利用荷移反应分光光度法测定苯唑西林钠

秦海峰，宋健玲

(太原理工大学化学化工学院，太原030024)

苯唑西林钠(oxacillin sodium)属半合成青霉素类抗生素，其抗菌作用方式与青霉素相似，对耐青霉素G的金黄色葡萄球菌具有杀菌作用。临床主要用于治疗敏感菌所致的各种感染，如肺炎、败血症、乳腺炎、烧伤创面感染、化脓性脑膜炎、骨髓炎、扁桃体炎、峰窝组织炎及脓皮病等。目前关于苯唑西林钠的分析方法主要有高效液相色谱法［1-3］、分光光度法［4-5］、化学发光法［6］和电位滴定法［7］等。由于药物分子中所含的能够给予电子的基团能与电子接受体对硝基酚发生荷移反应［8］。笔者利用对硝基酚作为配体与苯唑西林钠反应形成荷移络合物，以此测定苯唑西林钠含量。本文研究了苯唑西林钠与对硝基酚形成荷移络合物的反应条件，探讨了反应机理。

1 实验部分

1．1 主要仪器与试剂

仪器：UV-265紫外可见分光光度计(日本岛津公司);HH-S型恒温水浴锅(河南巩义市英峪予华仪器厂)。

试剂：3×10－3mol/L对硝基酚乙醇溶液(上海恒远生物科技有限公司);500μg/mL苯唑西林钠乙醇标准溶液(中国药品生物制品检定所);注射用苯唑西林钠(上海新先锋药业有限公司);苯唑西林钠胶囊(朗致集团博康药业有限公司)。所用试剂均为分析纯，实验用水为二次去离子水。

1．2 实验方法

准确吸取一定量的500μg/mL苯唑西林钠乙醇标准溶液于10 mL容量瓶中，加入3×10－3mol/L对硝基酚溶液2．5 mL，用丙酮稀释至刻度。摇匀后在(20±5)℃放置10 min，用1 cm的比色池以试剂空白为参比，于波长401．4 nm处测定其吸光度。

2 结果和讨论

2．1 吸收光谱

按照实验方法配制溶液，于分光光度计上扫描，所绘制吸收光谱见图1。对硝基酚试剂的吸收波长λmax=325．0 nm，苯唑西林钠吸收波长 λmax=339．0 nm．在苯唑西林钠溶液中加入对硝基酚溶液后，在401．4 nm处出现一新的吸收峰，表明有新物质生成，且吸光度值与浓度在一定范围内呈良好的线性关系。本实验以络合物最大吸收波长401．4 nm作为测定波长，同时以试剂空白为参比，测定溶液的吸光度值。

2．2 溶剂的选择

选用水、乙醇、甲醇、丙酮、乙腈、二甲基亚砜等不同的溶剂按照实验方法配制溶液，分别测量其吸光度。结果表明，苯唑西林钠与对硝基酚在丙酮溶剂中的吸光度值最大，故本实验选择丙酮作为反应溶剂。

2．3 反应温度与反应时间的影响

按照实验方法进行实验，改变反应的温度和时间，测量其吸光度。结果表明，苯唑西林钠与对硝基酚生成的络合物在(20±5)℃下5～80 min时其吸光度达到最大值并趋于恒定。本实验选择反应时间为10 min。

2．4 对硝基酚试剂用量的影响

按照实验方法进行实验，改变对硝基酚试剂用量。结果表明，苯唑西林钠与对硝基酚反应时，浓度为3×10－3mol/L 对硝基酚试剂用量在 2．4 ～5．0 mL范围内吸光度达到最大值并趋于恒定。本实验选用对硝基酚试剂用量为2．5 mL，见图2。

图2 对硝基酚试剂用量的影响

2．5 标准曲线及灵敏度

分别取0．2，0．4，0．6，1．0，1．6 mL 的 500 μg/mL苯唑西林钠标准溶液，按照实验方法配制溶液，在401．4 nm处测量其吸光度，并绘制标准曲线，见图3。苯唑西林钠含量在10～80μg/mL符合比尔定律，相关系数为r=0．999 8，线性方程A=0．002 01+0．004 96 ρ，表观摩尔吸光系数ε =2．22 ×103L/(mol·cm)。

2．6 络合物组成及反应机理探讨

图3 标准曲线

用等摩尔连续变化法测得苯唑西林钠与对硝基酚形成络合物的组成比为1∶1，见图4。在苯唑西林钠分子中含有电子给予体的基团存在［7-8］，而对硝基酚是一个良好的电子接受体［9］，在丙酮溶液中苯唑西林钠与对硝基酚可生成稳定的荷移络合物。实验测得在波长401．4 nm处有一强的特征吸收峰，与原来药物吸收峰相比有明显红移，证明生成了荷移络合物。

图4 等摩尔连续变化法测定络合物组成比

2．7 干扰物质实验

在实验的最佳条件下考察了其他物质对苯唑西林钠测定的干扰情况。结果表明，当相对误差在±5%时，800倍量的乳糖或淀粉，400倍量的蔗糖或萄葡糖，250倍量的硬脂酸镁和100倍量的果糖等共存物质均不干扰测定。

3 样品分析

3．1 试样溶液制备

分别取苯唑西林钠胶囊20粒(苯唑西林钠250 mg/粒)，将胶囊中药剂倒出混匀，准确称取含有苯唑西林钠的药粉1/50(约含苯唑西林钠100 mg)，用适量水配成溶液，过滤，弃去残渣，并将溶液置于200 mL容量瓶中，用水洗涤，除去不溶物，用水稀释至刻度(质量浓度约为500μg/mL)，摇匀备用。

取注射用苯唑西林钠1支(苯唑西林钠500 mg/支)，准确称取苯唑西林钠药粉100 mg，用适量水溶解，置于200 mL容量瓶中，用水稀释至刻度(质量浓度约为500μg/mL)，摇匀备用。

3．2 样品含量的测定

精密量取上述样品制备溶液1．00 mL于10 mL的容量瓶中，按实验方法进行测定。代入线性方程计算每枚药物中苯唑西林钠的平均含量，结果见表1。

3．3 方法的回收率和精密度

精密量取经多次测定已知含量的同一批苯唑西林钠适量样品制备溶液，分别加入不同量苯唑西林钠标准溶液。按实验方法测量其吸光度，平行测定5次，按标准加入法测得回收率为98．35% ～100．2%，相对标准偏差≤2．71%，结果见表1。

4 结论

该方法利用对硝基酚试剂作为电子接受体与电子给予体苯唑西林钠反应，在室温下形成稳定的1∶1荷移络合物，并在波长401．4 nm处出现较强的络合物特征吸收峰，证明生成了荷移络合物，与原来药物吸收峰相比有明显红移。经对实验条件进行优化，苯唑西林钠含量在10～80μg/mL符合比尔定律，同时对市售样品苯唑西林钠针剂和胶囊进行了测定及回收率实验。回收率为98．35% ～100．20%，相对标准偏差≤2．71%。该方法简便快速，为定量测定苯唑西林钠制剂提供了一种新方法。

表1 样品测定结果及回收率(n=5)

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