金桂与丹桂花茶抗氧化活性的比较

金 亮，田丹青，李小白，李 梅

（1.浙江省萧山棉麻研究所浙江省农业科学院花卉研究开发中心，浙江杭州 311202；2.浙江省农业科学院园艺研究所，浙江杭州 310021；3.浙江大学农生环分析测试中心，浙江杭州 310058）

金桂与丹桂花茶抗氧化活性的比较

金 亮1，田丹青1，李小白2，李 梅3

（1.浙江省萧山棉麻研究所浙江省农业科学院花卉研究开发中心，浙江杭州 311202；2.浙江省农业科学院园艺研究所，浙江杭州 310021；3.浙江大学农生环分析测试中心，浙江杭州 310058）

选用金桂、丹桂花茶为研究对象，并以西湖龙井、祁门红茶为参照，比较研究其抗氧化活性。结果表明，不同茶的DPPH·、ABTS·+清除活性以及铁还原氧化能力（FRAP）、总酚含量一般都存在极显著差异（P＜0.01）。丹桂花茶具有极显著高于金桂花茶的抗氧化活性和总酚含量。除ABTS·+清除活性外，丹桂花茶具有超过祁门红茶的DPPH·清除活性和总酚含量，而其FRAP值也与祁门红茶相当。

桂花；金桂；丹桂；抗氧化活性

桂花（Osmanthus fragrans）属木犀科木犀属植物，原产于我国西南部，是著名的观赏及芳香植物，在长江中下游地区普遍栽培。我国拥有悠久的食用桂花的传统，桂花可用于制酒、制茶、制作糕点、饮料等［1］。桂花品种繁多，根据花色主要可分为金桂（Osmanthus fragrans var.thunbergii）、银桂（O.fragrans var.latifolius）和丹桂（O. fragrans var.aurantiacus）3种［2］。金桂花色橙黄，丹桂花色橙红，是主要的桂花茶制作原料。近年来，以花为茶受到广泛欢迎，而评价和筛选具有强抗氧化活性的天然资源已成为生物学、医学和食品科学研究的热点［3］。本研究采用体外抗氧化模型试验（即DPPH·、ABTS·+清除活性及铁还原氧化能力测定），选取金桂、丹桂花茶为材料，并以绿茶西湖龙井、祁门红茶为参照，探讨其抗氧化活性和总酚含量，为进一步开发、研究不同桂花的保健价值提供一定的技术依据。

1 材料和方法

1.1 材料与试剂

收集金桂、丹桂制成的桂花茶各500 g，烘干备用，同时收集西湖龙井、祁门红茶茶叶。

试剂有2，2-联苯基-1-苦基肼基（DPPH）、2，2'-联氨-双（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二胺盐（ABTS）、过硫酸钾、奎诺二甲基丙烯酸酯（Trolox）、福林酚、2，4，6-三吡啶三吖嗪（TPTZ）、三氯化铁，购自Sigma-Aldrich公司；碳酸钠、没食子酸购自阿拉丁试剂公司。其他化学试剂均为分析纯及以上级。

1.2 茶汤制备

将各样品研磨成粉，40目（0.42 mm）筛过滤。取各样品1.00 g置于玻璃瓶中，加入250 m L煮沸的超纯水，持续震荡浸泡1 h后，冷却过滤待用。

1.3 抗氧化活性测定

采用DPPH、ABTS和FRAP（ferric reducing antioxidant power）3种方法测定抗氧化活性。

DPPH法参照Wojdylo等［4］的DPPH·清除活性方法，略作修改来测定茶汤的抗氧化活性。取甲醇稀释的DPPH溶液（吸光率为0.700±0.002）4.0 m L，加入0.1 m L适当稀释的茶汤，充分混合，室温下反应6 h，测517 nm处的吸光值（D517）。以Trolox为标样绘制标准曲线。测量结果以每100 g样品清除DPPH·能力相当于Trolox（Trolox equivalent antioxidant capacity，TEAC）的毫摩尔数（mmol TEAC·100 g-1）表示。

ABTS法茶汤的总抗氧化能力参照ABTS法［5］测定，略作修改。试验前按体积比2∶1将7 mmol· L-1ABTS母液与2.45 mmol·L-1过硫酸钾溶液混合，室温下避光静置过夜，反应得到ABTS·+溶液。将上述溶液用适量80%乙醇稀释至D734= 0.700±0.002。取稀释后的ABTS·+溶液4.0 m L，加入0.1 m L适当稀释的茶汤混合，室温下反应6 min，立刻测D734值。以Trolox为标样绘制标准曲线。结果以每100 g样品清除ABTS·+自由基能力相当于Trolox的毫摩尔数（mmol TEAC· 100 g-1）表示。

FRAP法［6］测定抗氧化活性。取50μL适当稀释的茶汤，加入1.0 mL TPTZ工作液（由0.3 mol· L-1醋酸盐缓冲液，10 mmol·L-1TPTZ溶液，20 mmol·L-1FeCl3溶液按体积比10∶1∶1组成），混匀后37℃下反应30 min，测定D593值。使用不同浓度的Trolox测定标准曲线。样品抗氧化活性（FRAP值）以达到同样吸光度所需的Trolox的毫摩尔数（mmol TEAC·100 g-1）表示。

