康复新液对慢性胃溃疡愈合环境和营养的影响

刘童婷，黄秀深*，陈 瑾 黄媛莉

(1.成都中医药大学，四川成都 611137;2.四川好医生攀西药业有限责任公司，四川西昌 615000)

美洲大蠊Periplaneta americana L.属昆虫纲有翅目蜚蠊科，为蠊目中的一个优势种，俗称“蟑螂”，是世界上最古老、繁衍最成功的一个昆虫类群。《神龙本草经》上记载“味咸，寒，有毒。主治瘀血，症坚，寒热，破积聚，喉咽痹。内塞无子，通利血脉”［1］。

现代药理研究发现，其生物制剂康复新液能促进胃肠道溃疡愈合，提高愈合的质量。本实验通过对康复新液对大鼠乙酸烧灼型胃溃疡模型进行干预，旨在探讨康复新液对慢性胃溃疡愈合期胃黏膜修复环境和营养的影响。

1 材料与方法

1.1 试验药物 康复新液，规格:50 mL/瓶，四川好医生攀西药业有限责任公司，批号:090422。盐酸雷尼替丁片，规格:0.15g/片，西南合成制药股份有限公司，批号:091203。奥美拉唑镁肠溶片，规格20 mg/片，阿斯利康制药有限公司，批号:LK8936，分包装批号:0911087。达喜(铝碳酸镁片)，规格:500 mg/片，拜耳医药保健有限公司，规格:116070。

1.2 动物 清洁级SD大鼠，体质量200～220 g，雌雄各半，每组10×8=80只。由成都中医药大学实验动物中心提供，合格证号:川实动管质第8号，检疫后备用。

1.3 试剂 水合氯醛，成都市科龙化工试剂厂，批号:20081206。大鼠血管内皮生长因子(VEGF)试剂盒，RD公司，批号KY01720B。一氧化氮(NO)试剂盒，RD公司批号:8578258。大鼠前列腺素(PGE2)试剂盒，南京建成，批号KY01577B)。谷氨酰胺(Gln)试剂盒，RD公司批号M0132。

1.4 仪器 电子分析天平(Sartorius AG，Bp6181036539型)。可调式移液器(芬兰Finnpipette公司)。酶标定量测定仪(美国ThermoFisher公司VarioskanTM)。高速低温离心机(上海科学仪器厂，TGL-16G)。DY89-2型电动玻璃匀浆机，宁波新芝生物科技股份有限公司。z216MK小型高速台式冷冻离心机，HERMLE。

1.5 方法 SD大鼠按体质量随机分组，分为生理盐水组和造模组，雌雄各半。造模组大鼠浆膜层0.4～0.5 mm处刺入10%醋酸按0.05 mL/只的方法制备胃溃疡模型［2-3］。造模成功后按体质量随机分组，分为乙酸模型组、康复新组、雷尼替丁组、奥美拉唑组和达喜组。术后第2日，康复新组每天灌服1 mL/100 g康复新液，雷尼替丁组每鼠每天灌服50 mg/kg，雷尼替丁，奥美拉唑组每鼠每天灌服6.7 mg/kg奥美拉唑，达喜组每日灌服500 mg/kg，生理盐水组和乙酸模型组每鼠每天等体积灌服生理盐水。连续13 d。

1.5.1 胃组织VEGF、NO、PGE2的水平 末日给药后，禁食不禁饮12 h脱颈椎处死大鼠。暴露腹腔并结扎幽门和贲门，摘取全胃，沿胃大弯剪开后用冰生理盐水冲洗，滤纸吸干，将胃展开平铺于滤纸上，观察注射醋酸溶液相应部位胃黏膜溃疡形成情况，取距溃疡边缘约5 mm处的胃组织4块分别用锡箔纸包裹，－80℃保存。标本0～4℃融化，按质量1∶30加入生理盐水，低温匀浆，2500 r/min 20 min低温离心，取上清。用ELISA法测定，严格按试剂盒说明书操作。

1.5.2 胃黏膜Gln水平 取胃黏膜组织称定质量，按质量1∶30加入生理盐水3000 r/min 10 min低温离心，取上清。用分光光度法测定，按测试盒说明书方法进行检测。

1.5.3 统计分析 统计方法参考新世纪全国高等中医药院校创新教材《中医药统计学与软件应用》，数据处理用统计软件SPSS 13.0进行分析，数据以()表示。

2 结果

2.1 康复新液对胃组织VEGF、NO和PEG2的水平的影响结果见表1。

表1 康复新液对胃组织VEGF、NO和PEG2的水平的影响()

表1 康复新液对胃组织VEGF、NO和PEG2的水平的影响()

注:检测满足正态性和方差齐性，故用LSD检验。与假手术比较，*P＜0.05，＊＊P＜0.01;与模型组比较，#P＜0.05，##P＜0.01

组 别 动物/只 剂 量VEGF/(ng·L －1)NO/(μmoL·L －1)PEG2/(pg·mL －1)假手术 12 同体积222.42 ±20.06245.82±11.32 5.15±0.49 255.87±12.72乙酸模型 9 同体积 222.31±14.24 8.59±0.44＊＊ 224.86±10.77＊＊康复新液 9 5 mL/kg 222.47±15.02 11.43±0.65## 219.16±21.52雷尼替丁 8 50 mg/kg 214.13±17.14 8.95±0.39 253.08±7.73##奥美拉唑 9 6.7 mg/kg 221.91±20.96 6.55±0.61### 246.37±14.70达喜 10 500 mg/kg 216.53±25.89 7.09±0.42###

