张士霞,张建涛,张 楠,王洪斌
(东北农业大学动物医学学院,黑龙江 哈尔滨150030)
动物腹腔镜技术已经被兽医们所接受,其应用范围越来越广,所用来进行的手术操作也趋向于复杂,已经由起初简单的动物腹腔脏器观察与取样,发展到对犬、猫小动物和马、牛等大动物进行临床疾病诊疗和外科手术操作[1]。随着临床腹腔镜手术的广泛开展,与之相关的基础研究已经逐渐成为人们关注的焦点。手术对机体的影响不仅是切口创面、解剖平面和器官切除引起的创伤,而其主要问题是术后肝肾功能的影响。在人类医学领域,腹腔镜手术对人体肝肾功能的影响已有一些报道[2-3],但在兽医学领域,相关研究还相对比较滞后,现将犬腹腔镜结肠固定术对肝肾功能的影响报告如下,并和开腹结肠固定术进行对比,为腹腔镜在兽医临床的应用,提供理论依据,并填补动物腹腔镜手术在基础研究中的空白。
1.1 试验动物 12条本地杂种犬,雌雄兼有,体重为15~25kg,年龄1~2岁,临床和实验室检验健康,常规免疫和驱虫。随机分为两组:腹腔镜结肠固定组(Laparoscopic colopexy,LC)和开腹结肠固定组(Open colopexy,OC)。
1.2 试验器材 常规手术器械,腹腔镜手术仪器和器械,Datex重症监护仪和呼吸监护仪。
1.3 试验试剂 犬眠宝、犬醒宝;硫酸阿托品注射液;氨苄西林钠、生理盐水;新洁尔灭、甲醛、高锰酸钾;天门冬氨酸氨基转移酶试剂盒、丙氨酸氨基转移酶、碱性磷酸酶试剂盒、肌酐试剂盒、尿素氮试剂盒。
1.4 手术术式 试验犬手术前禁食12h,禁水6h,手术部位大范围剃毛和消毒。硫酸阿托品0.03mg/kg体重剂量,皮下注射。15min后,犬眠宝0.15mL/kg体重剂量,肌肉注射,实施全身麻醉,仰卧保定。气管插管,呼吸监护仪和循环监护仪全程监护。由同一组人员来完成两种不同术式的手术操作。
1.4.1 腹腔镜结肠固定术 采用三套管法完成手术操作。手术主要分为四步。首先建立气腹,气腹压维持在10mmHg;然后进入套管和器械,一个腹腔镜套管,两个器械套管,腹腔镜套管进入腹腔镜,器械套管进入腹腔镜无损伤抓钳和持针器;再后是结肠的固定,将结肠和腹壁结节缝合在一起,间断缝合6针,共2排,每排3针;最后是闭合腹腔,4号和7号不可吸收缝线结节缝合穿刺口。
1.4.2 开腹结肠固定术 手术主要分为3步。首先是结肠的暴露,腹中线切口,脐下8~10cm,切开皮肤、腹膜打开腹腔,于膀胱底部探察降结肠,并拉出体外;然后是结肠的固定,于结肠预固定处两端做牵引线,在牵引线范围内切开结肠浆肌层3~4cm。预将降结肠固定于腹中线左侧2.5cm处,切开此处的腹膜、腹斜肌和腹横肌,最后用2-0号可吸收缝线,将结肠切口两侧分别和腹壁对应切口的两侧连续缝合在一起;最后是闭合腹腔,4号不可吸收缝线连续缝合腹膜和肌肉,7号不可吸收缝线结节缝合皮肤。
1.5 样本采集与处理 两组试验犬均于术前、术后即刻及术后第1、3、5、7天清晨喂食前抽取前肢静脉血2 mL,置于5mL的真空储血管中静置30min,待血液自然凝固3 000r/min(4℃)离心10min后,吸取上层血清分装于1.5mL离心管中,置于-80℃低温冰箱保存。检测天门冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸氨基转移酶、碱性磷酸酶、肌酐和尿素氮。
1.6 统计分析 用SPSS13.0统计软件包进行数据的统计分析,差异显著性分析采用单因素方差分析(one-way ANOVA),数据以均数±标准差(±SD)表示。
2.1.1 天门冬氨酸氨基转移酶(AST)在术后即刻、术后1d、5d和7d,两组间AST变化差异不显著(P>0.05)。术后3d,腹腔镜组与开腹组 AST变化差异显著(P<0.05)。在腹腔镜组,AST呈先升高后降低的趋势,变化幅度不大。在术后1d显著升高(P<0.05),术后1d达到最高值,之后逐渐下降,术后7d基本恢复至术前水平。与术前相比,术后1d、3d差异极显著(P<0.01),其他时间点均差异不显著(P>0.05)。在开腹组,AST变化趋势和开腹组相似,也于术后1d达到最高,之后逐渐下降。与术前相比,术后即刻和术后1d差异显著(P<0.05),其他时间点均差异不显著(P>0.05)。见表1。
