畜牧兽医科技文摘

猪传染性胃肠炎病毒M、sM基因重组杆状病毒的构建及病毒样颗粒的组装/冷勇（西南大学荣昌校区动物医学系，重庆 402460），宋振辉，卿家超…//畜牧兽医学报.-2013，44（9）.-1432～1437

利用RT-PCR方法扩增猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）M和sM结构蛋白基因，将其分别克隆入载体pFastBacTMDual，获得转移质粒pFastBacTMDual-M和pFastBacTMDual-M-sM，将重组质粒转化至DH10Bac感受态细胞，经抗性与蓝白斑筛选，获得杆状病毒重组质粒Bacmid-M和Bacmid-M-sM，在Cellfection作用下，将杆状病毒重组质粒转染昆虫细胞sf9，获得重组杆状病毒rBac-M和rBac-M-sM。通过Western Blot、间接免疫荧光试验（IFA）进行检测，结果显示：重组蛋白在杆状病毒感染的sf9昆虫细胞中获得正确表达。将重组杆状病毒rBac-M和rBac-M-sM分别感染sf9昆虫细胞，进行TGEV病毒样颗粒（VLPs）的体外组装试验。结果表明，M蛋白在sf9细胞内单独表达，M蛋白和sM在sf9细胞内共同表达，都可形成TGEV病毒样颗粒，而且病毒粒子大小不等，直径在61～101nm。试验结果为进一步研究TGEV结构蛋白在病毒装配过程中的作用提供了理论依据。

丁香酚对兔痒螨超微结构和酶活性的影响/熊凌锌（西北农林科技大学动物医学院 中兽医药研究所，陕西 杨凌 712100），陈颖，钟留情…//动物医学进展.-2013，34（10）.-72～75

为了探讨丁香酚的杀螨机制，进行了丁香酚对离体兔痒螨（Psoroptes cuniculi）的亚细胞结构、乙酰胆碱酯酶（AChE）、单胺氧化酶（MAO）、谷胱甘肽-S-转移酶（GSTs）及Ca2+-ATP酶活性影响试验。结果表明，质量浓度60mg/mL的丁香酚处理兔痒螨36、72、108、144、180min时，供试螨MAO、GSTs和Ca2+-ATP酶活性显著降低（P<0.05）；在108、144、180min时，供试螨AChE活性显著降低（P<0.05），180min时，供试螨细胞核膜肿胀、核染色质固缩，线粒体、高尔基复合体空泡化，内质网断裂、扭曲，肌纤维横纹模糊不清。说明丁香酚可能通过影响兔痒螨的神经系统、运动系统及能量代谢等多种靶标而发挥杀螨作用，丁香酚有望开发为一种新型高效杀螨剂。

饲粮锌水平对育成期蓝狐生长性能、营养物质消化率及氮代谢的影响/郭强（中国农业科学院特产研究所，吉林省特种经济动物分子生物学省部共建实验室，长春 130112），张铁涛，刘志…//动物营养学报.-2013，25（10）.-2497～2503

本试验旨在研究饲粮锌水平对育成期蓝狐生长性能、营养物质消化率及氮代谢的影响。选取8周龄平均体重为（2.21±0.49）kg的健康蓝狐90只，分成5组，通过方差分析调整各组间体重差异不显著（P>0.05），每组18只，公母各占1/2。各组饲粮锌水平分别为39.75（Ⅰ组）、60.00（Ⅱ组）、80.00（Ⅲ组）、100.00（Ⅳ组）、120.00 mg/kg（Ⅴ组）。预试期7 d，正试期60 d。结果表明：1）公狐平均日增重各组间差异不显著（P>0.05）；母狐Ⅱ组平均日增重极显著高于Ⅴ组（P<0.01）。2）公狐干物质消化率Ⅱ组极显著高于Ⅰ组和Ⅳ组（P<0.01），显著高于Ⅲ组和Ⅴ组（P<0.05）；脂肪消化率Ⅱ组极显著高于Ⅰ组、Ⅲ组和Ⅳ组（P<0.01）；蛋白质消化率Ⅱ组极显著高于Ⅰ组、Ⅳ组和Ⅴ组（P<0.01）。3）公狐食入氮Ⅰ组和Ⅳ组极显著高于Ⅱ组（P<0.01）；粪氮Ⅰ组、Ⅳ组和Ⅴ组极显著高于Ⅱ组（P<0.01）。母狐尿氮Ⅲ组和Ⅴ组显著高于Ⅱ组（P<0.05）；氮沉积Ⅰ组和Ⅱ组极显著高于Ⅴ组（P<0.01），显著高于Ⅲ组（P<0.05）；净蛋白质利用率Ⅰ组和Ⅱ组极显著高于Ⅴ组（P<0.01），显著高于Ⅲ组（P<0.05）；蛋白质生物学价值Ⅱ组极显著高于Ⅴ组（P<0.01），Ⅰ组和Ⅱ组显著高于Ⅲ组和Ⅴ组（P<0.05）。综合试验结果得出，育成期蓝狐饲粮锌水平为60.00 mg/kg时，可获得较好的生长性能，提高蛋白质利用率，有效减少粪氮和尿氮的排出量。

