卡介菌多糖核酸治疗白癜风68例临床疗效及对免疫调节作用观察

瞿理华

（醴陵市中医院，湖南醴陵412200）

卡介菌多糖核酸治疗白癜风68例临床疗效及对免疫调节作用观察

瞿理华

（醴陵市中医院，湖南醴陵412200）

目的观察卡介菌多糖核酸治疗白癜风的临床疗效。方法将68例白癜风患者随机分为两组，治疗组36例肌注卡介菌多糖核酸注射液联合外用30%补骨脂酊，对照组32例单纯外用30%补骨脂酊，给药3个月。分别用流式细胞术和ELISA方法检测卡介苗多糖核酸治疗白癜风前后患者外周血T细胞亚群、IL－10和IFN－γ的水平。结果治疗组总有效率为91.7%，对照组总有效率59.4%，治疗组显著优于对照组（P＜0.01）。卡介菌多糖核酸治疗后，患者CD4＋百分比及CD4＋／CD8＋比值较治疗前升高，CD8＋百分比降低，IFN－γ水平升高（P＜ 0.05），IL－10水平下降（P＜0.05）。结论卡介菌多糖核酸可显著改善患者细胞免疫功能，能有效治疗白癜风。

卡介菌多糖核酸；白癜风；临床疗效；免疫调节

白癜风是一种获得性的皮肤色素异常，通常在儿童期或青年期发病，大约一半的病例在20岁以前发病，病因不明，其发病机理多与机体免疫紊乱有关，目前认为Th1／Th2失衡是引起细胞免疫异常的关键，也是造成免疫功能低下、自身免疫性疾病及变态反应的主要原因［1～3］。多年来的研究表明，卡介苗（BCG）及卡介菌多糖核酸提取物（BCG－PSN）可特异性增强机体的Th1型细胞免疫反应，抑制Th2型细胞免疫反应，进而维持两者之间的平衡［4］。2011年4月～2013年2月，我院采用卡介菌多糖核酸（商品名：斯奇康，湖南斯奇生物制药有限公司生产）治疗白癜风68例，取得一定疗效，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 68例患者均为2011年4月～2013年2月我院门诊确诊的白癜风患者，按就诊顺序将患者分为两组：治疗组36例，男19例，女17例；病程3月～15年，平均7.3年；年龄12～50岁，平均32.8岁。对照组32例，男16例，女16例；病程2月～18年，平均7.1年；年龄14～48岁，平均35.9岁。两组的性别、年龄构成比、病程差异无显著性（P＞0.05），具有可比性，全部患者均无自身免疫性疾病及其他重大疾病，近1个月内未经治疗。入组前、后检查血、尿常规及肝肾功能均正常。

1.2 主要试剂 鼠抗人CD3－Per－CP／CD8－PE／CD4－FITC抗体、鼠免疫球蛋白IgG和溶血素购于美国BD公司。植物血凝素PHA－M和细胞培养液RPMI－1640购自Sigma公司，抗IL－10及IFN－γ抗体购于北京合富公司。

1.3 诊断标准 参照2003年中国中西医结合皮肤性病学会色素病学组《白癜风的临床分型及疗效标准》［5］及《临床皮肤病学》［6］制定诊断标准。

1.4 方法

1.4.1 治疗方法 治疗组：肌注卡介菌多糖核酸（湖南斯奇生物制药有限公司生产），每次2 mL，隔日一次，每月随诊一次，连续肌注3个月。同时外用30%补骨脂酊，早晚患处各用1次。对照组：外用30%补骨脂酊，早晚患处各用1次。

1.4.2 外周血单一核细胞（PBMC）的分离与培养 所有患者取外周静脉血，用淋巴细胞分离液分离单一核细胞。用含10%血清的RPMI－1640培养液调细胞浓度至1×106·mL－1，接种于24孔板，每孔1 mL。细胞悬液加入PHA终浓度为100μg·mL－1，37℃，5%二氧化碳孵箱内培养。

1.4.3 T细胞亚群的检测 采用流式细胞术，按照试剂盒说明书操作步骤进行。

1.4.4 IL－10和IFN－γ的检测 PBMC体外培养48 h后，收集上清液，用ELISA方法按照试剂盒说明书分别测定IL－10和IFN－γ的含量。

1.4.5 疗效判定 参照2003年中国中西医结合皮肤性病学会色素病学组《白癜风的临床分型及疗效标准》制定。痊愈：白斑全部消失，恢复正常肤色；显效：恢复正常肤色的皮损面积≥50%；有效：恢复正常肤色的皮损面积＜50%≥10%；无效：恢复正常肤色的皮损面积＜10%或无改变。总有效率＝（痊愈例数＋显效例数＋有效例数）／完成例数× 100%，显效率 ＝（痊愈例数 ＋显效例数）／完成例数 × 100%，痊愈率＝痊愈例数／完成例数×100%。

2 结果

2.1 临床疗效 临床疗效结果见表1，治疗组痊愈率为41.7%，总有效率为91.7%；对照组痊愈率为15.6%，总有效率为59.4%，两组总有效率比较差异有统计学意义（P＜0.01）。

