艾纳香挥发油和左旋龙脑在不同叶型及不同部位的分布

夏稷子， 陈 贵， 安 军， 赵 智

(贵州省黔南州食品药品检验所，贵州 都匀558000)

艾纳香为菊科艾纳香属植物艾纳香Blumea balsamifera (L.)DC. 的新鲜或干燥地上部分［1］，是贵州省十大苗药之一［2］，其新鲜叶经提取加工制成的结晶艾片是《中国药典》2010 年版一部收载的品种。艾纳香的主要成分为挥发油，而挥发油的主要成分则是左旋龙脑［3-5］。目前艾纳香资源的利用仍然处于依靠传统经验的状态，对不同叶型不同部位药材，缺乏更为深入的系统研究［6］。艾纳香按其叶型大小可分为大叶艾、小叶艾和马耳艾，但尚未见有对艾纳香3 种叶型及不同部位叶中左旋龙脑和挥发油量的比较检测报道［7］，因此本研究结果将为艾纳香药材的质量控制与资源合理利用，提供新的依据。

1 实验材料

1.1 仪器与试药 岛津-2014 气相色谱仪(日本岛津公司);岛津气相色谱工作站，AL204 型电子天平(Mettler Toledo);SK5200HP 型超声波清洗仪(KUDOS);H-1650 型高速离心机(长沙湘仪离心机有限公司)。左旋龙脑对照品(中国食品药品检定研究院，批号110881-200706)，水杨酸甲酯(分析纯)，乙酸乙酯(分析纯)。

1.2 供试样品 艾纳香样品采集自贵州省罗甸县，经贵阳中医学院何顺志教授鉴定，为菊科艾纳香属植物艾纳香Blumea balsamifera (L)DC 的新鲜或干燥地上部分。样品采集时间均为2013 年12 月上旬，受试样品为阴干的叶。

2 方法与结果

2.1 左旋龙脑测定［8-9］

2.1.1 GC 色谱条件 PEG20M (10%)色谱填充柱(2 m×3 mm×2 mm);载气为氮气;燃气为氢气;FID 检测器;柱温150 ℃;检测器温度200 ℃。

2.1.2 对照品溶液制备 精密称取左旋龙脑对照品适量，加内标溶液(水杨酸甲酯2.5 mg/mL)制成每1 mL 含0.4 mg 的对照品溶液。

2.1.3 供试品溶液的制备 称取艾纳香样品2 g置锥形瓶中，加入内标溶液 (水杨酸甲酯2.5 mg/mL)10 mL，称定质量，超声提取30 min，放冷，用乙酸乙酯补足减失的质量，离心取上清液作为供试品溶液。取对照品溶液与供试品溶液各1 μL，注入气相色谱仪测定。采用内标法，计算样品中左旋龙脑含有量。艾纳香不同叶型和不同部位样品的测定结果见表1、表2，提示艾纳香不同叶型间左旋龙脑的量没有显著性差异，而艾纳香不同部位间中上部位叶左旋龙脑的量明显高于下部叶。

表1 艾纳香不同叶型中左旋龙脑量Tab.1 Einar centre-left spin borneol contents in different leaf shapes

表2 艾纳香不同部位叶左旋龙脑量Tab.2 Einar sinistral borneol contents at different positions of the fragrance

2.2 挥发油测定［10］取艾纳香样品适量，称定质量，照《中国药典》2010 年版一部附录X D 挥发油测定法项下测定［11］，艾纳香不同叶型和不同部位叶样品的挥发油测定结果见表3、表4，提示艾纳香不同叶型间挥发油含有量没有显著性差异，而艾纳香不同部位间中上部位叶挥发油含有量明显高于下部叶。

表3 艾纳香不同叶型挥发油含有量Tab.3 Einar incense volatile oil contents in different leaf shapes

表4 艾纳香不同部位叶挥发油含有量Tab.4 Einar incense volatile oil contents at different positions of the fragrance

3 讨论

3.1 本研究结果显示，艾纳香不同叶型中左旋龙脑含有量由高到低依次为马耳艾、大叶艾、小叶艾。同一产地不同叶型艾纳香中左旋龙脑含有量间的差值分别为0.1 ～0.6 mg/g，不同产地同一叶型艾纳香，马耳艾中左旋龙脑含有量最高与最低之间的差值为1.7 ～0.04 mg/g。大叶艾中左旋龙脑含有量最高与最低之间的差值为1.5 ～0.01 mg/g，小叶艾中左旋龙脑含有量最高与最低之间的差值为1.5 ～0.01 mg/g，说明同一叶型艾纳香中左旋龙脑含有量差异较大，但3 种叶型间左旋龙脑量在统计学上并无显著性差异。此外发现，马耳艾与小叶艾挥发油含有量接近，而大叶艾挥发油含有量与前二者略有差异，但几者之间在统计学上也无显著性差异。这些结果是否与本实验所采集的样本数量较少有关，还需进一步实验加以证明。值得特别指出的是，艾纳香不同部位叶左旋龙脑和挥发油含有量均为中上部位叶高于下部叶。同一样本茎不同部位叶左旋龙脑含有量最高与最低的差值为1.8 ～0.3 mg/g，挥发油含有量最高与最低的差值为

2.2 ～0.5 mL/100 g，表明不同产地上下不同部位茎叶艾纳香中，挥发油和左旋龙脑的含有量都具有显著性差异，即中上部位叶中挥发油和左旋龙脑的量均高于同一标本茎下部位叶。

3.2 艾纳香含有的挥发油主要成分为左旋龙脑，并含少量桉油精、左旋樟脑、倍半萜及黄酮、香豆精、三萜化合物等［12-13］。本实验结果印证了艾纳香挥发油量与左旋龙脑量间存在的正相关性，即挥发油含有量高的样本其左旋龙脑的含有量相对较高，挥发油含有量低的样本其左旋龙脑的含有量也相对较低。实验结果还显示，艾纳香样品间左旋龙脑成分在挥发油中所占比例明显不同，即不同产地、相同叶型、相同部位或相同产地、不同叶型、不同部位艾纳香中，左旋龙脑含有量差异较大，这可能是因为生长环境如海拔、光照时间、营养、叶片大小、土壤、水分等不同而致挥发油各成分比例不同［14-15］。因此认为，在对艾纳香质量进行评价时，应综合考虑挥发油和左旋龙脑的含有量状况。

3.3 本研究结果表明，茎叶部位不同是造成艾纳香挥发油和左旋龙脑的含有量有显著性差异的主要原因之一，虽然不同叶型艾纳香叶的挥发油和左旋龙脑的量也具有差异，但差异并不十分显著。以往研究中也曾发现，气候地理环境的不同是造成艾纳香中左旋龙脑含有量差异的原因之一［8］。因此，种植地理环境的选择就显得尤为重要，应首选马耳艾叶型和中上部位叶等挥发油量和左旋龙脑量都高表达的产株和产地。由于马耳艾叶片小产量低，种植和加工部门大多采用大叶艾这一高产量的叶型。但我们认为在选苗研究中，也应考虑对马耳艾叶型和中上部位叶等高表达产株进行基因改造，以增大增多相应叶型和部位的叶片，提高艾纳香药材有效成分的产量。本实验对艾纳香不同叶型、不同部位叶中挥发油和左旋龙脑测定，将有利于筛选出挥发油和左旋龙脑的量都高的药材叶型及部位，为艾纳香GAP 种植基地筛选优良种源提供科学指导。

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