公牛MBL2基因多态性与精液品质及后裔生产性能的相关性研究/白井岩（南京农业大学动物科技学院，江苏 南京 210095），吴洁，蒋小强…//畜牧兽医学报.-2013，44（10）.-1561～1568

旨在探索甘露糖结合凝集素2（Mannose-binding lectin 2，MBL2）基因与中国荷斯坦公牛精液品质及后裔生产性能的相关性，寻找可作为公牛精液品质及后裔生产性能的分子标记。利用PCR-SSCP和基因测序技术对218头成年中国荷斯坦公牛MBL2基因遗传多态性进行检测，并分析其多态位点与精液品质及后裔生产性能的相关性。结果表明，在牛MBL2基因外显子1和外显子2上存在5个突变位点，即g.101G/A、g.135C/A、g.136G/A、g.147T/C和g.32C/T，g.32C/T为新发现的多态位点（GenBank accession number：KC 832932），g.101G/A和g.135C/A突变导致了31Arg→31Gln和42Pro→42Gln突变。g.101G/A位点与精子密度呈显著相关（P<0.05）；g.135C/A突变与鲜精活力及精子密度极显著相关（P<0.01）；g.136G/A、g.147T/C突变与与鲜精活力、精子密度、产量育种值、脂肪育种值、蛋白育种值相关性极显著（P<0.01），与体细胞育种值显著相关（P<0.05）；g.32C/T位点与体细胞育种值相关性极显著（P<0.05）。外显子1发现5种单倍型组合，MN型个体精子密度、鲜精活力、产量育种值、脂肪育种值及蛋白育种值最高，有利于提高精液品质及牛群产奶性能。结果提示，MBL2基因多态性与中国荷斯坦公牛的精液品质及后裔生产性能存在相关性。

转拟蜘蛛牵丝蛋白基因新疆美利奴细毛羊成纤维细胞系的建立及初步鉴定/房君（内蒙古农业大学生命科学学院，呼和浩特 010018），孟凡华，王海涛…//安徽农业科学.-2013，41（22）.-9305～9308

[目的]建立含有拟蜘蛛牵丝蛋白基因的新疆美利奴细毛羊成纤维细胞系。[方法]采用脂质体转染，将表达拟蜘蛛牵丝基因的质粒pKap-EGFP4S转入新疆美利奴细毛羊成纤维细胞，通过G418毒性筛选获得阳性细胞系，并采用PCR、RT-PCR检测重组细胞中的目的基因表达。[结果]对体外分离培养的成纤维细胞观察表明细胞形态均为长梭形、活性良好（细胞生长曲线呈S型）、染色体数目为2n=54；通过G418筛选出共43株单克隆细胞系，经PCR鉴定拟蜘蛛牵丝蛋白基因随机整合的细胞系15株，其中挑选4个阳性细胞系经过RT-PCR检测目的基因已转录为mRNA。[结论]成功建立了拟蜘蛛牵丝蛋白基因的新疆美利奴细毛羊成纤维细胞系，为进一步通过体细胞核移植技术制备被毛含转拟蜘蛛牵丝蛋白基因克隆羊奠定基础。

Lab色度系统对黑羽乌鸡不同产蛋期蛋壳颜色的评价和比较研究/杨智青（江苏沿海地区农业科学研究所，江苏 盐城 224002），陈应江，金崇富…//安徽农业科学.-2013，41（22）.-9316～9318，9347

[目的]为绿壳乌鸡的选育工作以及利用产蛋期调控蛋壳颜色提供理论依据。[方法]选取苏北黑羽乌鸡3个生产期的绿壳蛋作为研究对象，利用Lab色度系统从蛋壳亮度、颜色、饱和度以及色调角等方面进行研究。[结果]黑羽乌鸡生产的绿壳蛋亮度亮度值为73～87，差异较大，且后期亮度与前-中期差异显著（P<0.05）；蛋壳颜色在红绿色品方面早期与中-后期差异显著（P<0.05）；黄蓝色品方面变化较大，早期和后期差异显著（P<0.05）；青蛋壳颜色饱和度相对集中，后期与早-中期差异显著（P<0.05）；绿壳蛋颜色的色调角要分布在120°～140°，中期与早-后期差异显著（P<0.05）。[结论]通过对产蛋期的规划调整可以大幅度提高绿壳蛋颜色的均一性和产品市场竞争力。

日粮中不同蒙脱石添加量对奶牛瘤胃发酵及粪便发酵的影响/王聪（甘肃农业大学动物科学技术学院，甘肃 兰州 730070），周凌云，李发弟…//甘肃农业大学学报.-2013，（5）.-24～31

