蒽酮-硫酸法测定蒙药驴耳风毛菊多糖的含量

师永晶

（锡盟药品检验所，内蒙古 锡林浩特 026000）

菊科(Compositae)风毛菊属(Saussurea)系多年生草本植物，该属植物化学成分主要有倍半萜、三萜、甾体、黄酮、香豆素、有机酸、多糖类等。药理作用主要表现为抗肿瘤、抗炎、抗衰老、改善心血管系统机能等[1]。驴耳风毛菊Saussurea amara（L）DC为常用的民族医药材。蒙医学认为，驴耳风毛菊性苦、寒、杀粘，清热解毒，止痛消肿，用于发疹，心热，血热，感冒发烧等症[2]。本文对多糖含量进行了测定。

1 试验材料

葡萄糖、蒽酮、硫酸均为AR（市售）。210型可见紫外分光光度计（日本岛津）。

2 方法与结果

2.1 对照品溶液的配制、显色剂的配制及蒽酮-硫酸法最大吸收波长的选择：取葡萄糖约6mg，精密称定，置100mL量瓶中，用水溶解稀释至刻度，即为葡萄糖对照品溶液（60μg·mL-1）。蒽酮溶于硫酸中，配制成.5%浓度。棕色瓶保存。精密吸取0.6mL对照品溶液，加蒸馏水至2.0mL，加入0.5%的蒽酮硫酸溶液4mL，混匀，同法制的阴性溶液，振摇10min，置沸水浴中15min，然后置冷水中冷却30min，同法制得阴性对照溶液，在可见紫外分光光度计200~800nm范围内测定吸收度，结果最大吸收波长λmax=615nm.

2.2 线性化范围试验：精密吸取.0，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0，1.2mL葡萄糖对照品溶液，加蒸馏水至.0mL，加入0.5%的蒽酮溶液4mL，混匀，振摇min，置沸水浴中min，然后置冷水中冷却30min，在可见紫外分光光度计615nm，处测定吸收度。经回归处理回归方程如下A=-0.1120+0.0005x，r=0.999。在,12.0～72.0μg·mL-1范围内葡萄糖量与吸收度成一条不通过原点的直线，供试品溶液测定可采用外标两点法定量。

2.3 精密度试验：精密吸取0.6mL葡萄糖对照品溶液，加蒸馏水至2.0mL，照上述蒽酮 -硫酸法显色，按上法测定吸收度次，吸收度分别为.265，0.264，0.265，0.267，0.264,RSD=0.46%。

2.4 稳定性试验：精密吸取0.6mL葡萄糖对照品溶液，加蒸馏水至2.0mL，照上述蒽酮-硫酸法显色，按上法测定吸收度，每隔20min测定1次。结果，RSD=0.98%,在2h内稳定。

2.5 加样回收率的测定：取驴耳风毛菊粉末（80目,105℃干燥h，）约.8g，6份，精密测定，其中份不加葡萄糖对照品，作为随行对照，其余5份分别加入精密称定的葡萄糖对照品，余下操作按“2.6.1供试品溶液制备”方法处理，得到5份加样回收率供试品溶液。精密吸取0.25mL各加样回收率供试品溶液，按上述蒽酮-硫酸法显色，按上法测定吸收度，结果见表1。

表1 加样回收率试验

2.6 含量测定

2.6.1 供试品溶液的制备及含量测定：取不同产地驴耳风毛菊粉末（80目,105℃干燥h，）约g，精密称定，加水100 mL，回流提取次，每次30min。合并提取液，浓缩至mL，加%乙醇至含量%，搅拌min，放置24h，过滤，残渣用%的乙醇洗涤，然后用丙酮洗涤，自然干燥后用水溶解转移至100mL量瓶内，用水稀释至刻度，即得供试品溶液。精密吸取0.25mL供试品溶液，加水至2 mL，照上述蒽酮-硫酸法显色，按上法测定吸收度，根据外标法计算不同产地驴耳风毛菊中多糖含量，锡盟、阿盟、呼盟、乌盟、呼市多糖含量分别为6.32%、6.11%、5.31%、7.25%、6.52%，平 均 含 量 为6.30%。

3 讨 论

硫酸-蒽酮法是测定多糖含量的较为常用的方法，其原理为多糖类在浓硫酸作用下先水解为单糖分子，并迅速脱水生成糠醛衍生物，糠醛衍生物再与蒽酮结合成有色化合物以比色法在适当波长测定多糖含量。本文采用加水回流提取多糖，提取液加乙醇至85%沉淀，沉淀物用85%乙醇、丙酮洗涤，自然干燥，样品为白色粉末，用蒽酮-硫酸显色法测定多糖含量。测定结果，驴耳风毛菊多糖平均含量为6.30%。该方法简单、可靠、重现性好，可用于药材的质量控制方法之一。

[1]王红兵,秦国伟．风毛菊属植物的化学成分和生物活性[J]．国外医学－植物药分册,20（2）;47．

[2]药典委员会．中华人民共和国卫生部药品标准－蒙药分册 [S]．1998,21.