HPLC法测定黄菊消银丸中盐酸小檗碱的含量

李晓燕

HPLC法测定黄菊消银丸中盐酸小檗碱的含量

李晓燕

（河南省商丘市第一人民医院，商丘476000）

目的建立黄菊消银丸中盐酸小檗碱的含量测定方法。方法采用HPLC法，色谱条件为：色谱柱：Eclipse XDB-C18；流动相：乙腈-0.05mol／l磷酸二氢钾溶液（50∶50）（每100ml中加十二烷基硫酸钠0.4g，再以磷酸调p H为4.0）；流速：1.0 ml·min-1；检测波长：345nm。结果盐酸小檗碱进样量在0.09418～1.8836μg范围内线性关系良好（r=0.9993），平均回收率为98.59%，RSD =0.98%（n=6）。结论本方法操作简便，专属性强，结果准确，可用于黄菊消银丸的质量控制。

盐酸小檗碱；高效液相色谱法；黄菊消银丸

黄菊消银丸，是由黄连、金银花、野菊花、蒲公英等药材加工制成的复方制剂，具有清热利胆，凉血解毒之功效，用于肝胆湿热及血瘀引起的银屑病，症见皮肤瘙痒、起屑等。原标准中仅有显微鉴别，没有定量指标，本文以方中君药黄连的有效成分盐酸小檗碱为指标，建立了黄菊消银丸中盐酸小檗碱的高效液相测定方法，操作简便，省时，准确，可作为黄菊消银丸的质量控制方法。

1 仪器与试药

Thermo U3000型高效液相色谱仪，AUW-220D电子分析天平，5210DT超声处理器；盐酸小檗碱对照品（中国药品生物制品检定所，批号：110713-200911）；乙腈为色谱纯，水为重蒸馏水，其余试剂为分析纯。

2 方法与结果

2.1色谱条件色谱柱：Eclipse XDB-C18色谱柱（4.6× 150mm，5um）；流动相：乙腈-0.05mol／l磷酸二氢钾溶液（50∶50）（每100ml中加十二烷基硫酸钠0.4g，再以磷酸调p H为4.0）为流动相［1］；流速1.0ml·min-1；检测波长345nm；进样量10μl。

2.2线性关系考察取盐酸小檗碱对照品约10mg，精密称定，置100ml量瓶中，加甲醇适量，振摇使完全溶解后，稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。按照“2.1”项色谱条件，分别进样1、3、5、10、12、15、18、20μl，记录盐酸小檗碱峰面积值，以峰面积积分值（Y）对对照品进样量（X）进行线性回归，得回归方程：Y=627.38X+0.16r =0.9993。结果表明，盐酸小檗碱对照品进样量在0.09418～1.8836μg范围内与峰面积值呈良好的线性关系。

2.3对照品溶液的制备取盐酸小檗碱对照品约10mg，精密称定，置100ml量瓶中，加甲醇适量，振摇使完全溶解后，稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。

2.4供试品溶液及阴性对照溶液的制备取本品约8.0g，研细，精密称定，置50ml量瓶中，加入甲醇-盐酸（100∶1）的混合液适量，超声处理30分钟，放冷，加甲醇-盐酸（100∶1）的混合液至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液。另取缺黄连的其他味药按处方工艺制成阴性制剂，按上述方法制备阴性对照溶液。

2.5干扰试验取上述3种溶液，按照上述色谱条件，分别注入高效液相色谱仪，进样测定，记录色谱图，结果表明供试品溶液在与对照品溶液色谱相应的位置上，有相应的色谱峰，而阴性对照溶液在此保留时间无干扰。色谱图见图1。

图1 高效液相色谱图

2.6精密度试验取同一对照品溶液，重复进样5次，每次10μl，记录峰面积，RSD=1.02%（n=5），表明精密度良好。

2.7稳定性试验取同一对照品溶液，分别在0、1、2、3、4、5、6h进样测定，RSD=1.05%，供试品溶液在6小时内峰面积基本稳定。

2.8加样回收率试验称取6份已测得盐酸小檗碱含量的供试品（含量为8.33ug／g），每份约4.0g，精密称定，置50m1量瓶中，另分别精密加入对照品溶液（浓度为0.03255mg／m1）1.00m1，制备成供试品溶液，分别测定盐酸小檗碱的含量，结果见表1。

