人绒毛膜促性腺激素定量检测方法的评价

全媛 王洁珣 陈小春

人绒毛膜促性腺激素(HCG)是糖蛋白激素家族中的一员,一旦妊娠后绒毛生成, 即可在血循环中检测到。因此测定HCG的水平可用于诊断早孕及宫外孕, 进行先兆性流产的动态观察及判断预后, 还可作为孕期的监护观察指标。此外, 也可用于绒毛膜癌、恶性葡萄胎等作为辅助诊断及治疗后随访的观察指标。因为血中HCG变化较快, 能及时反映出绒毛的分泌活动［1,2］。HCG检测方法多种多样, 现对江苏省泰州市第二人民医院两种检测HCG方法的重复性、稳定性等指标进行评价。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

1.1.1 化学发光免疫法 采用美国贝克曼公司UniCel DXI 800免疫分析仪及其配套检测试剂。

1.1.2 酶联荧光免疫法 采用法国生物梅里埃MINI VIDAS和配套检测HCG试剂。

1.2 标本

1.2.1 质控品 美国贝克曼公司提供的质控品。

1.2.2 血样 随机抽取住院及门诊患者共100例。

1.3 试验原理

1.3.1 化学发光免疫法检测HCG原理 UniCel DXI 800免疫分析系统采用化学发光技术和磁性微粒分离技术相结合的测定方法, HCG测定原理为双抗体夹心法。

1.3.2 MINI VIDAS检测 HCG原理 是一种定量全自动ELISA(酶联免疫吸附剂测定)法, 将两步的免疫夹心法与最后的荧光检测结合起来, 利用现成的单剂量试剂和分析仪中储存的校准系统, 对单份样品进行检测。

1.4 方法

1.4.1 重复性实验(批内精密度) 根据CLSI的EP5-A2文献［3］对于精密度评价的要求, 分别在UniCel DXI 800免疫分析仪和MINI VIDAS测定三个水平质控HCG含量, 3 h内各水平测试20次, 计算均值()、标准差(s)、变异系数(CV)。1.4.2 稳定性实验(日间精密度) 按上述方法分别测定三个水平质控HCG含量, 1次/d, 连续测定20 d, 计算均值(x-)、标准差(s)、变异系数(CV)。

1.4.3 比对实验 根据CLSI EP9-A2文献［4］, 选取随机的住院及门诊患者新鲜血样标本100例, 采用上述两种方法平行检测HCG含量, 最后对检测结果进行相关性分析。

1.5 统计学方法 用SPSS17.0统计软件进行相关性分析。

2 结果

2.1 重复性与稳定性 化学发光免疫法和酶联荧光免疫法的重复性结果, 见表1, 稳定性结果, 见表2。

2.2 比对实验 将检测结果作回归曲线, 得到化学发光免疫法和酶联荧光免疫法比对结果的回归方程：y=0.885x+31.24,相关系数r=0.985。根据CLSI文献要求(r>0.975), 可见两种方法相关性理想。

表1 重复性实验结果

表2 稳定性实验结果

3 讨论

HCG是孕卵着床后由人体滋养层细胞分泌的一种糖蛋白激素, 在正常与异常妊娠期有一定的分泌规律, 滋养细胞的数量和活力与HCG的分泌密切相关, 因此, 血清HCG测定能够在临床上诊断早孕、异位妊娠、先兆流产、葡萄胎及妊娠滋养细胞肿瘤等, 并在治疗中和治疗后的随诊中成为重要检测指标。

根据上述实验结果, 两种定量检测方法均有稳定性、重复性较好的特点, 对比实验结果显示, 两种方法相关性较好。另外, 两种方法有各自的优点, 实验室可根据具体情况选择。UniCel DXI 800免疫分析仪：①磁性微粒子/超声波清洗分离技术, 使携带污染率<1 ppm, 避免了交叉污染和携带效应严重等问题。②分析速度最高可达400测试/h, 急诊项目分析时间≤15 min。③一次装载量≥50个试剂位, 试剂储存在4～10℃, 该系统自动化、智能化程度高。MINI VIDAS：①所有试剂都已经预先分装在独立的试剂条中, 减少了交叉污染和干扰, 同时对操作者是较好的保护, 特别是高危标本。②该方法可单个或多个标本多个项目同时测定, 比较适合小型实验室或大型实验室的急诊检测。

［1］卫生部临床检验中心.临床实验室室间质评的要求(草案).全国临床化学室间质评资料汇编, 2000:1-3.

［2］叶应妩,王毓三.全国临床检验操作规程.第2版.南京：东南大学出版社, 1997,21(10):601-604.

［3］NCCLS.Evaluation of performance of quantitative Measurement methods；approved guideline-second edition.NCCLS document EP5-A2, 2004.

［4］NCCLS.Method comparison and bias estimation using patient samples; approved guideline-second edition.NCCLS document EP9-A2.NCCLS, 940 West Valley Road, Suite 1400, Wayne,Pennsylvania 19087-1898 USA, 2002.