规模猪场不同口蹄疫疫苗的免疫效果试验

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(1.浙江大学动物科学学院，浙江杭州 310058；2.杭州市萧山区浦阳镇人民政府；3.杭州市萧山出入境检验检疫局)

猪口蹄疫是由口蹄疫病毒(FMDV)引起的一种急性、热性、接触性传染病，以患猪的口、蹄等部位发生水泡性病症为主要特征，传染性很强，发病率很高。世界动物卫生组织(OIE)将其列为A类动物传染病，我国将其列为一类动物传染病。主要通过免疫接种进行预防。

近年来，由于猪口蹄疫的病原变异、疫苗免疫质量及病原性免疫抑制等因素的影响，在实际生产中普遍存在免疫抗体合格率下降和稳定性较差等问题。为提高猪口蹄疫的免疫效果，杭州市萧山区有关部门通过引进猪口蹄疫O型合成肽疫苗及不同厂家生产的猪口蹄疫(O型Ⅱ)灭活疫苗进行免疫预防。现将不同口蹄疫疫苗的免疫效果试验结果报告如下。

1 材料与方法

1.1试验动物 试验于2012年9-12月在杭州市萧山区某规模猪场进行。选择饲养管理条件良好的健康仔猪134头，按试验要求随机分为6组，即A1、A2、A3组(均采用猪口蹄疫O型合成肽疫苗)及B、C、D组(采用由3家招投标公司生产的猪口蹄疫O型Ⅱ灭活疫苗)。

1.2供试疫苗 猪口蹄疫O型合成肽疫苗，抗原主要成分为2570+7309，由A公司生产；猪口蹄疫(O型Ⅱ)灭活疫苗由政府组织招投标的三家公司(即B公司、C公司和D公司)生产。供试的所有疫苗均在有效期内。

1.3检测试剂 口蹄疫合成肽免疫抗体检测采用VPⅠ结构蛋白抗体ELISA试剂盒，由上海某生物医药有限公司生产；猪口蹄疫灭活疫苗(O型Ⅱ)免疫抗体检测采用正向间接血凝试剂(IHA)，由中国农科院某兽医研究所生产，所用试剂均在有效期内。

1.4试验方法

1.4.1试验分组 选用60日龄健康仔猪12栏共134头，随机分为6组，A1组22头，A2组22头，A3组24头，均采用由A公司生产的猪口蹄疫O型合成肽疫苗免疫；B组22头，C组24头，D组20头，分别采用由B、C、D三家招投标公司生产的猪口蹄疫O型Ⅱ灭活疫苗。免疫程序和剂量见表1。

表1 猪口蹄疫不同疫苗的免疫程序设计

1.4.2采血日龄 分别于90、120、150日龄采血，每次采血2 mL,采集后凝固分离血清并冷冻保存，等全部血样采集完成后一并检测。

1.4.3检测方法 根据周志平等(2008)[1]报道，IHA检测试剂对合成肽免疫抗体很难检出，而对浓缩灭活苗的抗原粒子则有较好的凝集反应，所以对合成肽疫苗采用VPⅠ结构蛋白抗体ELISA试剂进行检测，抗体效价≥26为合格；对猪口蹄疫灭活疫苗采用正向间接血凝法(IHA)进行检测，以抗体效价≥25为合格。

2 结果与分析

2.1猪口蹄疫O型合成肽疫苗的免疫效果观察 详见表2。

表2 猪口蹄疫O 型合成肽疫苗的免疫效果观察

由表2可见，猪口蹄疫O型合成肽疫苗首免后，A1组的抗体合格率较低，但均已超过农业部规定抗体合格率≥ 70%的规定，经二免和三免后，合格率均达到100%。证实使用猪口蹄疫O型合成肽疫苗免疫效果良好。

2.2不同厂家生产的猪口蹄疫O型Ⅱ灭活疫苗的免疫效果观察 详见表3。

表3 不同厂家生产的猪口蹄疫O 型Ⅱ灭活疫苗的免疫效果观察

由表3可见，不同厂家生产的猪口蹄疫O型Ⅱ灭活苗首免后，免疫抗体合格率较低(均低于20%)，但经二免和三免后抗体合格率明显提高，达到农业部规定抗体合格率≥70%的要求，这与朱中武等(2008)[2]报道基本一致，证实猪口蹄疫O型Ⅱ灭活疫苗至少进行二免后才能起到较好的抗体保护效果。

