CyclinD1、Cdk4在子宫内膜癌中的表达与意义

冯玉华 林宇静

CyclinD1、Cdk4在子宫内膜癌中的表达与意义

冯玉华 林宇静

目的探讨CyclinD1、Cdk4在子宫内膜癌中的表达与意义。方法应用免疫组织化学，检测20例正常子宫内膜及20例不典型增生子宫内膜和40例子宫内膜癌中的CyclinD1与Cdk 4蛋白的表达情况。结果CyclinD1与Cdk 4的阳性表达在正常子宫内膜、不典型增生子宫内膜和子宫内膜癌中依次增加，组间差异具有统计学意义(P<0.05)，与子宫内膜癌的分化程度，Dukes分期及淋巴结转移呈正相关关系(P<0.05)。结论CyclinD1与Cdk 4蛋白的过度表达可能在子宫内膜癌的发生、发展、浸润及转移中起重要作用，对判断子宫内膜癌的恶性程度具有一定的临床意义，还可能作为一种有价值的肿瘤标志物。

子宫内膜癌; CyclinD1; Cdk 4;免疫组织化学

子宫内膜癌起源于子宫内膜腺体的恶性肿瘤，是最常见的女性生殖系统肿瘤之一，是导致死亡的第三位常见妇科恶性肿瘤，其发病率亦逐年升高，目前仅次于宫颈癌，居女性生殖系统恶性肿瘤的第二位。人体肿瘤是一种细胞周期性疾病，其中细胞周期素D1(CyclinD1)和细胞周期依赖激酶4(cyclindependent kinase 4，Cdk 4)被认为是重要的细胞周期因子。CyclinD1可以和Cdk 4结合形成CyclinD1/ Cdk 4复合物，作为细胞周期的正向调节因子，促进了肿瘤细胞的增殖，从而参与肿瘤的发生、发展。本研究拟检测cyclinD1和Cdk 4蛋白在子宫内膜癌的表达变化，以探讨两者在子宫内膜癌的发生、发展、浸润及转移中的作用。

1 资料与方法

1.1组织标本 选取2005年6月至2012年6月中山大学附属第五医院病理科保存的资料完整的40例子宫内膜癌为实验组，同时选同期20例正常子宫内膜及20例不典型增生子宫内膜作为对照组，全部病例均经手术切除和常规病理证实。

1.2方法 CyclinD1单抗、Cdk4单抗、SP试剂盒及DAB显色试剂盒均购自武汉博士德公司。采用标准化的SP法进行免疫组织化学染色, 同时以PBS代替一抗作空白对照,以已知的结肠癌作阳性对照。

1.3结果判断 以细胞中相应部位出现棕黄色颗粒为阳性细胞。Cdk4、CyclinD1阳性着色定位于细胞核。两名病理医生随机抽取20个高倍视野，按阳性细胞所占百分比并参考着色强度分级如下：(-)：阳性细胞数<10%；(+)：阳性细胞数10%～24%；(++)：阳性细胞数25%以上。

1.4统计学方法 实验数据应用SPSS 13.0软件包, 采用χ2检验,P<0.05有统计学意义。

2 实验结果

CyclinD1在子宫内膜癌组织中阳性表达率24/40(60.0%)与正常子宫内膜组织中阳性表达率2/20(10.0)及不典型子宫内膜组织中阳性表达率7/20(35.0) 对比有显著性差异(P<0.05)。Cdk4在子宫内膜癌组织中阳性表达率26/40(65.0%)与正常子宫内膜组织中阳性表达率2/20(10.0)及不典型子宫内膜组织中阳性表达率8/20(40.0) 对比有显著性差异(P<0.05)。(见表1)

CyclinD1阳性表达与子宫内膜癌分化程度低，Dukes分期晚及淋巴结转移显著相关(P<0.05)，Cdk4阳性表达与子宫内膜癌分化程度低，Dukes分期晚关系密切(P<0.05)，与淋巴结转移关系密切(P<0.05)。见表2。

表1 cyclinD1和Cdk 4蛋白在不同的子宫内膜中的表达情况(例，%)

表2 CyclinD1、Cdk4的表达与临床病理学特征的关系(例，%)

3 讨论

肿瘤被认为是一种细胞周期性疾病，细胞周期存在G1/S期和G2/M期两个关键的调节位点，其中以G1/S位点尤为重要，他可以决定细胞是继续增殖抑或进入G0期还是永久的离开细胞周期进入终末分化及死亡。

