联合检测支气管肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子α 及人转化生长因子β1 的临床意义

于 露，黄 江，刘跃建

(四川省医学科学院·四川省人民医院呼吸内科，四川 成都610072)

近年来，细胞因子和生长因子与肺纤维化的关系的研究越来越得到学者们的关注，20 余种细胞因子和生长因子被证实与肺纤维化相关［1］。肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α，TNF-α)和转化生长因子β1(transform growth factor β1，TGF-β1)正是其中比较重要的两个炎症细胞因子。我们检测了结缔组织疾病所致间质性肺疾病(interstitial lung disease with connective tissue disease，CTD-ILD)患者、其他病因所致的间质性肺疾病(NCTD-ILD)患者和健康体检者支气管肺泡灌洗液(BALF)中TNF-α、TGF-β1 水平，探讨其临床意义，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 2010 年6 月至2011 年5 月在四川省人民医院住院及门诊诊治的13 例CTD-ILD 患者(CTD-ILD 组)，包括系统性红斑狼疮所致间质性肺疾病(SLE-ILD)患者6 例，均为女性，年龄(26．5±5．1)岁;类风湿性关节炎所致间质性肺疾病(RAILD)患者5 例，男1 例，女4 例，年龄(48．2±10．3)岁;系统性硬化所致间质性肺疾病(SSc-ILD)患者2例，均为女性，年龄(48．5±5．2)岁。NTCD-ILD 患者12 例(NCTD-ILD 组)，包括特发性肺纤维化(IPF)患者10 例，男5 例，女5 例，年龄(57．3±4．7)岁;非特异性间质性肺炎(NSIP)患者2 例，男1 例，女1例，年龄(55．3±3．7)岁。同期健康体检者(对照组)21 例，男12 例，女9 例，年龄(48．5±8．7)岁。SLEILD 患者均符合2009 系统性狼疮国际协作组(SLICC)修改的美国风湿病学会系统性红斑狼疮分类标准［2，3］;RA-ILD 患者均符合2010 年美国风湿病学会联合欧洲抗风湿病联盟的类风湿关节炎分类标准［4］;SSc-ILD 患者均符合2010 年风湿病学会联合欧洲抗风湿病联盟对系统性硬化的诊断标准［5］。ILD 诊断均符合2002 年美国胸科协会(ATS)和欧洲呼吸协会(ERS)制定的结缔组织病相关ILD 的缺乏肺活检的诊断依据［6］。NTCD-ILD 患者均符合2002 年美国胸科学会(ATS)和欧洲呼吸学会(ERS)对IPF 诊断达成的国际共识［7］;NSIP 患者依靠临床-影像学诊断。对照组纳入标准:体检发现肺外周孤立小结节而无症状者，长期随访结节稳定无变化，临床表现:无发热、咯黄痰等炎症表现，肺部听诊未闻及啰音，辅助检查:血象正常，胸片检查无明显炎症表现，支气管镜下支气管黏膜表现为正常。排除标准:①急性肺部感染、活动性咯血及既往有肺结核病史者;②肿瘤患者;③严重心、肝、肾疾病，妊娠患者，精神病患者;④不符合诊断标准及纳入标准者，以及临床资料不完整，影响诊断者。

1.2 方法

1.2.1 标本采集 研究对象于术前6 小时禁饮、禁食，术前以2%利多卡因做局部雾化吸入麻醉，使用日本Olympus 公司生产的BF-260 型电子支气管镜，将支气管镜沿鼻道缓慢插入患者气管，取单侧病变最严重处作为灌洗部位，将支气管镜的前端嵌入段或亚段开口，经活检孔快速注入37 ℃无菌生理盐水。每次25 ml，总量100 ml，用负压吸引，回吸收量一般为注入液量的40% ～60%［8］。

1.2.2 BALF 中TNF-α、TGF-β1 的检测 使用深圳欣博盛生物科技有限公司生产的TNF-α、TGF-β1 试剂盒，两个实验均采用双抗体夹心ELISA 方法，检测BALF 中TNF-α、TGF-β1 水平。

1.3 统计学方法 应用SPSS 19．0 统计软件对所有数据进行分析。数据以均数±标准差表示，多组样本均数的比较采用方差分析及SNK-q检验，P＜0．05 为差异有统计学意义。

2 结果

CTD-ILD 组和CTD-ILD 组两项因子均明显高于对照组，且CTD-ILD 组高于NCTD-ILD 组，差异均有统计学意义(P＜0．05)。见表1。

表1 三组BALF 中TNF-α 和TGF-β1 比较 (pg/ml)

3 讨论

间质性肺疾病可继发于结缔组织疾病，是一类通过自身免疫反应导致机体损伤的全身性疾病(包括类风湿关节炎、系统性硬化病、系统性红斑狼疮，原发性干燥综合征等)，累及到肺泡、肺间质及支气管周围组织造成不同程度的炎症反应及纤维组织增生，称为CTD-ILD［9］。目前研究认为，在众多的细胞因子及生长因子中，TNF-α 及TGF-β1 在肺纤维化的发病过程中起着十分重要的作用，它们在组织损伤早期和组织修复过程中，都促进了肺纤维化的发生发展。TNF-α、TGF-β1 参与间质性肺病形成的始动和维持过程［10］。本研究结果显示:CTD-ILD 组BALF 中TNF-α、TGF-β1 的数值高于NCTD 组，明显高于对照组，提示TNF-α、TGF-β1 在CTD-ILD 患者BALF 中升高更为明显，两项联合检测有助于CTDILD 诊治，但样本数较少，观察时间短，有待大样本临床研究完善。

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