试验旨在研究日粮中不同蒙脱石添加量（montmorillonite，MMT）对中国荷斯坦奶牛瘤胃发酵及粪便发酵的影响.选择75头健康中国荷斯坦奶牛（泌乳时间为181d、产奶量为29.18kg/d、胎次为2.2胎），根据产奶量、泌乳时间、胎次相近的原则，随机分成5组，每组15头，分为对照组（0%MMT）和质量分数为0.5%、1%、2.5%、5%MMT添加处理组.结果表明：日粮不同浓度MMT添加量对奶牛瘤胃及粪便pH没有影响.与对照组相比，日粮中添加0.5%、2.5%和5%MMT组极显著提高了瘤胃氨氮浓度（P<0.01），且微生物蛋白有升高的趋势，其中2.5%、5%MMT组微生物蛋白显著高于对照组（P<0.05）；5%MMT组粪便氨氮浓度显著低于对照组（P<0.05）.2.5%和5%MMT组瘤胃乙酸摩尔比显著低于对照组（P<0.05），1%、2.5%和5%瘤胃异戊酸摩尔比显著高于对照组（P<0.05），而其他瘤胃发酵指标无显著变化（P>0.05）；0.5%和1%MMT组奶牛粪便乙酸摩尔比极显著高于其他各组（P<0.01），0%、2.5%和5%MMT组粪便丙酸摩尔比极显著高于1%MMT组（P<0.01），1%MMT组粪便乙酸/丙酸极显著高于0%、2.5%和5%组（P<0.01），其他粪便发酵指标均无显著差异（P>0.05）.因此，在奶牛饲粮中添加MMT可以改变瘤胃发酵及粪便发酵环境，减少粪便臭气的排放，但MMT的添加量不宜超过2.5%.

L-肉碱和赖氨酸对爱拔益加肉公鸡生长性能和肉品质的影响/王月超（中国农业科学院饲料研究所，农业部饲料生物技术重点开放实验室，北京 100193），蔡辉益，闫海洁…//动物营养学报.-2013，25（11）.-2591～2600

试验旨在研究L-肉碱和赖氨酸对爱拔益加（AA）肉公鸡生长性能和肉品质的影响。采用2×3两因子试验设计，选用1日龄AA肉公鸡504只，随机分成6个处理，每个处理6个重复。分前期（1～21日龄）和后期（22～42日龄）2个试验阶段，设2个L-肉碱水平（0、100 mg/kg），低、中、高3个赖氨酸水平，其中前期赖氨酸的添加水平分别为0.85%、1.15%和1.45%，后期赖氨酸的添加水平分别为0.75%、1.05%和1.35%。结果表明：1）单独添加赖氨酸对生长性能、屠宰性能、除胸肌红度值（a*值）和剪切力值及腿肌剪切力值和滴水损失外的肉品质影响显著（P<0.05）；L-肉碱与赖氨酸合用可显著影响腹脂率、胸肌亮度值（L*值）、胸肌和腿肌pH24 h（P<0.05），其中100 mg/kg L-肉碱低赖氨酸组腿肌率也显著增加（P<0.05）。2）主效应分析表明，L-肉碱对生长性能影响不显著（P>0.05），但对不同肌肉发育和肉品质的影响不同，添加100 mg/kg L-肉碱可显著增加腿肌率（P<0.05），显著提高胸肌的a*值和降低滴水损失（P<0.05）；随着赖氨酸添加水平的增加，生长性能和肉品质得以改善，但低赖氨酸饲粮显著增加了腹脂率和腿肌率（P<0.05），显著降低了胸肌率（P<0.05）；L-肉碱和赖氨酸对腹脂率、胸肌的L*值和肌肉pH24 h产生互作效应（P<0.05）。结果显示，饲粮中赖氨酸水平低于NRC（1994）标准时，添加100 mg/kg L-肉碱可显著提高腿肌率；L-肉碱和赖氨酸在减少腹脂沉积和改善肌肉L*值上存在互作效应。

饲粮代谢能和粗蛋白质水平对21～34周龄海兰灰蛋鸡生产性能与蛋品质的影响/付胜勇（中国农业科学院饲料研究所，农业部饲料生物技术重点开放实验室，北京 100193），武书庚，张海军…//动物营养学报.-2013，25（11）.-2601～2611

本试验旨在研究相同标准回肠可消化（SID）氨基酸（AAs）模式下，饲粮代谢能和粗蛋白质水平对21～34周龄海兰灰蛋鸡生产性能与蛋品质的影响。试验选用648羽20周龄健康海兰灰（Hy-Line W36）蛋鸡，随机分为6个处理，分别饲喂相同SID AAs模式下不同代谢能（高11.82 MJ/kg、低11.00 MJ/kg）和粗蛋白质水平（17.0%、16.5%和16.0%）的6种试验饲粮，每个处理6个重复，每个重复18羽。预试期1周，正试期14周。试验分3个阶段（21～24周龄、25～28周龄和29～34周龄）进行指标的测定。结果表明：1）随着饲粮粗蛋白质水平的降低，蛋鸡全期（21～34周龄）的平均蛋重显著降低（P<0.05），21～24周龄蛋鸡的产蛋率和日产蛋量显著升高（P<0.05）；高代谢能组21～24周龄蛋鸡的平均蛋重显著低于低代谢能组（P<0.05），高代谢能组25～28周龄蛋鸡的产蛋率和蛋料比显著高于低代谢能组（P<0.05）。2）饲粮代谢能和粗蛋白质水平对蛋鸡代谢能摄入量无显著影响（P>0.05），但显著影响粗蛋白质摄入量（P<0.05），高代谢能组蛋鸡的摄入量较低。饲粮粗蛋白质水平下降对标准回肠可消化赖氨酸摄入量无显著影响（P>0.05），但显著降低粗蛋白质摄入量（P<0.05）。3）随着饲粮粗蛋白质水平的降低，蛋黄干物质含量显著降低（P<0.05）；饲粮高代谢能水平可显著提高21～24周龄蛋鸡的哈夫单位（P<0.05），显著降低浓蛋白高度及29～34周龄蛋鸡的蛋壳厚度、蛋壳含量及蛋黄干物质含量（P<0.05）。结果提示，在SID AAs模式下，以产蛋率和日产蛋量为评价指标，21～24周龄初产蛋鸡宜用低粗蛋白质水平（16.0%）饲粮，25～34周龄宜用高代谢能（11.82 MJ/kg）、适当粗蛋白质水平（16.5%）饲粮。低代谢能（11.00 MJ/kg）配置16.0%～17.0%粗蛋白质水平的饲粮仍存在粗蛋白质摄入过多的问题，不利于蛋鸡生产性能发挥，对适宜体况和蛋品质的保持也有不良影响。