表1 LC和OC对犬AST的影响 (±SD,n=6)(U/L)
表1 LC和OC对犬AST的影响 (±SD,n=6)(U/L)
注:组间比较/组内比较;大写字母完全不同为P<0.01,小写字母完全不同为P<0.05。下表同
术前 术后即刻 术后1d 术后3d 术后5d 术后7d腹腔镜组 24.50±6.79 34.63±9.71 47.11±5.88 45.23±8.33 38.40±8.25 29.45±6.68 Aa/Aa Aa/Aa Aa/Bb Aa/Bb Aa/Ab Aa/Aa开腹组 18.14±6.09 35.10±9.62 34.16±9.33 27.09±10.20 25.21±4.26 25.44±4.30 Aa/Aa Aa/Ab Aa/Ab Ab/Aa Ab/Aa Aa/Aa
2.1.2 丙氨酸氨基转移酶(ALT) 各时间点两组间ALT变化差异不显著(P>0.05)。在腹腔镜组,ALT同样也呈先升高后降低的趋势。在术后1d达到最高,之后逐渐下降,直到术后7d仍没有恢复至术前水平。与术前相比,各时间点均差异不显著(P>0.05)。开腹组的变化趋势与腹腔镜组相同,组内各时间点与术前相比均差异不显著(P>0.05)。见表2。
表2 LC和OC对犬ALT的影响 (±SD,n=6)(U/L)
表2 LC和OC对犬ALT的影响 (±SD,n=6)(U/L)
术前 术后即刻 术后1d 术后3d 术后5d 术后7d腹腔镜组 29.77±5.83 55.02±17.32 61.36±22.76 59.80±28.78 61.10±38.23 49.58±19.62 Aa/Aa Aa/Aa Aa/Aa Aa/Aa Aa/Aa Aa/Aa开腹组 32.23±6.42 40.65±2.94 42.46±4.70 35.47±1.19 34.43±2.50 34.17±6.25 Aa/Aa Aa/Ab Aa/Ab Aa/Aa Aa/Aa Aa/Aa
2.1.3 碱性磷酸酶(ALP) 各时间点两组间ALP变化差异不显著(P>0.05)。在腹腔镜组,ALP在术后1d显著升高(P<0.05),并且术后1d达到最高,之后逐渐下降,直到术后7d基本恢复至术前水平。与术前相比,术后1d差异显著(P<0.05),其他时间点均差异不显著(P>0.05)。在开腹组,ALP先升高后降低,术后1d达到最高,之后逐渐降低。各时间点与术前相比均差异不显著(P>0.05)。见表3。
2.2.1 肌酐(Cr) 各时间两组间Cr变化差异不显著(P>0.05)。在腹腔镜组,Cr呈先升高后降低的趋势,在术后1d达到最高值,之后逐渐下降,术后3d基本恢复到术前水平。相对于术前,术后1d差异显著(P<0.05),而其他时间点均差异不显著(P>0.05)。开腹组的变化趋势与腹腔镜组相同,组内各时间点与术前相比均差异不显著(P>0.05)。见表4。
表3 LC和OC对犬ALP的影响 (±SD,n=6)(U/L)
表3 LC和OC对犬ALP的影响 (±SD,n=6)(U/L)
术前 术后即刻 术后1d 术后3d 术后5d 术后7d腹腔镜组 133.77±34.78 171.40±18.03 220.88±58.27 168.96±46.05 140.36±41.45 128.88±39.30 Aa/Aa Aa/Aa Aa/Ab Aa/Aa Aa/Aa Aa/Aa开腹组 141.86±76.72 167.64±81.48 189.84±77.84 164.06±64.94 142.05±64.78 142.61±62.20 Aa/Aa Aa/Aa Aa/Aa Aa/Aa Aa/Aa Aa/Aa