由表1显示，模型组的胃组织VEGF的水平与假手术组比较无统计学意义(P＞0.05)，有下降的趋势;各治疗组的胃组织VEGF的水平与模型组比较，均无统计学意义(P＞0.05)。

模型组的胃组织NO的水平与假手术组比较有显著性差异(P＜0.01);各治疗组的胃组织NO的水平与模型组比较，奥美拉唑组和达喜组均下降，均有显著性差异(P＜0.01);康复新液组和雷尼替丁组升高，且康复新液组有显著性差异(P＜0.01)。

模型组的胃组织PGE2的水平与假手术组比较有显著性差异(P＜0.01);各治疗组的胃组织PGE2的水平与模型组比较，雷尼替丁组有显著性差异(P＜0.01)，奥美拉唑组有升高的趋势，康复新液组和达喜组无统计学意义(P＞0.05)，有下降的趋势。

2.2 康复新液对胃黏膜Gln的水平的影响 结果见表2。

由表2显示，模型组的胃黏膜的Gln水平与假手术组比较有显著性差异(P＜0.01);各治疗组的胃黏膜Gln的水平与模型组比较，奥美拉唑组和达喜组下降，奥美拉唑组有显著差异(P＜0.05);康复新液组和雷尼替丁组升高，有显著性差异(P＜0.01)，康复新液组疗效强于雷尼替丁组。

表2 康复新液对胃黏膜Gln水平的影响()

表2 康复新液对胃黏膜Gln水平的影响()

注:检测满足正态性和方差齐性，故用LSD检验。与假手术比较，*P＜0.05，＊＊P＜0.01;与模型组比较，#P＜0.05，##P＜0.01

组 别 动物/只 剂量 Gln/(μmoL·g－1)假手术 12 同体积1.06±0.22乙酸模型 9 同体积 1.97±0.53＊＊康复新液 9 5 mL/kg 3.57±0.63##雷尼替丁 8 50 mg/kg 3.53±0.89##奥美拉唑 9 6.7 mg/kg 1.84±0.59达喜 10 500 mg/kg 1.35±0.30#

3 讨论

本实验造模方法采用外源性酸直接腐蚀胃壁，引起胃壁组织坏死脱落，形成局部小范围溃疡。溃疡新生肉芽组织中血管的再生是维持创伤区域的营养供给及细胞外基质沉淀［4］的关键。其中血管内皮生长因子(VEGF)是已知最强的血管生成促进因子，对血管内皮细胞具有专一性，能促进胃肠黏膜上皮细胞增生，增加胃黏膜血流量，维持胃肠道的完整性，在溃疡的发病中起着保护和防御的作用［5］。一氧化氮(NO)是一种胃肠道动力的强抑制性神经递质，通过生理信号的传输调节着全身的血管网络，具有舒张血管，调节血流，促进黏液释放［6］，在维持溃疡周围组织血流、肉芽组织再生和溃疡愈合等方面起着重要作用［7］。前列腺素(PGE2)为目前公认的细胞保护因子，通过抑制胃酸分泌，增加胃黏膜黏液、碳酸氢盐分泌和增加黏膜血流，从而改善微循环，促进胃黏膜修复。谷氨酰胺(Gln)是必须氨基酸，是胃黏膜中糖蛋白的主要构成成分，为胃肠黏膜细胞、成纤维细胞等快速增生细胞提供营养支持［8］，是较好的呼吸染料，是溃疡修复的必要条件。

研究结果表明，大鼠造模后治疗14 d，各造模组胃溃疡局部有炎性细胞侵润、肉芽组织增生、纤维化和胃黏膜再生，组间比较有差异。乙酸模型组NO、PGE2的水平减少，Gln的水平增加，康复新液组和雷尼替丁组NO水平、Gln的水平增加且康复新液增加显著，奥美拉唑组和达喜组均下降。雷尼替丁组和奥美拉唑组PGE2的水平增加，康复新液组和达喜组作用不明显。胃组织中VEGF的水平各组间变化不显著。

胃黏膜防御因素包括:胃黏膜-黏液屏障、碳酸氢盐、细胞再生、前列腺素和表皮因子、黏膜血流等。消化性溃疡的发生是胃溃疡损害因素与防御因素失衡，防御因子减弱是消化性溃疡形成的重要原因［9］。康复新液的有效成分为黏糖氨酸、多元醇类和肽类等活性物质，可通过提高T淋巴细胞数量和活性调节免疫功能［10-11］，加快组织修复，保证溃疡愈合。本实验证实康复新液能通过增加局部溃疡胃黏膜中NO和Gln的水平，保护胃黏膜，为胃溃疡的愈合提供良好的环境和必要的营养支持。有报道显示连用康复新液患者症状缓解及胃镜下溃疡愈合率显著优于单用抑酸药和幽门螺旋杆菌根除药，并且效果优于连用胃黏膜保护剂胶体果胶铋胶囊［12］。提示康复新液作为一种新型的胃黏膜保护剂在胃溃疡治疗中具有相当广阔的应用前景，为康复新液进一步研究提供理论依据。

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