Cdk4蛋白是CDKS蛋白家族中重要一员，其含量及活化程度在细胞增殖周期由G1期向S过渡过程中起限速作用。同时Cdk4是一种癌基因[1]，其异常表达可促进肿瘤的发展，与在良恶性肿瘤组织中的表达有明显的差异，提示有作为肿瘤标志物的可能性，为肿瘤的早期诊断提供依据。有研究表明Cdk4在其他肿瘤中有过表达，如膀胱癌，皮肤癌，食管癌，乳腺癌，胰腺癌，肺小细胞癌，脂肪肉瘤，黑色素瘤等。有学者报道，Cdk4能促进乳腺癌的发生，持续高水平的Cdk4蛋白的表达使癌细胞的增殖活性维持在较高的水平，并认为乳腺癌患者有可能从抑制Cdk4蛋白的治疗中获益[2]。Cdk4能特异地与CyclinD1结合形成CyclinD1/Cdk4复合物，引起一系列的G1-S转变和S期行进有关的靶分子的表达，促进细胞完成DNA复制[3]。促进细胞从G期向S期的转化，促进细胞的增殖，从而参与肿瘤的发生、发展，并影响肿瘤的生物学行为。有学者应用免疫组织研究CyclinD1、Cdk4在喉癌中过表达，且阳性表达与肿瘤大小及临床分期明显相关[4]。有报道:CyclinD1和Cdk4不仅参与胰腺癌的发生、发展，且和胰腺癌的临床病理参数及预后有密切的关系[5]。

本研究Cdk4、CyclinD1的表达呈现出明显的趋势性，子宫内膜癌组最高,子宫内膜不典型增生组次之,正常内膜组最低，且差异有统计学意义,表明Cdk4、CyclinD1的过度表达与子宫内膜癌的恶性转化有关，Cdk4、CyclinD1蛋白可能参与子宫内膜由良性演变为恶性的过程。Cdk4、CyclinD1阳性表达与子宫内膜癌分化程度，Dukes分期、与淋巴结转移呈正相关关系，表明Cdk4、CyclinD1的过度表达与子宫内膜癌的恶性转化及侵袭行为有关。从而可以认为CyclinD1和Cdk4不仅参与子宫内膜癌的发生、发展，且和子宫内膜癌的临床病理参数及预后有密切的关系。推测CyclinD1的表达参与子宫内膜癌的发生、发展、侵袭与转移,可以作为早期诊断子宫内膜癌的生物学指标。而Cdk4的高表达,则通过Cdk4途径在子宫内膜癌的发生、发展、侵袭与转移过程中起重要的协同作用，两者相互促进，相互协同，共同影响子宫内膜癌生物学行为。所以,通过连续观测子宫内膜组织中Cdk4、CyclinD1的表达,可能对子宫内膜病变的监测起到一定的作用，可作为临床早期诊断和科学评论肿瘤预后、指导临床治疗的指标。

[1] Hall M, Peters G. Genetic alteration of cyclins, cyclin-dependent kinases，and CDK inhibitors in human cancer. Adv Cancer Res，2006，68：67-108.

[2] Yu Q，S icinska E，Geng Y, Requ irem en t for CDK4 k inase funct ion in breas t cancer. C ancer Cell，2006，9(1)：23-32.

[3] A lad jem M I, Pasa S, Parod i S, M olecu lar in teractionm aps-ad iagramm atic graph ical language for b ioregu latory n et w orks.Sci STKE, 2004, 2004 (222)： 8.

[4] Youy iDong, L i Su i, K atsuyosh i Sugim oto, C ycl in D1-CDK4 com p lex，a possib le critical factor for cell prol iferation and prognos is in laryngeal squam ous cell carcinom as. Int JC ancer(P red.Onco l)，2006，95(4)： 209-215.

[5] 乔文辉, 胜利.Cyclin D1、P53和CDK4蛋白与胰腺癌的相关性, 世界华人消化杂志,2008，16(30): 3460-3463.

CyclinD1andCdk4ProteinsExpressioninEndometrialCarcinomaanditssignificance

FENGYu-hua,LINYu-jing.

PopulationandFamilyplanningservicestationTheFifthHospitalAffiliatedtosunYat-senUniversity,zhuhai,Guangdong519000,China

ObjectiveTo study the expression of CyclinD1and Cdk 4 proteins in endometrial carcinoma and its significance.MethodsThe expression of CyclinD1and Cdk 4 proteins were tested by S-P immunohistochemistry on tissues of normal endometrium (20 cases)，atypical endometrial hyperplasia (20 cases) and endometrial carcinoma (40 cases).ResultsThe positive expression of CyclinD1and Cdk 4 in normal endometrial atypical endometrial hyperplasia and endometrial cancer in turn increase.A statistically significant difference between groups(P<0.05)，And the differentiation of endometrial carcinoma.Dukes staging and lymph node metastasis were positively related(P<0.05).ConclusionCyclinD1、 Cdk 4 and excessive protein expression may be in endometrial cancer occurrence, development, invasion and metastasis plays an important role, the judgment of the endometrial carcinoma malignant degree has a certain clinical significance, but also may be as a valuable tumor markers.

Endometrial cancer； CyclinD1； Cdk 4； Immunohitochemistry

519000 广东珠海斗门区人口和计划生育报务站(冯玉华)；珠海市中山大学附属第五医院病理科(林宇静)

林宇静