复方醋酸氯己定凝胶的制备和质量控制

张玉叶 刘光斌 刘燕珺 刘效栓

（1 嘉峪关市酒钢医院，甘肃 嘉峪关735100；2 嘉峪关市食品药品检验所；3 甘肃省中医院，甘肃 兰州730000）

复方氯己定凝胶是我院自行研制的治疗烧伤的外用制剂，主要由醋酸氯己定、盐酸达克罗宁、薄荷脑、曲安奈德等用高分子材料甲基纤维素4500制成的凝胶剂。该凝胶剂具有抗感染、止痛、清凉、预防瘢痕形成的作用。临床上用于烧伤、烫伤的治疗效果满意。 现将其制备工艺和质量控制方法报道如下。

1 材料

1.1 仪器

LC-2010AHT 型高效液相色谱仪（日本岛津）、岛津LC solution 工作站；AUY220 电子分析天平（日本岛津）；756 紫外可见分光光度计（上海奥谱勒仪器有限公司）；PHS-3C 型酸度计（上海雷磁仪器厂）；GQ-105 型管式高速离心机（上海市离心机厂研究所）。

1.2 药品与试剂

1.2.1 标准品 醋酸氯己定（原中国药品生物制品检定所，批号100183-201003，含量为96.2%）；盐酸达克罗宁对照品（原中国药品生物制品检定所，批号100423-201102，含量为99.8%）。

1.2.2 药品 醋酸氯己定（锦州制药一厂，批号111005），盐酸达克罗宁（上海轻工实验厂，批号20110306），曲安奈德（上海第十二制药厂，批号090618），薄荷脑（黄山天目薄荷药业有限公司，批号111104）。

1.2.3 化学试剂 甲醇、乙腈为色谱纯，甘油、甲基纤维素4500、乙醇、聚山梨酯80 均为药用规格，其他试剂为分析纯。

2 处方与制备

2.1 处方

盐酸达克罗宁10 g，醋酸氯己定5 g，薄荷脑6 g，曲安奈德0.5 g，甲基纤维素4500 20 g，甘油100 g，聚山梨酯80 30 g，乙醇适量，水适量。

2.2 制备

取盐酸达克罗宁和聚山梨酯80，加入适量水搅拌并微热，使盐酸达克罗宁溶解，将甲基纤维素4500 撒于上述溶液表面，静置24 h，使完全溶胀为均匀凝胶剂。 将醋酸氯己定溶于适量水和甘油的混合溶液中加入上述凝胶中，薄荷脑溶于乙醇中，少量缓慢加入上述凝胶中，边加边搅拌使混合均匀，最后加入曲安奈德，搅拌使混合均匀，加水至足量即得。

3 质量控制

3.1 性状

本品为微黄色半透明、质地均匀细腻的半固体凝胶制剂，稠度适宜，有薄荷香气，涂展性好。

3.2 鉴别

3.2.1 醋酸氯己定 取本品5 g，加水5 mL 搅拌均匀，加硫酸铜试液2 滴，加热，即产生淡紫色糊状物。

3.2.2 盐酸达克罗宁 取本品适量（约含盐酸达克罗宁50 mg），加95%乙醇，超声溶解，加2，4-二硝基苯肼试液5 mL，振摇，显橙色。

3.2.3 薄荷脑 取本品5 g，加冰醋酸1 mL 使溶解，加硫酸6 滴和硝酸1 滴的冷混合液，仅显淡黄色。

3.3 检查

3.3.1 酸碱度 取本品5 g 置烧杯中， 加水25 mL，超声溶解，测得pH 值为5.0 ～7.0 之间[1]。

3.3.2 卫生学检查 按文献[2]方法检验,霉菌、绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌、杂菌等均符合药品卫生标准。

3.3.3 其他 应符合《中国药典》（2010 年版）二部“凝胶剂”附录项下有关的各项规定[1]。

3.4 含量测定

3.4.1 色谱条件 色谱柱Inertsil ODS-SP（150 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相0.5%三乙胺（用冰醋酸调pH 至3.8）-乙腈（68∶32）；流速1.0 mL/min；检测波长270 nm；柱温30 ℃；进样量10 μL。

