STAT3与雌、孕激素受体在子宫内膜癌中表达的相关性

黄 裕 姜青明 王 冬

子宫内膜癌是妇科常见的恶性肿瘤之一，占女性生殖道恶性肿瘤的20%～30%，近年来其发病率呈世界性持续上升趋势，且发病年龄降低，呈现年轻化［1］。子宫内膜癌在分子水平上的致癌机理尚不完全清楚，它的发生发展是多因素参与的结果，涉及多种癌基因的激发和抑癌基因的失活。STAT3是新发现的核转录因子，能介导机体中多种生长因子信号及细胞因子信号向细胞核中传导，从而影响肿瘤细胞的增殖及分化［2-5］。雌、孕激素是女性生殖系统中的重要激素，当两者水平紊乱时可刺激子宫内膜，从而诱导子宫内膜癌的发生［4］。本文将对子宫内膜癌患者中 ER、PR、STAT3表达情况进行分析，并探讨三者的相关性。

1 材料与方法

1.1 临床资料

选取本院2012年1月至2013年3月收治的子宫内膜癌患者30例为研究对象，患者经病理组织学及影像学诊断证实为子宫内膜癌，所有患者均行手术治疗且术前未接受放化疗。患者年龄为36～76岁，平均年龄为(49.6 ±3.8)岁，患者肿瘤大小为0.8～5.9 cm，平均大小为(2.8±1.4)cm。病理学分级:G1级10例，G2级12例，G3级8例。FIGO临床分期(2009年):Ⅰ期11例，Ⅱ期10例，Ⅲ期8例，Ⅳ期1例;其中淋巴结转移18例。选取同期行普通查体的健康妇女30例为对照组，年龄为21～78岁，平均年龄为(48.8±4.2)岁。

1.2 方法

采用免疫荧光组化法检测2组子宫内膜组织中ER、PR、STAT3的表达。兔抗人STAT3多克隆体购于福州迈新生物技术公司，ER、PR鼠抗人多克隆抗体购于北京金桥生物技术公司。以1∶150的浓度将兔抗体STAT3多克隆体稀释，ER、PR鼠抗体多克隆抗为即用型。ER、PR采用EDTA热修复处理20 min，STAT3采用柠檬酸缓冲液于高压锅中热修复处理2 min后采用冷水洗涤，并采用PBS缓冲液对样品进行冲洗，随后依次在试样板中加入一抗、二抗以及DAB进行显色反应。经苏木精复染后采用乙醇对样本脱水并制成中性树胶封片，并与已知的阳性切片进行对比，阴性对照则采用PBS缓冲液替代一抗的样本进行参照。

1.3 免疫组化结果的判断

①ER、PR阳性表达为棕黄色颗粒见于细胞核内，STAT3阳性表达为棕黄色颗粒见于细胞质及细胞核内。②在倍数为100的显微镜下观察细胞着色情况，根据着色程度由轻至重可分别记为0、1、2、3。随机选取5个视野点，采用倍数为400的显微镜分别对5个视野进行观察，每个视野进行细胞计数，并计算细胞的阳性百分比(以500个细胞作为一组计算单位)，细胞阳性百分率:1为＜10%，2为≥10%～50%，3为 ＞50%。积分计算:①与②计算所得的分值相乘。积分:0分为阴性“－”，1～3分为弱阳性“+”，4～6分为中度阳性“++”，7～9分为强阳性“+++”［5］。

1.4 统计学分析

应用SPSS17.0软件进行统计学分析，计数资料采用百分比表示;组间计数资料的比较采用χ2检验，相关性采用单因素分析，P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 ER、PR、STAT3 阳性表达情况分析

子宫内膜癌组织中ER、PR、STAT3阳性表达率分别为 73.33%(22/30)、80.00%(24/30)、76.66%(23/30)，显著高于对照组的 10.00%(3/30)、26.67%(8/30)、16.67%(5/30)，组间差异均有统计学意义(P＜0.05)，见表1。

表1 ER、PR、STAT3阳性表达情况分析(例，%)