莫能菌素和吐温80对生长期草原红牛瘤胃发酵特性及甲烷排放的影响/香艳（吉林农业大学动物科学技术学院，长春 130118），杨华明，张国梁…//动物营养学报.-2013，25（11）.-2675～2681

本试验旨在研究莫能菌素和吐温80对生长期草原红牛瘤胃发酵特性及甲烷排放的影响。选择17月龄、体重相近[（276±18）kg]的生长期草原红牛公牛8头，采用4×4拉丁方试验设计，试验牛随机分为4组，每组2头。分别饲喂基础饲粮以及在基础饲粮中分别添加0.36 g/d莫能菌素、1.75 g/d吐温80、0.36 g/d莫能菌素+1.75 g/d吐温80的试验饲粮。结果表明：饲粮中添加莫能菌素能极显著增加草原红牛瘤胃液总挥发性脂肪酸浓度与丙酸比例（P<0.01），增重1 kg的甲烷排放量降低了31.89%；饲粮中添加吐温80能增加草原红牛瘤胃液总挥发性脂肪酸浓度和丙酸比例，但差异不显著（P>0.05），增重1 kg的甲烷排放量降低了22.59%；饲粮中联合添加莫能菌素和吐温80的效果没有比分别添加二者的效果增强。因此，饲料中分别添加莫能菌素或吐温80均能促进草原红牛瘤胃发酵，并显著降低单位增重的甲烷排放量，有利于提高饲料养分的消化利用效率。

玉米浆与干稻秸以不同比例混合对黄贮饲料发酵品质和营养成分的影响/李欣新（东北农业大学动物科学技术学院，黑龙江 哈尔滨 150030），张永根，张微微…//动物营养学报.-2013，25（11）.-2682～2688

本试验旨在探讨玉米浆与干稻秸以不同比例混合对黄贮饲料发酵品质和营养成分的影响。试验以水分含量为54.00%的玉米浆和水分含量为10.00%的干稻秸为原料，按玉米浆与干稻秸不同混合比例（1∶1、1∶2、1∶3和2∶1，鲜样质量比）分为4个组（Ⅰ～Ⅳ组），每个组10个重复，在各组中添加等量的复合乳酸菌制剂，并调节水分含量为60.00%，常温贮存60 d后进行测定。结果表明：Ⅱ组的乳酸菌数量、乳酸和氨态氮含量显著高于其他各组（P<0.05）；Ⅲ组的乙酸含量最高，与其他各组差异显著（P<0.05）；Ⅳ组氨态氮/总氮最低，与其他各组差异显著（P<0.05）；随着玉米浆添加量的增加，粗蛋白质含量显著升高（P<0.05），并显著降低了中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维含量（P<0.05）。综合各项指标，确定玉米浆与干稻秸采用1∶2的比例进行混合可得到品质较好的新型黄贮饲料。

亚急性瘤胃酸中毒对瘤胃和瓣胃上皮细胞增殖与凋亡的影响/邬宇航（内蒙古农业大学，农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室，呼和浩特 010018），殷兆丽，刘大程…//动物营养学报.-2013，25（11）.-2612～2622

本试验旨在研究亚急性瘤胃酸中毒（SARA）对瘤胃和瓣胃上皮细胞增殖与凋亡的影响。选取8只健康的处于泌乳期关中奶山羊，按体重、泌乳量相近原则随机分为3组，对照组（n=2）饲喂基础饲粮，SARA组（n=3）饲喂非纤维性碳水化合物与中性洗涤纤维比分别为1.02、1.24、1.63、2.58的试验饲粮，诱导发生SARA；恢复组（n=3）奶山羊发生SARA后自由采食青干草4周。取瘤胃、瓣胃黏膜组织，通过检测瘤胃、瓣胃黏膜蛋白质、DNA及RNA含量来研究SARA对瘤胃、瓣胃黏膜生长的影响；通过检测增殖细胞核抗原、原位末端标记阳性细胞数，研究瘤胃、瓣胃上皮细胞增殖与凋亡的变化；并在透射电镜下观察细胞凋亡情况。结果表明：SARA显著降低了瘤胃黏膜蛋白质、DNA及RNA含量（P<0.05），对瓣胃上皮细胞蛋白质、DNA和RNA含量影响不显著（P>0.05）。SARA组上皮细胞微绒毛排列不整齐，线粒体肿胀、核固缩、染色质边集化，有较多的凋亡小体形成。SARA组瘤胃及瓣胃上皮细胞增殖指数较对照组显著降低（P<0.05），细胞凋亡指数较对照组显著提高（P<0.05）。综上，SARA对瘤胃及瓣胃上皮细胞增殖活性有抑制作用，对上皮细胞凋亡有促进作用。