表1 加样回收率试验结果（n，%）

2.9样品测定取3批样品，按“2.4”项下方法制备供试品溶液，各进样10μl，按外标法计算盐酸小檗碱的含量，结果见表2。

表2 3批样品中盐酸小檗碱的含量（μg／g）

3 讨论

盐酸小檗碱是黄连的有效成分，本文建立的高效液相色谱法测定盐酸小檗碱的含量，该方法操作简便，杂质对测定无干扰，重复性好，对控制该制剂的内在质量具有重要意义。

本文参考有关文献［2-3］，针对本制剂的制备工艺及辅料的特性和影响因素，通过试验证明，超声处理30分钟提取较为完全，且操作简便快捷，故采用超声提取。

［1］国家药典委员会中国药典2010年版.一部.［S］.北京：中国医药科技出版社，2009：285.

［2］刘钰华，梁健钦.HPLC测定胃安胶囊中盐酸小檗碱的含量［J］.华夏医学，2010，23（2）：155-157.

［3］谢学渊，唐慧慧，狄亚敏.HPLC法测定前列通颗粒中盐酸小檗碱的含量［J］.解放军药学学报，2012，28（02）：161-163.（本文编辑：苏 玲 本文校对：柳诗全 收稿日期：2013-10-25）

胃病患者的几款药膳

山药百合大枣粥将山药90克，百合40克，大枣15枚、薏苡仁30克及大米适量共煮粥。每日食2次。山药具有补脾和胃之功能；百合清热润燥；大枣、薏苡仁健脾和胃，诸物合用具有滋阴养胃、清热润燥的作用。本粥特别适合中医辨证属胃阴不足者，患者常表现为胃脘隐痛、饥不欲食、口干咽燥、形体消瘦、舌红少苔、脉细。

砂仁羊肉汤将砂仁10克，白胡椒3克，生姜数片及适量羊肉共煮汤，熟后放入适量食盐。每周3次。其中砂仁温中化湿、行气和中；白胡椒、生姜辛温理气；羊肉辛温补虚、养胃散寒。砂仁羊肉汤具有健脾散寒、温胃止痛的作用，特别适合胃病中医辨证属脾胃虚寒者，患者常表现为胃脘隐痛、喜暖喜按、泛吐清水、四肢不温、神疲乏力、舌淡苔白、脉细。

木耳炒肉片将黑木耳干品15克用温水发好、洗净，猪瘦肉60克切片放入油锅中炒两分钟后，加入发好的黑木耳同炒，再加食盐适量，清汤少许，焖烧5分钟即可食。每周3次。其中黑木耳益胃滋肾、调理中气，与猪瘦肉合用，可补益脾胃、调理中气。特别适合因为情志不畅所致的胃病，中医辨证属肝气犯胃者，患者常表现为胃脘胀满、疼痛连及胸胁、嗳气反酸，每因情志因素而发，苔薄白、脉弦。

——中国中医药报

Determination of Berberine Hydrochloride in Huangjuxiaoyin pill by HPLC

Li Xiaoyan
（Shangqiushi the first people's hospital shangqiushi 476000）

ObjectiveTo set up a method to determination of berberine hydrochloride in Huangjuxiaoyin Pill.MethodThe content of berberine hydrochloride determined by HPLC.The chromatographic system consisted of C18 column，using acetonitrile-0.05mol／l potassium dihydrogen phosphate（50：50）（Each 100ml plus twelve sodium dodecyl sulfate 0.4g，and then the phosphoric acid adjust p H to 4）as mobile phase.The content was detected at a waveleng of 345 nm，the flow rate was 1.0 ml·min-1.Resultshe berberine hydrochloride have a good tincar rolatim in the range of 0.09418～1.8836μg（r=0.9993），the average recovery was 98.59%and RSD=0.98%（n=6）.ConclusionThe established method is simple，sensitive and accuracy.It can be used for quality control of Huangjuxiaoyin Pill.

Berberine hydrochloride；HPLC；Huangjuxiaoyin Pill

10.3969／j.issn.1672-2779.2014.04.094

：1672-2779（2014）-04-0150-02