2.2 两组患者治疗前后T淋巴细胞亚群变化的比较见表2

治疗组治疗后CD4＋百分比及CD4＋／CD8＋比值升高，CD8＋百分比降低，与治疗前比较，差异有显著性（P＜0.05）。而对照组治疗前后CD4＋，CD8＋及CD4＋／CD8＋虽有变化，但差异无显著性。

2.3 两组患者治疗前后IL－10和IFN－γ水平的比较见表3 治疗组治疗后IL－10水平降低，IFN－γ升高，均与治疗前比较差异有显著性（P＜0.05）。对照组治疗前后IFN－γ和IL－10水平比较差异无显著性。

表1 两组白癜风治疗效果比较（例，%）

表2 两组患者治疗前后T淋巴细胞亚群变化的比较

表3 两组患者治疗前后IL－10和IFN－γ水平的比较

2.4 不良反应 治疗组有部分患者有注射部位疼痛，但不影响治疗，且迅速自行消退。

3 讨论

白癜风是一种常见难治的色素脱失性皮肤粘膜病，发病机制目前研究表明可能有四种：自身免疫、神经体液因素、自身细胞毒性和黑素细胞自毁学说［7］。已有研究发现［8］白癜风的细胞免疫学证据主要表现在外周血CD4＋细胞下降，而皮损局部浸润却以CD8＋细胞为主。T淋巴细胞亚群的比例能较客观地反映机体的细胞免疫水平，其中CD4＋／CD8＋比值称为免疫调节指数。CD4＋的升高将引起机体免疫调节指数的上升，从而改善患者的细胞免疫状态。CD4＋T辅助细胞根据功能的不同分为两种亚型（TH1和TH2）。TH1细胞产生IFN－γ和IL－2等，主要介导细胞免疫应答，在抗感染、移植排斥反应和自身免疫病的过程中起重要作用；而TH2细胞产生IL4、IL－6及IL－10等，主要介导体液免疫，在过敏反应中起主导作用。

斯奇康注射液为一种新型的免疫调节剂，由核酸及多糖等多种免疫活性物质制成，它是在卡介苗素基础上，通过改进工艺，解决了其他免疫调节剂大分子蛋白清除不全等缺点，使斯奇康注射液更易于吸收，减少了过敏反应，副作用更小。其主要作用机理是通过增强机体内的细胞免疫，调节体液免疫，增强巨噬细胞的吞噬能力，稳定肥大细胞，减少其脱颗粒所释放的活性物质以提高机体的免疫力。尤其对T细胞的致敏，产生细胞介导的传染免疫，致敏T细胞在抗原的特异性刺激下分化，增殖并合成释放出系列淋巴因子，由于淋巴因子的综合协同作用，从而发挥细胞免疫功能，引起特异性抗体生成，达到对病变组织的排斥目的。

本研究显示，白癜风患者使用卡介菌多糖核酸后，外周血CD4＋百分比及CD4＋／CD8＋比值升高，CD8＋百分比降低，IFN－γ水平升高，IL－10水平降低。提示卡介菌多糖核酸可引起机体免疫调节指数的上升；并通过诱导IFN－γ的产生，使TH1／TH2平衡向TH1方向转换，TH1细胞优势相对增强，有利于细胞免疫功能的改善。

本文应用卡介菌多糖核酸肌注联合补骨脂酊治疗白癜风，治疗组总有效率为91.7%，对照组总有效率59.4%，治疗组疗效明显优于对照组，且安全性高，表明卡介菌多糖核酸可显著改善患者细胞免疫功能，能有效治疗白癜风，值得临床进一步推广使用。

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Study on immunity modulation and clinical efficacy in treating 68 vitiligo patientsw ith polysaccharide nucleic acid fraction of Bacillus Calmette Guerin

QU Li-hua
（Liling Hospital of Traditional Chinese Medicine，Liling 412200，China）

ObjectiveTo observe the curative effectof polysaccharide nucleic acid fraction of Bacillus Calmette Guerin（BCG－PSN）to cure vitiligo.Methods68 vitiligo patients were randomLy divided into two groups.Treatment group was given BCG－PSN and Buguzhi Tincture，control group was only given Buguzhi Tincture，the course of treatmentwas 3 month.The level of T－lymphocyte sub－populations，IL－10and IFN－γin the peripheral blood of all patientsweremeasured by flow cytometry and ELISA methods before and after treatmentwith BCG－PSN.ResultsThe total effective rate of treatment group was 91.7%.The total effective rate of control group was 59.4%，the curative effect of treatment group was significantly better than control group（P＜0.01）.After treating with BCG－PSN，the percentage of CD4＋，CD4＋／CD8＋ratio，the level of IFN－γwere significantly increased，the level of IL－10 and the percentage of CD8＋was decreased compared with those before treatment（P＜0.05）.ConclusionBCG－PSN can markedly improve cellular immunity function and effectively cure vitiligo.

Polysaccharide nucleic acid fraction of Bacillus Calmette Guerin（BCG－PSN）；Vitiligo；Clinical efficacy；immunitymodulation

R969.4

：A

2095－5375（2014）03－0182－003

瞿理华，女，主管药师，研究方向：医院药房管理及新药研究开发，E－mail：16945548＠qq.com