0.043±0.053△3 150 5.74±0.23△△6.23±0.32△△0.063±0.058△△4 200 6.23±0.36△△7.16±0.26△△0.081±0.041△△5 0 4.14±0.25 4.54±0.32 0.031±0.029

各组血清溶血素水平见表2。

表2 各组溶血素水平比较 （±s）

表2 各组溶血素水平比较 （±s）

注：与第5组比较，△P＜0.05，△△P＜0.01。

组别 剂量（mg/kg） 溶血素水平（HC50）1 50 112.13±13.42 2 100 149.58±23.32△150 170.96±19.35△△4 200 206.23±16.23△△5 0 103.35±10.29 3

各组脾淋巴细胞增殖指标比较见表3。

表3 各组脾淋巴细胞增殖指标比较 （±s）

表3 各组脾淋巴细胞增殖指标比较 （±s）

注：与第5组比较，△P＜0.05，△△P＜0.01。

组别 剂量（mg/kg） OD值1 50 0.343±0.012 2 100 0.399±0.023△3 150 0.436±0.011△△4 200 0.493±0.040△△5 0 0.315±0.029

6 结 论

胸腺中枢免疫器官，胸腺功能的增强可以提高细胞免疫功能。脾脏属机体外周重要的免疫器官，脾脏功能直接反映着机体免疫的强弱。巨噬细胞是消除机体内致病微生物重要的效应细胞，在机体发挥极非特异性免疫中具有及其重要的作用。试验研究表明，金线莲多糖口服液可明显提高小鼠脾脏指数、胸腺指数和吞噬指数，随着剂量的增加效果趋于明显，说明金线莲多糖口服液具有增强免疫功能的作用。

溶血素水平反映免疫反应后期抗体形成水平。淋巴细胞是机体内重要的免疫活性细胞，脾淋巴细胞增殖的强弱反映了淋巴细胞功能的高低。不同剂量金线莲多糖口服液对小鼠溶血素生成和脾淋巴细胞增殖具有促进作用，随着剂量的增加效果明显，说明金线莲多糖口服液对增强小鼠免疫功能具有一定的促进作用。

［1］ 余杰，李伟，张晓辉．金线莲多糖抗糖尿病作用的研究［J］．海峡药学，2013，25（11）：37-40．

［2］ 刘青，刘珍伶，周娟． 金线莲多糖的体外抗氧化活性［J］．华侨大学学报（自然科学版），2010，41（6）：718-720．

［3］ 赵保发，张志信．金线莲多糖提取工艺的研究［J］．云南师范大学学报（自然科学版），2008，28（4）：60-63．

［4］ 许丹妮．金线莲多糖对小鼠免疫调节作用的研究［D］．福建农林大学，2011．

［5］ 林丽清，黄丽英，郑艳洁，等．金线莲多糖的提取及清除氧自由基作用的研究［J］．福建中医学院学报，2006，16（5）：37-39．

［6］ 廉宜君，陈韩英，李炳奇，等．沙枣多糖对免疫抑制小鼠的调节作用［J］．安徽农业科学，2009，37（16）：7481-7482．

［7］ 许丹妮，许健，马玉芳，等．金线莲多糖对免疫抑制小鼠脾淋巴细胞增殖及免疫器官的影响［J］．中兽医医药杂志，2011，30（3）：15-17．

Objective：From anoectochilus extracted polysaccharide into anoectochilus polysaccharide oral liquid，to investigate the effects of oral liquid on immunologic function in mice.Methods：Perpare different measurement of anoectochilus polysaccharide oral liquid for intragastric administration，To determine the influence of the immune organ index，phagocytic function of macrophage，hemolysin level and the proliferation of the lymphocytes.Results：Anoectochilus polysaccharide oral liquid significantly increased spleen index，thymus index and phagocytic index，it also promote the formation of hemolysin and the proliferation of the lymphocytes in mice. Conclusions：Anoectochilus polysaccharide oral liquid can reinforce immune function on the mice.

Anoectochilus；Polysaccharide；Oral liquid；immunologic function

R255.99

B

1004-2814（2014）11-0987-02

2014-06-20

漳州科技计划项目（zz2012043）