杨黄总黄酮分散片的制备及质量控制

张 怡

杨黄即瓦尼木层孔菌(Phellinus Vaninii Ljub)，又名桑黄，属担子菌亚门、层菌纲、非褶菌目、锈革孔菌科、木(针)层孔菌属［1］，有“森林黄金”之美称。杨黄具有抗肿瘤、抗炎、抗血管生成活性等多种药理作用［2-4］，在我国传统中药中用于治疗痢疾、盗汗、血崩等［5］。杨黄总黄酮成分是其抗氧自由基的主要活性部位［5］，目前，国内还没有较好的杨黄总黄酮制剂上市［6］，多是将杨黄经简单处理后作为保健品使用，未发挥其治疗作用。本研究将杨黄总黄酮提取物制成分散片，可减少患者的服药量，且由于分散片兼具口服固体制剂和口服液体制剂的优点，具有分散度高、溶出速度快、吸收快、生物利用度高等优点，对提高疗效、扩大临床应用具有重要意义。

1 仪器与试药

1.1 仪器 TDP型单冲压片机(上海天祥健台制药机械有限公司)，YD-20智能片剂硬度仪(天津大学无线电厂)，UV-2401型紫外分光光仪(日本岛津公司)，F7-2000脆度仪(天津大学无线电厂)，ZB-IB型智能崩解仪(天津大学精密仪器厂)。

1.2 试药 微晶纤维素(MCC)、羟丙甲纤维素(HPMC)、立崩(超级羧甲基淀粉钠)、交联聚维酮(PVPP)、低取代羟丙纤维素(L-HPC)、羧甲基淀粉钠(CMS-Na)均为安徽淮南山河药用辅料有限公司生产;α-乳糖(一水)、淀粉、糊精、硬脂酸镁、无水乙醇、聚维酮K17(PVP K17)均为国药集团化学试剂有限公司产品;杨黄总黄酮提取物为本实验室自制(AlCl3络合法测得总黄酮含量为70.6%)，芦丁对照品购自南京泽朗植提有限公司，含量≥98%。

2 方法与结果

2.1 分散片的制备 准确称取30 g桑黄子实体粉末(过 60目筛)，置烧瓶中，加 70%乙醇900 mL，室温下浸泡12 h后，超声提取30 min，抽滤，残渣再超声提取1次，合并2次滤液，浓缩烘干，得到桑黄总黄酮提取物。称取一定量桑黄总黄酮提取物，加适量填充剂，按等量递增的方法均匀混合，加粘合剂制软材，过16目筛湿法制粒，60℃干燥30 min，过筛整粒，外加崩解剂和适量润滑剂(硬脂酸镁)后压片。控制平均片重约0.25 g，每片含总黄酮约6.5%。

2.2 处方筛选

2.2.1 填充剂的选择 固定粘合剂、崩解剂和压力等条件，选择合适的填充剂，考察MCC、乳糖、淀粉和糊精作为填充剂对分散片崩解时限、崩解时限及硬度的影响，见表1。

由表1可知，MCC作为填充剂的崩解效果最好，但硬度最小;乳糖为填充剂崩解效果不如MCC，但外观光洁完整，可压性好，综合考虑，选用MCC和乳糖混合作为填充剂。不同比例的MCC和乳糖作为填充剂的崩解效果见表2。

表1 填充剂的选择

表2 填充剂比例的选择

2.2.2 粘合剂的选择 粘合剂用量对颗粒粘度和湿度的影响很大，从而影响颗粒的流动性和可压性等重要的物理性质。本文考察了5%PVP K17乙醇溶液、2%HPMC溶液、50%乙醇、10%淀粉浆作为粘合剂对崩解时限的影响。结果显示，5%PVP K17乙醇溶液作为粘合剂时，分散片的崩解时间、颗粒性质、片剂外观、硬度较好。

2.2.3 崩解剂选择 考察 PVPP、L-HPC、CMSNa、立崩用做外加崩解剂压片，崩解时限见表3，考虑崩解时间、外观以及价格因素，选择立崩作为外加崩解剂。崩解剂用量见表4。

表3 崩解剂种类的选择

表4 崩解剂用量的选择

从表4可以看出，立崩用量在一定范围内能够使片剂迅速崩解，但用量多于5%时崩解反而变慢，可能是由于基团的引湿性，导致立崩部分水解后产生胶状物质;也可能是立崩会在水中粘结并在药片表面形成水化膜反而阻止了水分的渗入，延长片剂崩解的速度。

