对ELISA乙肝阳性标本做不同方法学对比及结果分析

常志娟 吴鸿燕 蔡定军

(南京军区杭州疗养院海勤疗养区检验科，310002)

对ELISA乙肝阳性标本做不同方法学对比及结果分析

常志娟 吴鸿燕 蔡定军

(南京军区杭州疗养院海勤疗养区检验科，310002)

目的 通过对100例乙肝阳性标本用不同方法学做对比来考察各个性能及差异性。方法 用ELISA法检出的100例乙肝阳性标本作为对照，分别用两种金标法试剂复查作为对比。结果 HBsAg金标试纸条与ELISA法符合率为100%，乙肝五项金标反应板与ELISA法比较阳性符合率分别是HBsAg 95%，HBsAb 99%，HBeAg 100%，HBeAb 81%，HBcAb 98%，其中只有HBeAb的差异有统计学意义(P＜0.05)。结论 ELISA法、金标法对检测乙肝病毒均有较高的敏感性，本试验中两种金标试剂都可做为检测乙肝病毒最快最便捷的途径，只是乙肝五项金标反应板中HBeAb的检出率较低，仍需改进。

乙肝五项；ELISA；金标法；符合率

乙肝五项又称乙肝两对半，包括HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb。乙肝五项指标做为乙肝病毒感染的重要标志，在临床和流行病学调查及健康体检中得到广泛应用。我国乙型肝炎病毒感染率很高，HBsAg携带者已经超过15%，因此选择敏感稳定的实验室检测方法极其重要，为此就将我们实验室常用的两种方法做了比较，现报告如下。

1 材料与方法

1.1 标本来源 选取本院体检人员中用ELISA法检测HBsAg阳性的标本100例。

1.2 试剂与仪器 HBsAg诊断试剂盒胶体金法(后面简称金标试纸条)与乙肝五项检测试剂盒胶体金法(后面简称金标反应板)均由艾康生物技术有限公司提供。ELISA法试剂盒由上海科华生物工程股份有限公司提供。洗板机使用汇松全自动酶标洗板机PW-760。

1.3 检测方法 选取的100例HBsAg阳性标本用金标法两种试剂作对比，结果用SPSS 18.0进行χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果(表1～5)

表1 两种方法3种试剂检测HBsAg结果比较

表2 两种方法检测HBsAb结果比较

表3 两种方法检测HBeAg结果比较

表4 两种方法检测HBeAb结果比较

注：配对χ2检验，P＜0.05

表5 两种方法检测HBcAb结果比较

3 讨论

HBsAg检测以ELISA为标准，金标试纸条符合率100%，金标反应板符合率95%，差异无统计学意义，因此两种试剂均适用于急诊的初步筛查和手术前的应急检测。

HBsAg检测以ELISA为标准，金标反应板中HBsAb、HBeAg、HBcAb比较差异均无统计学意义。只有HBeAb结果差异有统计学意义，与相关报道相符[1]。考虑影响因素主要是ELISA法与金标法检测HBeAb、HBcAb采用竞争法，结果颜色越深表示血清中HBeAb、HBcAb浓度越低，当颜色较浅时，受操作者肉眼辨色差异的影响可能会出现假阴性或者假阳性[2]，这个判断分界点比较难控制。

酶标技术的最大优势在于该法避免了对环境和人体的危害，ELISA法试剂成本低，更适合基层医院使用，但由于该法酶的纯度和反应过程容易受环境因素影响导致其稳定性不好，易造成漏检和假阳性[3]。金标法检测过程简单，快速，方便，实用，但成本也高于ELISA。用金标法检测时，加样量应足量，对阴性结果的观察应尽量延长时间，因为浓度低时会出现先阴后阳的现象[4]。

在日常检验工作中，有时为了尽快出检测结果，常在血液刚凝固时就强行离心分离血清，但在ELISA测定过程中残留的纤维蛋白原及过氧化物酶的细胞成分易造成假阳性结果[5]，所以血液采集后应该使其充分凝固后再离心分离血清检测。

随着科学技术的不断发展，我国的标记免疫学经历了20世纪60年代的放射免疫技术(RIA)，70年代的酶标技术(ELISA)，80年代的化学发光技术(CLIA)，90年代的时间分辨技术(TRFIA)以及现在正在科研中的生物芯片技术。不同的技术都有各自的优缺点，应结合实际需要选择合适的技术。

[1]张志梅，包广杰.金标快速检测板检测乙肝五项指标的应用价值[J].中国当代医药，2010，17(1)：77.

[2]兰忠诚.ELISA法检测血清HBV抗-HBc假阳性的原因探讨[J].中国现代药物应用，2009，3(8)：105.

[3]贾印峰，高娟，贾东辉，等.乙肝五项指标不同检测方法的比较研究[J].济宁医学院学报，2005，28(1)：51-52.

[4]邓春艳，邓海平.固相放射免疫法和胶体金法测定乙肝五项标志物的比较[J].实用预防医学，2011，18(11)：2193-2194.

[5]蒋福国，薛海斌.乙肝五项酶联免疫吸附法检测结果常见影响因素分析[J].中国煤炭工业杂志，2007，10(9)：1057.

1005-619X(2013)06-0520-02

2013-04-08)