玉米干酒糟及其可溶物对21日龄肉鸡生长性能、抗氧化能力和免疫性能的影响/李华磊（西北农林科技大学动物科技学院，陕西 杨凌 712100），王娟娟，刘少凯…//动物营养学报.-2013，25（11）.-2713～2719

本试验旨在研究饲粮中添加玉米干酒糟及其可溶物（DDGS）对21日龄肉鸡生长性能、抗氧化能力和免疫性能的影响。选取1日龄科宝500肉鸡300只，随机分成2组，每组6个重复，每重复25只。对照组饲喂玉米-豆粕型基础饲粮，试验组饲喂添加15%玉米DDGS的试验饲粮。试验期为21 d。结果表明：与对照组相比，试验组肉鸡生长性能无显著差异（P>0.05）；试验组肉鸡血清中超氧化物歧化酶活性和总抗氧化能力及肝脏中超氧化物歧化酶活性显著下降（P<0.05），而血清中丙二醛含量显著上升（P<0.05）；试验组肉鸡的脾脏指数、胸腺指数和法氏囊指数差异不显著（P>0.05）；试验组肉鸡血清中白细胞介素-6和干扰素-γ含量显著升高（P<0.05），而白细胞介素-10和肿瘤坏死因子-α含量无显著差异（P>0.05）；试验组肉鸡血清中免疫球蛋白A和免疫球蛋白G含量显著升高（P<0.05）。由此得出，饲粮中添加15%玉米DDGS在一定程度上可提高肉鸡免疫性能，但降低了机体抗氧化能力。

陶赛特、波德代与甘肃本地绵羊杂交群体生长发育比较研究/孙晓萍（中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所，甘肃 兰州 730070），刘建斌，张万龙…//畜牧与兽医.-2014，（1）.-42～46

为提高甘肃本地绵羊的产肉性能，用引进的陶赛特羊、波德代羊分别与当地的滩羊、小尾寒羊和蒙古羊杂交，对不同阶段的杂交组合生长发育性状进行测定分析，探讨最佳杂交组合模式。结果：杂种三代生长发育速度高于对应杂种二代，二代高于对应杂种一代。杂交三代中，陶波寒F3、陶波蒙F3生长发育最快，体重公、母羔分别比陶滩寒F3高1.57%、3.17%、8.23%、1.15%；杂交二代中，同样是陶波寒F2、陶波蒙F2组合生长发育最快，体重公、母羔分别比陶滩寒F2高2.15%、4.53%、9.21%、2.75%；杂交一代中，波寒F1发育最快，公、母羔分别比波蒙F1、滩寒F1高3.23%、6.07%、7.42%、8.66%。因此，以陶赛特羊、波德代羊为父本生产二、三代杂交羔羊，或小尾寒羊直接与波德代羊进行杂交生产高档商品羔羊肉，经济效益显著，杂交培育出的新群体是国内肉用绵羊育种的重要资源。

酒泉地区奶牛超数排卵技术应用效果观察/薛仰全（甘肃农业大学动物医学院，甘肃 兰州 730070），余四九，孙俊峰…//畜牧与兽医.-2014，（1）.-47～50

通过在酒泉地区应用推广超数排卵技术，探讨当地供体母牛的选择基本条件及最佳超排季节。采用自然发情+FSH+PGF2α法和CUEMAT孕酮栓+FSH+PGF2α法，研究了不同激素处理、季节、供体母牛体况、胎次等因素对超数排卵效果的影响。结果表明：自然发情法和CUE-MATE法超排的平均可用胚胎数分别为4.54枚和4.86枚，上、中、下3等膘情获得的平均可用胚胎数分别为6.13枚、5.39枚和3.29枚，平均可用胚数春季（4.00枚）<秋季（4.86枚）<冬季（5.07枚），经产母牛和青年母牛平均可用胚数分别为9.06枚和9.65枚。由此可见，酒泉地区供体母牛可选取膘情体况在中等以上，2～6胎经产母牛或1.5～2.0岁未产青年母牛为宜，时间在秋、冬两季节进行超数排卵较为理想。

果青牧场冷暖两季土壤与牧草中的铜铁含量变化研究/许新新（青海大学农牧学院，青海 西宁 810016），刘书杰，柴沙驼…//畜牧与兽医.-2014，（1）.-50～53