3.4.2 溶液的制备

3.4.2.1 对照品溶液的制备 取醋酸氯己定、盐酸达克罗宁对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1 mL 含醋酸氯己定、盐酸达克罗宁25.5，51.0 μg的溶液，即得。

3.4.2.2 供试品溶液的制备 取供试品2.0 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加适量甲醇溶解，转移至容量瓶中，加甲醇至100 mL。 摇匀，滤过。 取续滤液2 mL，精密加流动相至10 mL，高速离心（13 000 r/min）5 min，即得。

3.4.2.3 阴性对照溶液的制备 取空白2 g （与供试品同一批次：20120330），精密称定，同3.4.2.2方法制得。

3.4.3 系统适用性试验 分别取对照品溶液、供试品溶液及阴性对照溶液注入液相色谱仪，在上述色谱条件下，醋酸氯己定、盐酸达克罗宁的保留时间分别为4.3，10.2 min， 吸收峰与相邻杂质峰的分离度均大于1.5，阴性对照对供试品测定无干扰。 理论板数按醋酸氯己定和盐酸达克罗宁峰计算均应不低于3 000。 对照品、供试品、阴性对照的色谱图见图1。

图1 复方氯己定凝胶HPLC 图

3.4.4 线性关系考察 精密称取醋酸氯己定对照品10.19 mg 和盐酸达克罗宁对照品20.45 mg，置50 mL 量瓶中，加甲醇适量溶解，并稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液。 精密量取对照品溶液1.0，2.0，3.0，4.0，5.0，6.0 mL，分别置25 mL 量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀。 按上述色谱条件测定峰面积，以进样浓度C（mg/mL）对峰面积A作线性回归，得到2 种成分的线性关系如表1。结果表明， 醋酸氯己定在0.081 52 ～0.407 60 μg范围内呈良好的线性关系；盐酸达克罗宁在0.163 6 ～0.818 0 μg 范围内呈良好的线性关系。

3.4.5 加样回收率试验 取已知含量的供试品（批号20120330）9 份，精密加入低、中、高质量的醋酸氯己定、盐酸达克罗宁对照品，按3.4.2.2 项下操作，制备供试品溶液并按其测定方法测定，结果见表2。

表1 复方醋酸氯已定凝胶中2 种成分的线性关系（n = 5）

3.4.6 精密度试验 取每mL 含醋酸氯己定、盐酸达克罗宁25.5，51.0 μg 的对照品溶液，按上述方法连续进样5 次，结果显示：醋酸氯己定峰面积平均值为444 388，RSD 为0.82 %；盐酸达克罗宁峰面积平均值为1 126 053，RSD 为0.98 %。 结果表明该方法精密度良好。

3.4.7 重复性试验 取同一批次（20120330）的供试品5 份，每份2.0 g，精密称定，按3.4.2.2 方法制备，按上述色谱条件测定，以外标法计算含量，醋酸氯己定、盐酸达克罗宁平均含量分别为4.912 mg/g（RSD=0.88%），9.865 mg/g（RSD = 0.76%）。 结果表明重复性良好。

3.4.8 稳定性试验 取同一批次（20120330）供试品2.0 g，精密称定，按3.4.2.2 方法制备，按上述色 谱 条 件 测 定, 分 别 在0，2，4，6，8，10 h 进 样 分析，测得醋酸氯己定峰面积的RSD 为1.22%；盐酸达克罗宁峰面积的RSD 为1.10%，结果表明，供试品溶液在10 h 内稳定。

表2 回收率测定结果（n = 9）

3.4.9 样品测定 取3 个批次（20120229、20120302、20120330）的供试品（每批号3 份），精密称定，按3.4.2.2 方法制备，按上述色谱条件测定，用外标法分别计算供试品中盐酸达克罗宁和醋酸氯己定的含量，结果见表3。