1.4 总酚含量的测定

总酚含量采用福林酚比色（Folin-Ciocalteu）法测定［7］，略作修改。在5 m L离心管中加入各样品茶汤0.1 mL，再加入0.5 mol·L-1福林酚试剂0.5 mL，充分震荡混合后加入1.0 mL饱和碳酸钠溶液（75 g· L-1），室温下避光静置2 h，测D760值。标准曲线采用没食子酸（5～100μg·mL-1）为标样绘制。测量结果以每100 g茶叶的没食子酸当量（gallic acid equivalent，GAE）计算（g GAE·100 g-1）。

1.5 数据分析

使用DPS进行方差分析。对于有显著差异的各处理平均值用最小显著检测差异显著性。本文所有试验均重复3次。

2 结果与分析

2.1 抗氧化活性

由图1可看出，4种茶的DPPH·的清除活性排序为西湖龙井＞丹桂＞金桂＞祁门红茶。丹桂花茶的DPPH·清除活性极显著低于西湖龙井，但极显著高于祁门红茶及金桂（P＜0.01）。金桂的DPPH·的清除活性与祁门红茶差异不显著。

图1 不同种类茶叶抗氧化活性和总酚含量比较

4种茶对ABTS·的清除活性具有极显著性差异。ABTS·+的清除活性排序为西湖龙井＞祁门红茶＞丹桂＞金桂。可见，金桂和丹桂的ABTS·+的清除活性显著低于测试的绿茶和红茶，但丹桂的清除活性仍极显著高于金桂。

不同茶的FRAP值排序为西湖龙井＞丹桂＞祁门红茶＞金桂。丹桂的FRAP值略高于祁门红茶，但差异不显著，而丹桂的FRAP值仍极显著高于金桂。

2.2 总酚含量

由图1可知，不同茶的总酚含量具有显著性差异。总体上，总酚含量由高到低依次为西湖龙井茶、丹桂、祁门红茶、金桂。丹桂总酚含量极显著高于祁门红茶及金桂。

3 小结与讨论

研究表明，茶叶中对身体健康最有益的物质是具有很强抗氧化能力的茶多酚，可有效清除氧自由基和脂类自由基，预防脂质过氧化，且具有抑制肿瘤发生、延缓衰老等功能［8］。对于绿茶和红茶的抗氧化活性已有研究［9］。喝茶有助于健康已被人们所接受。而桂花、菊花等植物花朵干燥后制成使用类似茶的冲泡式饮品，具有方便、适口、香味、抗氧化等保健特点。

本文使用3种评价体系比较金桂、丹桂花茶抗氧化活性，3种方法的测定结果略有不同，其原因在于各抗氧化评价体系本身就存在一定的差异［10］。当有供氢能力的抗氧化剂存在时（如酚类），DPPH·溶液的颜色变浅，吸光度变小。在有供氢能力的抗氧化剂存在下，ABTS·+与之反应，变成没有颜色的ABTS。FRAP值反映的是被测物将Fe3+还原成Fe2+的能力。金桂、丹桂的DPPH值和FRAP值相对高于其ABTS值，这可能是其含有的抗氧化剂具有较强的DPPH·清除活性及将Fe3+还原成Fe2+的能力，但相对的ABTS·+清除活性较弱。使用多种方法能更系统、准确的评价植物的抗氧化活性。

尽管与绿茶西湖龙井相比，金桂、丹桂的抗氧化活性、总酚含量低于前者，但丹桂花茶具有超过祁门红茶的DPPH·清除活性和总酚含量，而其FRAP值也与祁门红茶相当，且丹桂花茶的3种抗氧化活性指标均显著高于金桂花茶，这表明丹桂比金桂更具营养价值，具有进一步开发和综合利用的潜力。

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［3］ 郭刚军，彭春秀，何享，等.云南晒青毛茶提取物抗氧化活性研究［J］.中国食品学报，2013（8）：42-48.

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［5］ 蔡宁晨，苏平，刘晓霞，等.紫苏叶花色苷抗氧化作用的研究［J］.中国食品学报，2012，12（11）：32-36.

［6］ Benzie IF F，Szeto Y T.Total antioxidant capacity of teas by the ferric reducing/antioxidant power assay［J］.Journal of Agricu ltural and Food Chem istry，1999，47（2）：633-636.

［7］ 高玉萍，唐德松，龚淑英.茶提取物抗氧化活性与茶多酚，儿茶素关系探究［J］.中国食品学报，2013（6）：40-47.

［8］ 赵保路.茶多酚的抗氧化作用［J］.科学通报，2002，47（16）：1206-1210.

［9］ Dufresne C J，Farnworth E R.A review of latest research findings on the health promotion properties of tea［J］.Journal of Nutritional Biochem istry，2001，12：404-421.

［10］ 杜国荣.猕猴桃，柿和苹果果实的抗氧化能力及其抗氧化活性成分的分析［D］.杨凌：西北农林科技大学，2009.

（责任编辑：张瑞麟）

S 685.13

A

0528-9017（2014）11-1746-03

文献著录格式：金亮，田丹青，李小白，等.金桂与丹桂花茶抗氧化活性的比较［J］.浙江农业科学，2014（11）：1746-1748.

2014-06-24

杭州市科技重大创新项目（20131812A18）；浙江省农业科学院科技创新能力提升工程

金 亮（1981-），男，安徽淮南人，助理研究员，博士，从事植物分子遗传与食品化学研究工作。E-mail：zjulab @163.com。