为有效推行三江源区矮生嵩草草场季节性畜牧业，有效合理利用草地资源，防治家畜营养代谢疾病，提高体系生产力水平，制定针对性的补饲措施。2011年4月、7月，采集青海省玉树藏族自治州玉树县果青牧场冷暖两季0～5 cm、5～10 cm土壤、可食牧草，应用微波消解-原子吸收法测定土壤与牧草中的铜、铁含量。结果：冷、暖两季土壤平均铁含量处于丰盈状态（17 377.7～25 688.29 mg/kg），平均铜含量处于缺乏状态，且暖季大于冷季（0～5 cm，2.60 vs 2.45 mg/g；5～10 cm，2.89 vs 2.73 mg/kg）；牧草平均铁含量冷季大于暖季（1 115.84 vs 372.00mg/kg），平均铜含量暖季大于冷季（0.66 vs 0.44 mg/kg）。

牛病毒性腹泻-黏膜病病毒E_2基因在卡介苗中的优化表达/曾范利（吉林农业大学中药材学院，长春 130118），张云，张梦…//畜牧兽医学报.-2014，45（1）.-94～100

为构建牛病毒性腹泻-黏膜病病毒（BVDV）基因工程活载体疫苗，根据已知的BVDV Changehun184毒株E2基因序列，利用DN.AStar生物学软件对其进行分析，预测了可能存在的抗原表位，设计6对引物，分别扩增了包含预测抗原位点的6个片段，1～297 aa、1～345 aa、1～374 aa、45～297 aa、45～345 aa和45～374 aa，克隆至穿梭表达载体pMV361中，经酶切、PCR扩增和测序证实已正确插入到表达载体中，构建了6个原核表达质粒。阳性重组质粒通过电转化到卡介苗（BCG）感受态中，热诱导后，进行SDS-PAGE分析和免疫印迹检测。结果表明6个重组质粒在卡介苗中均有不同程度的表达，表达产物与理论推测的相对分子质量一致。Western blot结果显示其融合蛋白能被牛抗BVDV的阳性血清识别，具有相应的反应原性。本研究为进一步研究BVDV基因工程活载体疫苗奠定了基础。

BMP4诱导鸡胚胎干细胞向雄性生殖细胞分化的研究/施青青（扬州大学动物科学与技术学院，江苏省动物繁育与分子设计重点实验室，江苏 扬州 225009），张振韬，李鹏程…//畜牧兽医学报.-2013，44（11）.-1749～1757

旨在探讨BMP4诱导鸡胚胎干细胞向雄性生殖细胞分化的作用机理。采用单层贴壁培养作为分化模式，分别采用10、20、30和40ng·mL-1BMP4浓度诱导雄性鸡胚胎干细胞，通过形态学、荧光定量PCR和免疫细胞化学检测诱导效果。根据细胞形态变化和差异基因表达量变化，确定了BMP4的适宜诱导浓度为40ng·mL-1。在适宜浓度诱导过程中，诱导4d类胚体开始出现，6～8d类胚体逐渐增大，数量增多，10d部分类胚体开始散开，变为小的圆形细胞，12d在散开后的类胚体周围可观察到少量生殖样细胞，14d生殖样细胞数目增多，且呈聚团生长的趋势。诱导过程中相应基因表达量也发生变化：胚胎干细胞标记基因Nanog、Sox2表达量显著下降（P<0.01），生殖细胞特异基因Stra8、Dazl、integrinα6、c-kit表达量均呈显著上升趋势（P<0.01）。BMP4可以引起生殖细胞相应基因的表达，促进雄性鸡胚胎干细胞向雄性生殖细胞方向分化，结果为雄性生殖细胞的体外诱导研究提供试验参考，为进一步研究雄性生殖细胞发生和调控机制提供理论基础。

L-精氨酸对I U G R 仔猪胰岛结构及功能的调控研究/孔令蕊（南京农业大学动物科技学院，江苏 南京 210095），王远孝，李伟…//畜牧兽医学报.-2013，44（11）.-1781～1789

本试验旨在研究L-精氨酸（L-Arg）对子宫内发育迟缓（IUGR）仔猪胰腺生长发育的调控。试验选取12头IUGR仔猪和6头正常仔猪，哺乳至7d时断奶，将IUGR仔猪随机分为2组，分别饲喂基础人工乳（IUGR组）、基础人工乳+0.6%Arg（IUGR+Arg组），正常仔猪饲喂基础人工乳（NBW组）。饲喂至14d时每组选取4头屠宰取样，并对胰腺发育相关指标进行测定。结果表明：受IUGR影响，仔猪胰腺组织中胰岛素（Ins）含量、胰岛面积及β细胞质量均显著降低（P<0.05），胰岛细胞数目、Ins染色阳性率、Ins阳性表达面积及Ins阳性表达细胞数目均极显著减少（P<0.01）。IUGR猪补充Arg后，胰腺绝对重量显著增加（P<0.05）；Ins含量、胰岛面积、胰岛细胞数目、β细胞质量、Ins染色阳性率、Ins阳性表达面积也明显增加（P<0.01），且均与NBW猪相比差异不显著（P>0.05）；胰岛平均染色光密度明显增加（P<0.01），且显著高于NBW猪（P<0.01）。结果提示，IUGR损害仔猪胰腺发育，补充Arg后，IUGR仔猪胰岛结构得到改善，胰岛β细胞数量增加，胰岛素合成增多。

