米同国,黄占欣,杨 建,孟志敏,李连缺
(1.河北工程大学农学院,河北 邯郸056021;2.江苏省如东县马塘畜牧兽医站,江苏 如东226401)
鸡毒支原体(MG)是鸡和火鸡的一种慢性呼吸道传染病。病鸡以喘气、咳嗽、窦部肿胀、流鼻液和呼吸啰音为特征。病情发展缓慢、病程长,能在鸡群中蔓延,世界各国均有发生,造成幼鸡生长发育不良,母鸡产蛋量降低。近年来,该病不断增加,临床常用药物由于多年使用,已逐渐呈现出耐药现象,疗效不佳。因此,开发新型高效的动物专用抗支原体感染药物势在必行。盐酸多西环素黄芪多糖可溶性粉是由河北省石家庄江山动物药业有限公司生产,为了评价其对人工感染的鸡慢性呼吸道病的治疗效果,进行了以下疗效试验。
1.1 药品 盐酸多西环素黄芪多糖可溶性粉,为盐酸多西环素、黄芪多糖与适宜的辅料配制而成,规格为100 g∶10 g盐酸多西环素∶10 g黄芪多糖,批号:20110310,由河北省石家庄江山动物药业有限公司生产。硫氰酸红霉素可溶性粉:规格为100 g∶5克硫氰酸红霉素,批号:20110512,由河北省石家庄某动物药品厂生产。
1.2 菌种 鸡毒支原体MG S6,购自中国兽医药品监察所。
1.3 试验动物 15日龄健康AA肉鸡300只,体重均匀、血清学检测无抗体,由河北省石家庄江山种禽公司提供。常规饲养,每笼1只,自由采食饮水,空白对照组和安全对照组分别与其他组分室隔离饲养。
1.4 培养基 KM2培养基:用于MG S6的培养,购自中国兽医药品监察所。血平板:按常规方法制备。
1.5 盐酸多西环素黄芪多糖可溶性粉对人工诱发鸡慢性呼吸道病的疗效
1.5.1 试验动物分组与处理 将300只试验雏鸡随机分为6组,盐酸多西环素黄芪多糖可溶性粉分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组,药物对照组为硫氰酸红霉素可溶性粉组,阳性对照组为感染不给药组,空白对照组为健康对照组。分组情况及处理详见表1。
表1 试验鸡分组与处理
1.5.2 感染与治疗 (1)人工感染:制备MG S6菌液,经测定菌液浓度为3.5×109CFU/mL。除空白对照组外,各试验组鸡左右胸气囊各注射CFU为3.5×109/mL的MG S6菌液0.4mL,滴鼻0.5mL。人工感染后判定鸡群发病指标:①临床症状;②气囊、气管、肺的剖检病理变化和病理组织学检查;③平均增重;④死亡率;⑤病原分离、鉴定;(2)治疗与观察:接种后试验鸡出现呼吸道症状按表1方式给药,连续给药5 d,每日换水1次。观察期为初次给药当日至第20天,每日观察鸡的各种临床表现和死亡鸡的病理剖检变化。试验前和结束时,分别对鸡称重、气囊病变记分和血清抗体检测。
1.5.3 药效评价指标[1-3](1)死亡率:凡在试验期间试验鸡出现鸡慢性呼吸道病典型症状并死亡,剖检时有典型病变并分离培养出鸡败血支原体,则判断为感染死亡,计算死亡率;(2)有效率:各组症状减轻及症状消失动物数所占百分比;(3)治愈率:经用药后精神、采食、饮水恢复正常,呼吸道症状消失,20 d后剖检无明显病变占试验鸡数的百分比;(4)相对增重率:根据试验开始及结束时每只鸡的体重,计算每组鸡的平均增重,并计算相对增重率;(5)气囊损伤减少率:剖检后凡出现气囊膜增厚、浑浊,内有奶酪样分泌物者均属气囊病变,对气囊的损伤度按Lam等方法作病变等级记分;0分:无病变;2分:气囊膜混浊;4分:气囊膜变厚;6分:一个气囊内含有大量奶酪样黏稠渗出物;8分:多个气囊内发现大量渗出物。根据平均每只鸡的分数计算气囊损伤减少率。按下列公式计算:气囊损伤减少率=(阳性对照鸡平均气囊损伤分值-试验鸡平均气囊损伤分值)÷阳性对照鸡平均气囊损伤分值×100%;(6)抗体反应阳性率:测定鸡血清中鸡毒支原体抗体,计算抗体反应阳性率。
1.5.4 数据分析 所得试验数据中,对增重指标进行t检验,其余指标均进行卡方检验。
2.1 病理模型复制 鸡群接种2 d后陆续出现症状。随着病情的加重,鸡表现出典型的鸡毒支原体病症状。攻毒后第6天开始出现死亡,剖检死亡鸡可见典型病变;对死亡鸡进行组织学检查可见典型组织学变化;从感染鸡的喉头、气管和肺脏中分离出微生物,经生物学特性鉴定符合MG的生物学特性;对感染7 d后鸡,采血进行鸡毒支原体平板凝集试验,结果呈阳性。空白对照组鸡临床表现正常,剖检无肉眼可见病变。表明该试验人工感染成功,符合试验需要。
2.2 药物对人工感染鸡的治疗效果和增重情况结果见表2。
经生物统计分析表2的治疗结果,各用药组与阳性对照组比较,均能显著(P<0.05)降低雏鸡由于鸡毒支原体感染引起的死亡。盐酸多西环素黄芪多糖可溶性粉各剂量组与药物对照组比较,有效率:Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组与之差异皆显著(P<0.05),分别提高10%、12%、12%;治愈率:Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组与之差异皆显著(P<0.05),分别提高16%、18%、18%。
表2 药物对感染鸡的治疗效果及增重情况
用生物统计方法分析表2的增重结果,各用药组鸡的平均增重均低于空白对照组;各用药组与阳性对照组相比较,各用药组均能极显著地(P<0.01)提高鸡的相对增重率;而盐酸多西环素黄芪多糖可溶性粉各剂量组与药物对照组相比较,Ⅱ、Ⅲ组与之差异皆显著(P<0.05),分别提高11.41%、12.94%;Ⅰ组效果比Ⅱ、Ⅲ组差些,与药物对照组相比,仅提高了5.35%。
2.3 各组试验鸡气囊损伤度比较和鸡毒支原体检测结果 见表3。
表3 各组试验鸡气囊损伤度比较和鸡毒支原体抗体检测
用生物统计方法分析表3的鸡气囊损伤度减少率,各用药组极显著高于阳性对照组(P<0.01),盐酸多西环素黄芪多糖可溶性粉各剂量组与药物对照组相比较,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组与之差异极显著(P<0.01),分别提高20.00%、24.29%、24.29%。
用生物统计方法分析表3的鸡毒支原体抗体检测率,与阳性对照组比较,各用药组在降低鸡体内的鸡毒支原体抗体方面均有较好的效果,盐酸多西环素黄芪多糖可溶性粉各剂量组与药物对照组相比较,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组与之差异极显著(P<0.01),分别降低30%、40%、40%。
试验结果表明,盐酸多西环素黄芪多糖可溶性粉对鸡慢性呼吸道病具有很好的治疗效果,用药后能明显提高感染鸡的存活率、治愈率及平均增重,显著降低气囊的病理损伤程度及抗体检出率,根据药效评价指标的综合判断,建议盐酸多西环素黄芪多糖可溶性粉在饮水中的混合剂量为1.0 g/L水,连用5 d。
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