表4 LC、LAC和OC对犬Cr的影响 (±SD,n=6)(umol/L)
表4 LC、LAC和OC对犬Cr的影响 (±SD,n=6)(umol/L)
术前 术后即刻 术后1d 术后3d 术后5d 术后7d腹腔镜组 52.63±16.08 66.67±10.53 85.38±16.58 53.80±33.16 51.46±8.83 53.80±4.05 Aa/Aa Aa/Aa Aa/Ab Aa/Aa Aa/Aa Aa/Aa开腹组 56.14±7.02 63.16±12.15 65.50±4.05 56.14±7.02 53.80±17.31 50.29±10.72 Aa/Aa Aa/Aa Aa/Aa Aa/Aa Aa/Aa Aa/Aa
2.2.2 尿素氮(BUN) 各时间点两组间BUN变化差异不显著(P>0.05)。在开腹组,BUN同样也呈先升高后降低的趋势,术后1d达到最高,之后逐渐下降,术后7d基本恢复到术前水平。相对于术前,术后1d差异极显著(P<0.01),而术后其他时间点均差异不显著(P>0.05)。在开腹组,BUN也于术后1 d显著升高(P<0.05),之后逐渐下降,其他时间点与 术前相比差异不显著(P>0.05)。见表5。
表5 LC和OC对犬BUN的影响 (X±SD,n=6)(mmol/L)
3.1 手术对肝功能的影响 腹腔镜手术中肝功能的改变与气腹大小,气腹持续时间的长短,体位,电热损伤等因素有关。Van Goethem等[4]的研究认为,腹腔镜手术后肝功能改变与术中过度电灼,损伤肝组织有关。周正东等[5]也认为,电热损伤局部肝组织和肝外胆管的热电效应是术后肝功能变化的主要原因。嵇武等[6]研究表明,CO2气腹对兔肝功能有明显的影响,表现为肝酶的升高,此种作用与气腹压力的高低、作用时间长短相关。本试验中,LC组术后AST、ALT、ALP均迅速升高,均于术后第1天达到高峰,AST、ALP与术前相比差异显著,ALT与术前相比没有显著性差异。这与Kotak等[7]报道的LC术后AST和ALT都有一定程度的上升是一致的。气腹后3d,肝酶有所下降,但大部分指标未恢复正常。肝酶在术后的变化说明腹腔镜手术改变了肝脏的灌注、影响了病人的肝功能。OC组肝酶也于术后1d达到高峰,变化趋势基本与LC组相似。说明LC术后肝功能的变化几乎与OC组没有差异。
3.2 手术对肾功能的影响 CO2气腹对肾功能的影响与CO2的吸收和腹腔内压力(IAP)状态相关。目前CO2气腹对肾功能影响的报道相对较少,吴越等[8]在腹腔镜胆囊切除术中不同气腹压力对肾功能影响的对比观察中报道,肾功能正常者在低压和高压气腹状态下,术前术中肾功能比较差异无显著性。郁兆存等[9]研究报道,术后肾功能变化与气腹压力和气腹持续时间明显相关。本试验表明,LC组术后BUN和Cr均升高,二者均于术后第1天即达到高峰,且显著高于术前水平。术后第3天逐渐下降,且BUN和Cr于术后第7天即恢复到术前水平。这与郁兆存等报道的4kPa气腹2h术后第1天BUN、Cr均升高,气腹后第3天有所恢复,第5天恢复至气腹前水平的报道基本一致,也与嵇武等[10]报道的LC术后肝肾功能下降,在术后1~3d比较明显,7d左右恢复正常是一致的。OC组术后BUN和Cr也升高,但由于气腹时间较短和未气腹,术中各时间点与术前相比均差异不显著。肾功能指标各时间点两组之间相比差异不显著,说明两种手术方法对肾功能的影响没有显著差异。
3.3 结语 我们认为在本研究条件下,腹腔镜结肠固定术可引起犬的AST、ALT、ALP、BUN、Cr短暂的、可逆性增高,短期内可恢复正常,对远期肝肾功能无影响。LC手术与OC手术相比对肝肾功能的影响没有显著差异。
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