2.3猪口蹄疫不同疫苗类型的免疫效果观察 详见表4。

表4 猪口蹄疫不同疫苗类型的免疫效果观察

由表4可见，无论一免、二免，或三免中，猪口蹄疫O型合成肽疫苗组的抗体合格率均高于猪口蹄疫O型Ⅱ灭活疫苗组，特别是一免后，合成肽疫苗组的抗体合格率已达到农业部规定抗体合格率≥70%的标准，而灭活苗组的抗体合格率则远低于农业部规定标准。但经二免后，抗体合格率明显提高，均达到了农业部规定的抗体合格标准(≥70%)。因此，猪口蹄疫O型合成肽疫苗，一般在肉猪生产中进行一免就可达到良好的免疫效果，而猪口蹄疫O型Ⅱ灭活疫苗则至少进行二免后才能达到良好的保护效果。

2.4猪口蹄疫不同疫苗类型的免疫应激反应比较 详见表5。

表5 猪口蹄疫不同疫苗类型的免疫应激反应比较

由表5可见，临床免疫注射过程中，口蹄疫O型合成肽疫苗的应激反应明显低于口蹄疫O型Ⅱ灭活疫苗，而且尚未出现倒地、全身发紫等严重应激反应。

3 讨 论

3.1经本次试验观察，猪口蹄疫O型合成肽疫苗免疫后的抗体合格率明显高于猪口蹄疫O型Ⅱ灭活疫苗。

国际上检验疫苗免疫效果的方法主要采用人工强毒攻击，本次试验由于受生物安全性条件限制，仅对血样免疫抗体进行检测，且采用两种不同的检测方法，可能对结果会产生一定影响[3-5]，所以能否真正达到相似的攻毒保护率尚待进一步试验确定。

3.2由三家不同厂家生产的猪口蹄疫O型Ⅱ灭活疫苗经二免后，免疫抗体合格率均达到农业部规定的抗体合格率≥70%要求，说明疫苗免疫效果良好，能对猪口蹄疫疫病起到良好的保护作用。

但据试验，三种疫苗的免疫抗体差异较大，由D公司生产的疫苗免疫后血样抗体合格率最高，B公司生产的疫苗经三免后抗体合格率则略有下降，与金大春等(2003)[6]报道不相一致，这可能与试验猪数较少有关，有待进一步研究探讨。

3.3根据兽医技术人员的临床观察，注射猪口蹄疫O型合成肽疫苗后未见严重不良应激反应，这可能与合成肽疫苗的抗原单一、不含异体蛋白等特性有关。

据本次试验，注射灭活疫苗后则有部分猪只出现食欲减退、废食等一般应激反应，严重者则出现倒地、全身发紫等应激反应，这与赵朝美等(2012)[7]报道基本一致，应引起临床兽医技术人员的注意。

综上所述，通过本次试验，对猪口蹄疫O型合成肽疫苗和不同厂家生产的猪口蹄疫O型Ⅱ灭活疫苗进行了抗体效价对比发现，使用合成肽疫苗免疫，进行一免后即能达到良好的抗体保护效果；使用灭活疫苗免疫，则必需二免后，才能达到良好的抗体保护效果。

在实际生产中，疫苗免疫效果受多种因数的影响，进行免疫接种时不仅要根据猪场的实际情况制定科学合理的免疫程序，还要关注猪群中口蹄疫抗体的变化情况，适时抽检，发现问题，及时分析原因，采取补救措施，才能确保猪群始终保持较高的免疫抗体水平。

[1] 周志平,朱晓路,范坤晓等.规模猪场猪口蹄疫O型合成肽疫苗免疫程序检测[J].中国兽医杂志,2009,45(12)：36-38.

[2] 朱中武,鲁杏华,吕晓星等.集约化养猪场口蹄疫免疫程序探讨[J].中国兽医杂志，2008,44(6)：34-35.

[3] 孙宝权,王昌斌,王小新等.猪口蹄疫O型灭活疫苗免疫效果评价[J].养猪,20013,(1)：102-104.

[4] 姜东,周兵,许志成等.猪口蹄疫O型疫苗免疫效果监测分析[J].中国兽医杂志,2011,47(8)：38-40.

[5] 陈伟杰,周彩琴,赵灵燕等.猪口蹄疫抗体不同检测方法的比较分析[J].中国兽医杂志，2010,46(1):23.

[6] 金大春,王跃川,季旭平等.猪口蹄疫免疫程序和抗体水平[J].中国兽医杂志，2003(8):30-31.

[7] 赵朝美,聂文军,张玲琴等.不同口蹄疫O型疫苗免疫效果及检测[J].中国畜牧兽医文摘,2012,(3)：109-110.