表3 复方氯己定凝胶含量测定结果（n = 3）

3.5 制剂稳定性试验

3.5.1 离心试验 取3 批供试品各10 g，装入带刻度的离心管中，以3 500 r/min 的转速离心30 min，凝胶无分层现象。

3.5.2 方法 另取3 批供试品均匀装入包装盒内，分别置（48±1）℃恒温箱恒温6 h 和置（－15±2）℃冰箱内24 h 后取出，放至室温后观察，皆未发生分离、沉淀、变色现象。

3.5.3 常温贮存试验 取3 批供试品装入密闭的包装管内留样逐月观察12 个月，因乙醇挥发稠度略有改变，但无霉变等其他变化。含量测定结果符合标准规定，证明本品在1 年内质量稳定。

4 讨论

醋酸氯己定作为消毒防腐剂，对革兰阳性、阴性细菌有很强的抑菌杀菌能力，常用于器械、皮肤和黏膜的消毒，在治疗烧、烫伤时常用其水溶液清洗创面，但由于水溶液附着力低，抗菌效果不能保证。 盐酸达克罗宁为局部麻醉药，对皮肤有止痛、止痒及杀菌作用，对皮肤黏膜穿透力强，作用迅速，局部作用较为持久。 薄荷脑芳香、清凉，有良好的止痒消炎和促渗透作用，并可明显增加外用皮质激素类药物的局部生物利用度。 曲安奈德是人工合成的含氟的长效肾上腺糖皮质激素，具有减轻急性炎症症状和抑制炎症后组织损伤的修复，预防瘢痕形成的作用。在药物组分中由于各成分相辅相成，起到了协同作用，用高分子材料甲基纤维素4500 做凝胶基质，将这几种药物制备成亲水性凝胶剂，不仅使药物易于分散，而且增大了黏度，延长了药物与患部接触时间，并对烧伤创面有保湿、保护作用，能取得较好的疗效。 为了提高产品质量，确保制剂的有效性，在完善制备工艺的同时，建立了药品的质量控制方法。

盐酸达克罗宁与醋酸氯己定在水中都不易溶解，为了提高药物在制剂中的分散度，在制备凝胶剂时加入聚山梨酯80 并加热使盐酸达克罗宁溶解，用水与甘油混合溶剂使醋酸氯己定溶解。薄荷脑不溶于水，用适量乙醇溶解后缓慢加入凝胶剂中。

复方氯己定凝胶是复方制剂，辅料较多，试验中分别采用了甲醇-磷酸盐缓冲液[3-4]、甲醇-水[5]、乙腈-水-冰醋酸-三乙胺[6]等不同种类、比例的流动相。 结果表明：采用0.5%三乙胺（用冰醋酸调pH 至3.8）-乙腈（68 ∶32）为流动相，色谱峰分离度高，两种成分的保留时间比较合适。 文献[3-4]显示，同时测定醋酸氯己定与盐酸达克罗宁含量的检测波长分别为259 nm 和270 nm。 经过试验结果比较，在270 nm 和259 nm 处醋酸氯己定吸收峰无差别，而盐酸达克罗宁峰在270 nm 处吸收更强、峰形更好。

[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典（2010 年版）二部[S].北京：中国医药科技出版社，2010：附录19.

[2] 中华人民共和国卫生部.药品卫生检验方法[M].北京：人民卫生出版社，1990：17，34，41.

[3] 罗东，冉光炳，戴青，等.复方洗必泰漱口液质量分析方法的建立及抑菌作用[J].第三军医大学学报，2007，29（3）：264-266.

[4] 张秉华，郭欢迎，王发，等.复方氯己定地塞米松膜含量测定方法研究[J].西北药学杂志，2011，26（6）：429-431.

[5] 王海英.HPLC 测定醋酸氯己定酊的含量[J].华西药学杂志，2001，16（4）：321.

[6] 杨跃龙.RP-HPLC 法测定复方达克罗宁软膏中主药的含量[J].中国药房，2008，19（4）：294-295.