慢病毒载体介导稳定表达CD163的PAM细胞系的建立及对PRRSV感染的研究/王向鹏（西北农林科技大学动物医学院兽医免疫学研究所，陕西 杨凌 712100），魏蕊芳，肖书奇…//畜牧兽医学报.-2013，44（11）.-1797～1804

本研究旨在通过慢病毒载体系统将猪源CD163转染入永生化的猪肺泡巨噬细胞（PAM）系（CRL-2843），建立稳定表达CD163的PAM细胞系（PAM-CD163）及验证该细胞系对PRRSV的易感性。用PCR方法从pJET1.2-CD163载体上扩增CD163基因编码区，通过酶切连接构建慢病毒表达载体pTrip-CMV-CD163-IRESpur。将该质粒与慢病毒包装质粒psPAX2和pMD2.G共转染293-T细胞，包装表达CD163的慢病毒。将收获的慢病毒在Polybrene的介导下转导至永生化PAM细胞，采用嘌呤霉素筛选和细胞有限稀释法筛选出稳定表达CD163的PAM细胞系。应用得到的细胞系进行PRRSV感染试验。经过RT-PCR、间接免疫荧光试验、Western blot和流式细胞术试验证实，筛选出1株能稳定表达CD163的PAM细胞系，命名为PAMCD163。该株细胞对PRRSV高度易感，PRRSV在PAM-CD163细胞上的毒价可以达到105.0 TCID50·mL-1以上。建立了稳定表达CD163的PAM细胞系，可以用于PRRSV的分离培养和细胞受体的研究。

鸡白痢沙门菌分离株的致病性分析/査华（扬州大学兽医学院病理教研室，禽类预防医学教育部重点实验室，江苏 扬州 225009），石火英，吉贞颖…//畜牧兽医学报.-2013，44（11）.-1812～1818

为研究鸡白痢沙门菌（S.pullorum）分离株对雏鸡的致病性，通过筛选2010至2012年期间中国华东部分地区的78株鸡白痢沙门菌，选择具有代表性的12株在雏鸡上进行致死性感染试验，并对其中的2株强毒分离株进行半数致死量测定和细菌定殖研究，运用组织病理学和免疫组化方法研究其引起的组织病变和细菌分布情况。结果显示：鸡在接种2株强毒分离株后第3天组织即可出现病变，第7—14天病变最为严重，第21天后明显好转。感染过程中各组织中沙门菌数量有不同程度的变化。结果表明这2株鸡白痢沙门菌分离株对雏鸡具有较强的致病性，且不同分离株对雏鸡脏器的定殖能力、分布情况有所不同。鸡白痢沙门菌分离株对雏鸡致病性的研究为揭示其感染机理及疫苗研制提供了相关的依据。

酵母培养物对肉仔鸡生长性能、肠黏膜结构及肠道菌群的影响/肖曼（广东海洋大学农学院，湛江 524088），高振华，李兴华…//动物营养学报.-2 0 1 3，2 5（7）.-1624～1631

本试验旨在研究不同水平酵母培养物对肉仔鸡生长性能、肠黏膜结构及肠道菌群的影响。选取240只1日龄健康、体重相近的爱拔益加（AA）肉仔鸡，随机分为6个组，每组4个重复，每个重复10只鸡。对照组（Ⅰ组）饲喂基础饲粮，试验组（Ⅱ～Ⅵ组）分别饲喂在基础饲粮中添加0.05%、0.10%、0.15%、0.20%和0.25%酵母培养物的试验饲粮。试验期21 d。结果表明：1）Ⅴ、Ⅵ组肉仔鸡平均日增重和平均日采食量均显著高于Ⅰ组（P<0.05），各组料重比差异不显著（P>0.05）。2）Ⅴ组肉仔鸡十二指肠、空肠和回肠绒毛高度及绒毛高度/隐窝深度显著高于Ⅰ组（P<0.05），隐窝深度显著低于Ⅰ组（P<0.05）。3）Ⅴ组空肠、回肠和盲肠大肠杆菌数量显著低于Ⅰ组（P<0.05），乳酸杆菌数量显著高于Ⅰ组（P<0.05），各组双歧杆菌数量差异不显著（P>0.05）。结果提示，酵母培养物可调节肠道菌群和改善肠黏膜结构，进而提高生长性能。本试验条件下，1～21日龄肉仔鸡饲粮酵母培养物的适宜添加水平为0.20%。

基于16S rRNA基因序列分析梅花鹿瘤胃细菌多样性/李志鹏（中国农业科学院特产研究所，吉林省特种经济动物分子重点实验室，长春 130112），刘晗璐，崔学哲…//动物营养学报.-2013，25（9）.-2044～2050

