闽东畲药芝兰青的GC/MS 研究

杨成梓 李烈辉 何帮剑 黄庆德 何雨琼

1.福建中医药大学药学院，福建福州 350122；2.福建省寿宁县医院，福建寿宁 355500

畲族是个历史悠久的民族，主要分布在福建、浙江、广东、江西等地，其中超过一半的人口分布在福建，闽东地区是福建畲族人口分布最多的地区。畲族同胞在与疾病长期斗争的过程中，积累了不少防治疾病的经验，但由于受畲族只有语言而没有文字的制约，不少验方已经失传。因此，保护畲族医药文化迫在眉睫[1-2]。“芝兰青”为福建省闽东畲族居民常用青草药，来源于蜡梅科植物浙江蜡梅Chimonanthus Zhejiangensis M.C.Liu 的干燥叶，在闽东及浙南地区应用较为普遍，有醒脾化湿、止泻等功效，主要用于消化不良、小儿疳积、腹泻、醒酒及解暑，此外还用于预防感冒、减肥及降压等。据民间调查显示，芝兰青（浙江蜡梅叶）在闽东畲族人口分布区的应用历史已不下百年，应用广泛，疗效确切，但却缺少文字资料的记载，这主要与没有专业的人员对其基原进行鉴定有关。因此出于对民族药进行保护的角度来讲，本文对芝兰青（浙江蜡梅叶）采用气相-质谱（GC-MS）联用进行化学成分分析，以期为芝兰青的质量控制等提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 实验材料

芝兰青，经笔者严格鉴定为浙江蜡梅Chimonanthus ZhejiangensisM.C.Liu 的干燥叶，2009年5月4日采自福建省寿宁县竹管笼乡刘坪村（纬度：27.328 9 °N，经度：119.585 9 °E，海拔：484 m），采集2～3年生老叶，室内阴干，密封保存备用。

1.2 仪器试剂

Agilent 6890N/5975MSD 气相色谱仪（安捷伦科技公司）；HP-5MS 弹性石英毛细管柱（30.0 m×250 μm×0.25 μm）（安捷伦科技公司）；NIST05m.IBr 数据系统（安捷伦科技公司）；KDM型恒温电热套（山东省城振兴仪器厂）；YP202N型数字分析天平（上海精科天平仪器厂）；蒸馏水（自制）；乙醚（上海联试化工试剂有限公司）；无水硫酸铜（浙江海蓝化工有限公司）。

1.3 实验方法

1.3.1 挥发油提取与含量测定

称取芝兰青（浙江蜡梅叶）样品50 g，杵碎，过2号筛，置1 000 mL 烧瓶中，加蒸馏水500 mL 与玻璃珠数粒，振摇混合，冷浸12 h。按照《中国药典》2010年版挥发油水蒸汽蒸馏法提取与测定，重复3次。

表1 芝兰青（浙江蜡梅叶）挥发油化学成分

1.3.2 GC-MS 联用分析化学成分

将提取的芝兰青（浙江蜡梅叶）的挥发油用乙醚萃取，回收乙醚，无水硫酸钠脱水，得无水挥发油，密封瓶装，待测。采用GC-MS 联用测定样品挥发油的化学成分。

1.3.2.1 气相条件 样口温度：250℃；进样量：1 μL；进样方式：不分流进样；载气：氦气；体积流量：1 mL/min；恒流模式；传输线温度：250℃。升温程序：120℃（0 min）→250℃（3 min）。

1.3.2.2 质谱条件 电离方式：EI；电子轰击能量：70 eV；增倍器电压1 200 V，离子源温度：230℃；四极杆温度：150℃；扫描范围：30～450 amu；溶剂延迟时间：3 min。

2 结果

2.1 挥发油的含量

经过水蒸气蒸馏法方法提取，得到橙黄色透明的油状物，平均得率为2.6%。

2.2 芝兰青（浙江蜡梅叶）的GC-MS分析测定

芝兰青（浙江蜡梅叶）的GC-MS分析测定结果见图1。

2.3 挥发油化学成分分析

挥发油化学成分分析见表1。

通过对表1 的分析可知，本实验中挥发油成分主要是醇类和烯烃类物质，其中以烯烃类物质居多，有27种，醇类物质有4种，其他化合物有20个。芝兰青（浙江蜡梅叶）挥发油中百分含量高于1%的成分，共计17种。其中含量最高的为桉叶醇17.13%。

3 讨论

3.1 属间成分的对比

蜡梅属[3-4]（Chimonanthus）植物为我国特有，国内报道的种有10个，不同的分类学家对种的分类有不同意见，有学者主张将浙江蜡梅并入山蜡梅中。国内研究较多的是山蜡梅，山蜡梅叶可用于防治感冒和流行性感冒，中药蜡梅解毒汤能治疗单纯疱疹性角膜炎，目前临床上已开发了蜡梅止咳露、山蜡梅滴丸等产品。山蜡梅叶的精油成分不仅具有镇痛、镇咳、祛痰作用，还能明显减缓小鼠的体重增长，抑制食欲，具有减肥功效。山蜡梅制作的黄金茶具有调节人体机能、增强体质、提高免疫力和延缓衰老的保健功能，且可以预防感冒，并对高血压、高血脂有一定疗效[5]。将本实验结果与已经研究报道的山蜡梅挥发油成分进行了比较，结果显示两者均含有蒎烯、莰烯、桉树脑、柠檬烯、醋酸冰片酯、樟脑、异龙脑、蒈烯、α-毕澄茄油烯、石竹烯等34种成分；而不同的成分有β-月桂烯、α-法尼烯、塞瑟尔烯、榄香烯、松油醇、檀香烯、金合欢烯、麝香草酚等40多种[6-7]。

3.2 芝兰青（浙江蜡梅叶）挥发油主要成分的药理作用

桉叶醇对胃肠机能有双向调节作用[8]；蒎烯具有抗流感病毒作用，并且还可以刺激微生物产生次生代谢产物[9-11]；樟脑还有应用于碘仿樟脑酚糊剂治疗根尖周炎，应用于麝香痔疮栓治疗痔疮[12-14]；异龙脑的作用与樟脑相似；蒈烯在化妆品、药物、农药方面都有应用，在药物方面蒈烯主要用于抗炎、抗菌等[15]。芝兰青中大部分成分均具有活性，具有进一步开发利用的实际意义。

3.3 小结

本次在芝兰青（浙江蜡梅叶）挥发油中总共分离并鉴定出了51种化学成分，占挥发油总量的62.21%，其中含量高于1%有17个，并且以叶桉醇（17.13%）含量最高。烯烃类物质居多，有27种，醇类物质有4种，其他化合物有20个。大部分成分具有确切的药理活性，因此，芝兰青作为畲族常用的特色青草药，值得进一步的研究和开发。

与山蜡梅的GC/MS 结果对比显示，两者有相似的地方，但也存在不同，因此将浙江蜡梅（芝兰青）与山蜡梅两种合并有待进行深入的研究确定。

由于时间、季节等原因，本次实验仅对闽东寿宁的芝兰青（浙江蜡梅叶）进行了研究，从本次实验结果与前人研究的山蜡梅结果比较可知，不同品种、不同地域或不同的生境等，其成分组成及含量均可能存在较大差异，药材存放时间的长短也可能使成分发生变化，因此有待下一步收集不同产地及不同品种的样品进行深入的研究比较。

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