2.2.4 压力的选择 压力的大小决定分散片的硬度，是决定片剂成型性的重要条件。保持处方不变，调整压力大小，考察分散片的崩解时限。结果见表5。

表5 压力大小的考查

结果表明，压力对药片的崩解和外形影响很大。从表5可以看出，压力与崩解时间成正比。

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2.3 处方优化 选择崩解剂用量、填充剂比例和压力为考查因素设计正交实验(表6)，以崩解时间作为指标，筛选制备杨黄总黄酮分散片的最优处方。结果见表7。

表6 因素水平表

表7 正交试验设计及试验结果分析

根据正交试验结果，各因素的影响次序为:A＞C＞B，MCC与乳糖之比影响最大。最佳处方为:A2B3C3，即 MCC∶乳糖为6∶2，立崩用量为 7%，压力大小为3 kg。

2.4 验证试验 按最佳处方与工艺制备3批杨黄总黄酮分散片，考察分散片的外观、硬度、崩解时间。结果所得片剂外观光洁，硬度较好，崩解时间分别为18、16、16 s，表明处方合理、工艺稳定。

2.5 质量控制

2.5.1 含量测定 标准曲线:精密称取芦丁对照品25.0 mg，用70%乙醇溶解并定容于50 mL量瓶中，配成0.5 mg/mL的溶液。分别吸取0.0、0.8、1.6、2.4、3.2、4.0 mL 标准液于 50 mL 量瓶，加入4.0 mL AlCl3溶液，摇匀，加15 mL去离子水后用70%乙醇定容。空白辅料溶液同样处理做空白，30℃水浴10 min，放冷20 min后，在408.20 nm处测定吸光度值。以浓度(μg/mL)为横坐标、吸光度A为纵坐标进行线性回归，得方程:A=0.028 C-0.001，R2=0.999 4，曲线在 1 ～40 μg/mL 范围内线性良好。

杨黄总黄酮分散片含量测定:取杨黄总黄酮部位分散片10片，研细混匀，精密称定细粉0.25 g(约相当于黄酮25.0 mg)于50 mL量瓶，70%乙醇超声后定容，过滤，精密量取续滤液5.0 mL于50 mL量瓶，加70%乙醇定容，精密吸取5.0 mL与5.0 mL 1%AlCl3络合10 min后在408.2 nm波长处测定吸光度。测得片剂总黄酮含量为6.46%，RSD为1.97%。

2.5.2 片重差异 按《中国药典》2010年版一部附录ⅠD规定操作，平均片重为0.248 g，重量限度为±7.5%以内，表明片重差异合格。

2.5.4 脆碎度 按《中国药典》2010年版二部附录ⅤE规定操作，测得失重0.62%，不超过1%，符合规定。

2.5.5 崩解时限 按《中国药典》2010年版一部附录ⅫA操作，测得平均崩解时限为17 s，符合规定。

3 结论与讨论

3.1 试验结果表明，主药含量10%，填充剂为MCC与乳糖(6∶2)，粘合剂为5%PVP K17乙醇溶液，湿法制粒，外加7%立崩和适量硬脂酸镁，压片，压力控制在3 kg，为制备杨黄总黄酮分散片的最佳处方工艺。

3.2 主药含量 参照《中华本草》杨黄日服用量6～15 g，每天服用9片以内，计算得到主药含量10%为宜。

3.3 按照等量递增的方法使药物和辅料能够充分地混合均匀，提高崩解效率。

3.4 单冲压片机压片时，人工操作压力、速度、次数等不同造成的各种干扰使片剂崩解时产生差异，在实际大批量生产过程中，使用的制粒压片机实现自动化、机械化，能生产外形更加美观，崩解更加稳定快速，质量更加符合要求的片剂。

［1］戴玉成，图力古尔.中国东北野生食药用真菌图志［M］.北京:科学出版社，2007:164-166.

［2］Huang HY，Chieh SY，Tso TK，et al.Orally administered mycelial culture of Phellinus linteus exhibits antitumor effects in hepatoma cell-bearing mice［J］.J Ethnopharmacol，2011，133(2):460-466.

［3］Kim BC，Choi JW，Hong HY，et al.Heme oxygenase-1 mediates the anti-inflammatory effect of mushroom Phellinus linteus in LPS-stimulated RAW264.7 macrophages［J］.J Ethnopharmacol，2006，106(3):364-371.

［4］Lee YS，Kim YH，Shin EK，et al.Anti-angiogenic activity of methanol extract of Phellinus linteus and its fractions［J］.Journal of Ethnopharmacology，2010，131(1):56-62.

［5］Shon MY，Kim TH，Nak JS.Antioxidants and free scavenging activity of phellinus baumii(Phellinus of hymenochaetaceae)extracts［J］.Food Chemistry，2003，(82):593-597.

［6］高行恩，史经略.桑黄保健果醋的开发与研究［J］.中国调味品，2008(12):59-61，83.