张黎 杨艳
茶多糖就是从茶叶中提取的茶叶多糖复合物的简称。分离纯化后茶多糖紫外吸收图谱表明,茶多糖存在蛋白质,即茶多糖中多糖与蛋白质呈紧密结合态,因此其化学本质是一类与蛋白质结合在一起的酸性多糖或酸性糖蛋白。茶新梢的粗老叶中含量最高好[1]。近年来一些药理研究表明,茶多糖具有抗氧化[2]、降血糖[3]、降血脂[4]、调节免疫和抗肿瘤[5]、降血压[6]、抗辐射[7]、抗凝血[8]、抗疲劳[9]等作用。本文采用链尿菌素诱导高血糖小鼠模型,研究茶多糖对高血糖小鼠的降血糖降血脂的作用,初步探讨其降血糖的作用机制。
1.1 材料
1.1.1 动物 健康清洁级雄性ICR小鼠(22~24 g),由四川大学实验动物中心提供。
1.1.2 药物与试剂 链脲菌素(sigma);血糖试剂盒(ONETOUCH);血清总胆固醇、甘油三酯/肝糖原含量测试试剂盒(南京建成)。茶多糖自制。
1.2 方法
1.2.1 高血糖模型的制备[10]动物自由摄食预养5 d,小鼠禁食不禁水12 h后,随机抽取10只小鼠设为正常对照组,给予尾静脉注射枸橼酸磷酸缓冲液,其余小鼠尾静脉注射链尿菌素枸橼酸磷酸缓冲液130 mg/kg,于注射5 d后小鼠禁食不禁水12 h后尾静脉血糖试纸测血糖,以血糖值不低于11.1 mmol/L作为造模成功的标准。
1.2.2 分组和给药 造模成功后,除正常对照组外,其余小鼠按血糖值平均分为4组,每组10只,分别为高血糖模型组、茶多糖高、低剂量组和二甲双胍组。正常对照组及高血糖模型组均灌胃给予等量生理盐水,茶多糖高、低剂量组分别灌胃给予茶多糖400 mg/kg、200 mg/kg,二甲双胍组灌胃给予150 mg/kg,所有小鼠给予均为1次/d,连续给药4周。
1.2.3 实验指标测定 给药至14、28 d时,禁食不禁水12 h,取尾部静脉血测量空腹血糖;给药28 d后,禁食不禁水12 h,腹腔注射10%水合氯醛400 mg/kg麻醉,心脏采血,分离血清,测定血清总胆固醇及甘油三酯;再剖腹取全肝,保存至-20℃,备用,届时按试剂盒说明书测定肝糖原。
1.3 统计学方法 数据用均数±标准差(±s)表示,采用SPSS 18.0软件进行统计分析,P<0.05为差异具有统计学意义。
2.1 茶多糖对小鼠空腹血糖的影响 分别取给药前、给药第14 d、28 d空腹血糖值作统计,见表1。与正常对照组比较,高血糖模型组、茶多糖高、低剂量组、二甲双胍组小鼠空腹血糖无论在给药前,还是给药第14 d、28 d均显著的高于正常对照组(P<0.01);与高血糖模型组比较,茶多糖低、高剂量组及二甲双胍组在给药第28 d时均能显著性的降低高血糖小鼠空腹血糖(P<0.05,P<0.01);另外,在给药第14 d,茶多糖高剂量组及二甲双胍组的小鼠空腹血糖与高血糖模型组比较,已显著的下降(P<0.05,见表1)。
2.2 茶多糖对小鼠血清胆固醇、甘油三酯含量的影响 测定给药第28 d小鼠血清胆固醇、甘油三酯含量,做统计,结果见表2。与正常对照组比较,高血糖模型组、茶多糖高、低剂量组、二甲双胍组小鼠血清胆固醇和甘油三酯无论在给药前,还是给药第14 d、28 d均显著的高于正常对照组(P<0.01);与高血糖模型组比较,茶多糖高剂量组能降低血清胆固醇、甘油三酯的含量(P<0.01,P<0.05),二甲双胍组能显著的降低血清总胆固醇(P<0.05,见表2)。
表1 茶多糖对空腹血糖的影响(± s,n=10)
表1 茶多糖对空腹血糖的影响(± s,n=10)
注:与正常对照组比较##P<0.01;与高血糖模型组比较*P<0.05,**P<0.01
images/BZ_84_236_306_2240_405.png4.2±1.2 4.3±1.1 4.4±1.2高血糖模型组 - 13.9±2.4## 16.4±3.1## 19.3±3.1##茶多糖高剂量组 400 13.7±2.2## 14.6±2.1##* 15.8±2.3##**茶多糖低剂量组 200 13.2±2.4## 15.6±2.6## 17.3±2.8##*二甲双胍组 150 13.6±2.3## 13.8±2.5##* 14.1±2.1##**正常对照组-
表2 茶多糖对小鼠血清胆固醇、甘油三酯含量的影响( ± s,n=10)
表2 茶多糖对小鼠血清胆固醇、甘油三酯含量的影响( ± s,n=10)
注:与正常对照组比较##P<0.01;与高血糖模型组比较*P<0.05,**P<0.01
images/BZ_84_236_784_2240_834.png2.7±1.0 0.9±0.3高血糖模型组 - 5.1±1.7## 2.2±0.8##茶多糖高剂量组 400 3.7±1.2##** 1.7±0.7##*茶多糖低剂量组 200 4.6±1.7## 1.8±0.5##二甲双胍组 150 3.9±1.5##* 2.0±0.5正常对照组-##
2.3 茶多糖对小鼠肝糖原含量的影响 将小鼠给药第28 d肝糖原数据统计,见表3。与正常对照组比较,高血糖模型组、茶多糖高、低剂量组、二甲双胍组小鼠肝糖原均低于正常组(P<0.01);与高血糖模型组比较,各组均能升高肝糖原含量,其中茶多糖高剂量组与二甲双胍组升高肝糖原具有显著性意义(P<0.01,见表3)。
表3 茶多糖对小鼠肝糖原含量的影响( ± s,n=10)
表3 茶多糖对小鼠肝糖原含量的影响( ± s,n=10)
注:与正常对照组比较##P<0.05;与高血糖模型组比较**P<0.01
images/BZ_84_236_1550_1198_1600.png32.0±5.3高血糖模型组 - 13.0±2.7##茶多糖高剂量组 400 19.2±2.2##**茶多糖低剂量组 200 14.6±2.7##二甲双胍组 150 22.6±5.5##**正常对照组-
本文采用链脲菌素诱导造成高血糖小鼠模型研究茶多糖降血糖作用,初步探讨其降血糖的作用机制。较多的文献报道茶多糖降血糖作用,如陈建国等[11]报道茶多糖对糖尿病小鼠的血清胰岛素、肝糖原含量显著提高,肝HK、肝PK活力均明显增强,胰岛细胞与肝细胞损伤得到明显的修复,使得胰岛B细胞分泌胰岛素增加,肝脏合成肝糖原增加,葡萄糖氧化分解加快,从而降低血糖。芮莉莉等[12]发现茶多糖能显著改善小鼠葡萄糖耐量,降低血糖、血清胰岛素、血清甘油三酯和果糖胺水平,升高肝糖原。本文研究结果表明茶多糖能显著性降低给药第14 d、28 d空腹血糖及血清总胆固醇、甘油三酯含量,提高肝糖原含量。
因此,本文研究表明茶多糖对链脲菌素诱导的高血糖小鼠具体一定的降血糖降血脂的作用,其可能的作用机制是增加肝糖原含量有一定的关系,但具体如何提高肝糖原含量还待进一步研究。
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