重组禽流感病毒灭活疫苗（H5N1亚型、Re-6株）在林下放养鸡群中的免疫效价跟踪测定

蓝养金

（1.龙岩市新罗区动物疫病预防控制中心福建龙岩364000；2.龙岩市农产品质量安全检验检测中心福建龙岩364000）

重组禽流感病毒灭活疫苗（H5N1亚型、Re-6株）在林下放养鸡群中的免疫效价跟踪测定

俞友河1邬良贤2蓝养金2

（1.龙岩市新罗区动物疫病预防控制中心福建龙岩364000；2.龙岩市农产品质量安全检验检测中心福建龙岩364000）

用血凝与血凝抑制试验方法对林下放养鸡群注射重组禽流感病毒灭活疫苗（H5N1亚型、Re-6株）后的抗体效价进行跟踪检测，结果表明：（1）经20 d后能获得较高的免疫效价保护，在4～5周时获得最高值，而后开始以每2周4个百分点的速率下降；（2）禽流感二免加强免疫后不能在2周内使免疫效价提高，但在1个月后能重新获得较高的免疫效价，并保持比较均衡的状态。建议对种禽场所供禽苗实行强制母源抗体检测，以科学确立首次免疫时间。

禽流感抗体效价放养鸡群

近年来，随着人们生活水平的提高，优质肉鸡的市场需求量越来越大，家禽养殖从业者为适应市场需求，创造出了种养结合、充分利用空间和自然条件的果园养鸡、林下养鸡、竹山养鸡模式。为了指导、总结在自然环境下规模放养鸡群的生物安全，2013年在龙岩市新罗区白砂镇选择了一户4 000羽饲养规模的林下放牧鸡群，进行重组禽流感病毒灭活疫苗（H5N1亚型、Re-6株）的免疫效价跟踪测定。

1 鸡场基本情况

该养殖户从事养鸡多年，具有一定的管理经验和诊病用药知识，存养规模4 000羽。该场建在山坡树林下，与村庄和主要交通道路较远，自然隔离条件较好，但林中常年均有野鸟，近三年生产经营正常。该场的免疫程序为：1日龄接种马立克氏病疫苗、11日龄接种法氏囊病疫苗、18日龄接种新-支二联苗、23日龄进行法氏囊病疫苗二免、27日龄接种禽流感疫苗、33日龄进行新-支二联苗二免、65日龄肌注新城疫Ⅰ系疫苗、75日龄肌注禽霍乱疫苗、95日龄进行禽流感疫苗二免。

2 疫苗来源

疫苗为政府统一采购的哈尔滨维科生物技术开发公司生产的重组禽流感病毒灭活疫苗（H5N1亚型、Re-6株），生产批号：2012048，生产日期：20121114，有效期12个月。其他疫苗为业主从市场采购。

3 检测方法

随机抽取鸡只采血，待检血样经当天离心后立即用血凝与血凝抑制试验方法检测。检测试剂为哈尔滨维科生物技术开发公司生产，生产批号：2012002，生产日期：20120605，有效期24个月。红细胞采自自备的未接种任何疫苗的公鸡，现配现用。

4 结果与分析

放养鸡群禽流感免疫效价测定结果见表1。

1）1日龄血样检测结果：免疫效价≥1∶16的有12份，占60.0%，表明该批鸡的母源抗体水平较低。

2）14日龄和32日龄的检测结果：免疫效价≥1∶16的分别占检测样品的27.5%和6.0%，表明该批鸡处于高度风险状态。

3）47日龄检测结果：免疫效价≥1∶16的占94.0%，表明该批鸡已经获得理想的免疫保护效价。62日龄、77日龄、92日龄的检测结果免疫效价≥1∶16的占比分别为98.0%、94.0%、90.0%，表明该批鸡保持高滴度的免疫抗体效价。

4）110日龄的检测结果：免疫效价≥1∶16占比为86.0%，表明禽流感二免2周后仍没有提高免疫效价。

5）125日龄和143日龄的检测结果：免疫效价≥1∶16的占比均为94.0%，表明禽流感二免使得抗体免疫效价维持在较高和均衡的水平。

5 结论与建议

1）该次免疫效价跟踪检测的结论是：（1）规模化林下放养鸡群在1月龄左右接种重组禽流感病毒灭活疫苗（H5N1亚型、Re-6株），经20 d后能获得较高的免疫效价，约4周时达最高值，之后以每2周 4个百分点的速率下降。（2）禽流感二免加强免疫后不能在2周内使免疫效价提高，但在1个月后能重新获得较高的免疫效价，并保持比较均衡的状态。（3）在母源抗体较低的情况下，1月龄左右接种禽流感疫苗，在产生有效免疫抗体前有比较长时间的感染野毒风险（约1个月）。

2）该次免疫效价跟踪检测的1日龄血样偏少，是由于采血样需剪断鸡颈部、畜主考虑经济效益所致。免疫程序也是畜主自行制定。该批次鸡于150日龄后销售，约10 d售完。

3）建议畜主以禽苗的母源抗体水平来确定禽流感的首免时间。鉴于目前广大家禽饲养者的条件所限，每批苗种进行母源抗体检测不现实，建议种禽场和动物防疫主管部门应制定禽苗中禽流感母源抗体水平强制检测制度，以便真正使禽流感的强制免疫制度达到预期效果。

表1 放养鸡群禽流感免疫效价测定情况

本刊投稿特别提示

根据国家新闻出版广电总局关于学术期刊出版的新精神及本刊主管、主办单位的新要求，自2014年第4期（2014年7月）起，本刊调查研究、专论综述方面的文章要求题名、作者、工作单位、摘要、关键词有中英文对照；中英文关键词3～8个，英文摘要、关键词内容必须与中文对应，中英文摘要必须用第三人称撰写，用适于摘要的语态和时态，符合英语的语法规范。凡市级以上自然科学基金等资助的论文，请注明基金项目名称和编号。生产经验、临床资料方面的论文也要求有题名、作者、工作单位、摘要、关键词，但暂可不附英文对照。已投稿但不符合以上要求的，请作者及时补充、整理后重新发送。否则稿件不予送审。

我们将对所有稿件进行“重复率”检测与分析，疑似学术不端的稿件将不予送审，作者可在投稿后定期或不定期直接向编辑部咨询（0591-87807454）。请作者务必在稿件中注明联系电话（或手机）、详细通信地址、邮编，否则可能影响审稿、稿件修改、期刊寄送等。

（本刊编辑部）

The tracking detection of antibody titers from recombinant inactivated vaccine(Subtype H5N1,Re-6 Strain) in stocking chickens in the forest

Yu Youhe1Wu Liangxian2Lan Yangjin2
(1.Xinluo District Animal Disease Control Center,Longyan City 364000; 2.Longyan Quality inspection of agricultural products Monitoring Center,Longyan City 364000)

Through HA and HI,antibody titers from Recombinant Inactivated Vaccine(Subtype H5N1,Re-6 Strain)in stocking chickens in the forest were tracked and tested.The results demonstrated that∶(1)High titles of protection was obtained after 20 days post immune,and peaked in 4-5 weeks post immune;And then began to decline at a rate of 4 percentage points every 2 weeks.(2)The second vaccination cannot enhance the antibody titer in 2 weeks post immune,while titers can regain higher a month later and keep in a steady state.The mandatory testing of maternal antibodies of squab avian in breeding poultry farm is recommended to determine the first immune time scientifically.

AIV Antibody titers Stocking chicken

A

1003-4331（2014）04-0017-02