本试验旨在对以柞树叶为主要粗饲料来源的梅花鹿瘤胃细菌多样性进行分析。提取瘤胃微生物基因组DNA，扩增细菌16S rRNA基因，构建16S rRNA基因克隆文库，分析梅花鹿瘤胃细菌区系组成。结果表明：1）试验共得到107个非嵌合体16S rRNA基因序列。按照97%序列相似性，划分为22个分类操作单元（OTUs）。其中91个序列（10个OTUs，85%总克隆序列）与已培养菌序列相似性≥97%，13个序列（10个OTUs，12.2%总克隆序列）与已培养菌序列相似性为90%～97%，其余序列相似性<90%。87.9%序列与普雷沃氏菌属（Prevotella spp.）相似。2）系统发育分析表明，梅花鹿瘤胃细菌由厚壁菌门和拟杆菌门组成。由结果可知，以富含单宁的柞树叶为主要粗饲料来源的梅花鹿的瘤胃中，普雷沃氏菌属是优势细菌，而牛、羊瘤胃中常见的纤维素降解菌未检测到，这可能与饲料中单宁含量高有关。

全株玉米青贮与黄贮饲喂荷斯坦奶牛效果对比试验/张晋（甘肃省家畜繁育中心），张春//甘肃畜牧兽医.-2013，（6）.-46～47

以16头中国荷斯坦奶牛为试验对象，随机分为2组，进行玉米全株青贮与黄贮饲喂奶牛对比试验。2组日粮营养水平基本相同，试验组日饲喂全株玉米青贮、对照组饲喂等量的黄贮玉米。结果表明，试验组头均产奶量较对照组平均每日多产奶3.27 kg，效果十分显著，日头均增加纯收入9.3元，经济效益显著。全株青贮较黄贮能显著提高奶牛产奶量和经济效益。

脑心肌炎病毒多聚蛋白编码区起始与终止区的密码子使用模式/张瑜（甘肃农业大学动物医学院，甘肃 兰州 730070），张峰，王树瑜…//安徽农业科学.-2013，41（22）.-9202～9204

文中利用特定区域密码子使用偏嗜性对数公式分析了脑心肌炎病毒（Encephalomyocarditis virus，EMCV）多聚蛋白编码基因的翻译起始区域与翻译终止区域的密码子使用模式。结果表明，EMCV多聚蛋白编码区内翻译起始序列区的同义密码子使用偏嗜性的正负偏差总体是平衡的，但几种在整体多聚蛋白质编码区域内使用为负偏嗜的稀有密码子却倾向于出现于编码起始区和终止区。这一有趣的现象，可利用"稀有密码子调控假说"来解释为EMCV开放阅读框两端的稀有密码子偏好性使用对整体阅读框的表达具有负调控作用。该研究说明"稀有密码子调控假说"不仅适用于细菌，而且也适用于一些RNA病毒基因组。

仿生消化法中消化酶与消化时间对评定生长猪常用植物性饲料磷体外消化率的影响/李东卫（中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，动物营养学国家重点实验室，北京 100193），卢庆萍，张宏福…//动物营养学报.-2013，25（9）.-2051～2058

本试验旨在探讨仿生消化过程中生长猪体内4种小肠消化酶以及胃期和小肠期消化时间对植物性饲料磷体外消化率的影响，为确定仿生消化法评定生长猪常用植物性饲料磷体外消化率时模拟小肠消化液的组成与最佳消化时间提供参考。试验在SDS-Ⅰ型单胃动物仿生消化系统中进行，以玉米、豆粕和麦麸为测试原料，分3个试验进行。试验1，设置5个处理，1个不添加小肠消化酶的处理（对照）和4个添加不同小肠消化酶的处理，分别添加胰蛋白酶、胰蛋白酶+糜蛋白酶、胰蛋白酶+糜蛋白酶+淀粉酶、胰蛋白酶+糜蛋白酶+淀粉酶+脂肪酶，胃期消化时间为1.25 h，小肠期消化时间为4.00 h；试验2，确定小肠消化液主要消化酶组成后，设置5个不同的胃期消化时间的处理，分别为0.50、0.75、1.00、1.25、1.50 h，各处理的对应小肠期消化时间均设置为4.00 h；试验3，确定胃期消化时间后，设置6个不同的小肠期消化时间的处理，分别为1.00、2.00、3.00、4.00、5.00、6.00 h。以上各处理均设3个重复，每个重复5根消化管，分别测定3种饲料原料的磷体外消化率。结果表明：1）胰蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶均可显著提高玉米、豆粕和麦麸磷体外消化率（P<0.05），糜蛋白酶可显著提高豆粕和麦麸磷体外消化率（P<0.05），却显著降低了玉米磷体外消化率（P<0.05）。2）胃期消化时间由0.50 h增加到1.00 h，玉米和豆粕磷体外消化率均无显著性变化（P>0.05）；1.25 h时玉米和豆粕磷体外消化率显著降低（P<0.05）；消化时间由0.50 h增加到1.00 h，麦麸磷体外消化率显著升高（P<0.05），1.25 h时达到稳定。3）小肠期消化时间由1.00 h增加到6.00 h，玉米、豆粕和麦麸磷体外消化率均显著增加（P<0.05），并分别在3.00、4.00、5.00 h达到稳定。分析以上结果得出：1）可采用胰蛋白酶、糜蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶模拟小肠液。2）确定胃期消化时间为1.00 h，小肠期消化时间为5.00 h。