2.2 子宫内膜临床病理特征与ER、PR、STAT3阳性表达的关系

子宫内膜癌中STAT3、ER表达均与肿瘤临床分期、病理分级、淋巴结转移有关(P均＜0.05);而PR则与临床分期及病理分级有关(P均＜0.05)，见表2。

2.3 STAT3与ER及PR相关性分析

经相关性分析可知，STAT3与ER激素呈正相关(γ =0.452，P=0.000)，与 PR 激素无相关(γ =0.1378，P=0.071)。

3 讨论

研究表明，子宫内膜癌的发生及进展与原癌基因的激活、抑癌基因失活及受体异常有关，这些异常因素可导致细胞信号传导通路受阻，使得正常细胞的血管生成受到影响，促进癌细胞血管生成，从而促进癌细胞分化、生长［6］。

STAT3具有促进细胞增生、抑制细胞凋亡的作用，参与机体肿瘤的生成、发展及凋亡。研究证实细胞因子信号的转导主要是通过JAK/STAT途径完成的，JAK信号转导以及STAT3途径在细胞因子传导过程中起重要作用［7］。STAT3是重要的核转录因子，主要存在于细胞质中，当机体肿瘤被激活后，其与肿瘤DNA结合，并通过酪氨酸磷酸化途径诱导丝氨酸激酶及YAK，调控靶基因，最终调控细胞的增生、分化、凋亡。在正常生理状况下，STAT3的激活状态持续的时间非常短，但对正常细胞生理功能起到重要的作用。大量研究表明肿瘤细胞中STAT3的活性显著高于正常组织细胞，在胃癌、乳腺癌、恶性黑色素瘤等恶性肿瘤中均可见STAT3的表达，提示STAT3表达异常与肿瘤的发生、发展有密切关系。朱丽霞等［8］采用免疫组化法测定子宫内膜组织中STAT3的表达情况，发现子宫内膜癌患者中STAT3阳性表达率为64%，而对照组子宫内膜组织中STAT3仅表达20%。

表2 临床病理特征与ER、PR、STAT3阳性表达的关系(例，%)

本研究中30例子宫内膜癌患者中共发现23例患者STAT3表达为阳性，总阳性表达率为76.67%，显著高于正常子宫内膜组织，与肿瘤临床分期、病理分级及淋巴结转移显著相关，而与患者年龄、肿瘤大小相关性不显著，提示STAT3可能参与子宫内膜癌的生成及转移过程。

目前研究表明［9］，雌孕激素的过度分泌可刺激子宫内膜增生，通过测定ER、PR水平可有效判断子宫内膜增生程度，ER、PR水平的上升与子宫内膜癌发生有密切关系。雌、孕激素受体传导信号在子宫内膜癌的发展过程中有重要调控作用，ER属于激素核受体家族中的一员，而PR则属于类固醇激素受体家族成员。类固醇激素可直接通过核膜及细胞膜与细胞核内受体结合，并能通过转录因子对癌基因进行调控及表达［10］。周虹等［11］认为，在激素的作用下可刺激子宫内膜增生，萎缩性子宫内膜尽管失去激素作用基础，但在低激素水平刺激下可导致腺体活性过度，从而促使子宫内膜癌的发生。廖化梅等［12］认为ER、PR缺乏是引起子宫内膜癌发生的独立危险因素，ER、PR可作为判断子宫内膜癌恶性程度的预测指标之一。本研究中子宫内膜癌组织中 ER、PR阳性表达率分别为73.33%、80.00%，ER 表达与肿瘤临床分期、病理分级、淋巴结转移有关，而PR则与临床分期及病理分级有关，研究结果与相关文献报道一致。同时研究发现，ER、PR表达水平越低，肿瘤恶性程度越高，分化程度越低，患者预后越差。

近年相关研究表明［13］，雌激素可激活子宫内膜癌患者中ER表达，并能通过非核转导激活STAT3表达。本研究中STAT3与ER激素呈正相关(γ=0.452，P=0.000)，而与 PR 激素无相关(γ =0.1378，P=0.071)。通过上述研究可推测雌激素(ER)的调控与STAT3的表达关系密切，雌激素通过促进胞质中STAT3发生磷酸化激活，转导至胞核内发挥生物功能。而这一过程与PR无相关性，提示PR阴性表达的子宫内膜癌患者还可能通过其他靶底物以不同机制参与肿瘤的发生、发展，尚需探索新的研究方向。

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