IGF-Ⅱ、PCNA在子宫肌瘤患者诊断中的意义

叶 英

河南省商丘市第一人民医院妇产科，河南商丘 476100

子宫肌瘤又称子宫平滑肌瘤，是女性生殖器最常见的一种良性肿瘤。大多数患者发病初期无明显症状，子宫肌瘤的发病机制可能与体内雌激素水平过高，长期受雌激素刺激有关[1]。子宫肌瘤发病率占女性生殖器官良性肿瘤的一半以上，子宫肌瘤的发生发展与年龄、遗传、激素和免疫水平存在密切关系。2008年针对全国21个主要省份子宫肌瘤发病率的调查结果显示我国25～30岁女性子宫肌瘤发病率已超过3%，我国成为子宫肌瘤发病率最高的国家。既往医学认为子宫肌瘤属于良性肿瘤，其发生与细胞遗传无关，但随着研究的进一步加深，子宫肌瘤与机体染色体异常、基因畸形存在紧密关联。Vikhlyera EM[2]等研究表明子宫肌瘤的发生具有“家庭聚集现象”，子宫肌瘤患者的亲代肌瘤发生率接近30%，是正常人群的2倍。越来越多研究表明，子宫肌瘤的发生发展与细胞有丝分裂有关，而IGF-Ⅱ、PCNA是促进细胞有丝分裂的重要因子，笔者为探讨IGF-Ⅱ、PCNA在子宫肌瘤诊断中的临床意义，通过对80例患者子宫平滑肌组织进行观察，具体报道如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择本院2008年1月～2012年3月40例病理证实子宫肌瘤患者为观察组，年龄 33～58 岁，平均（45±3.4）岁，取其子宫肌瘤组织、肌瘤旁平滑肌组织进行观察，同期40例病理证实卵巢良性肿瘤患者设为对照组，年龄32～59岁，平均（46±2.8）岁，取其子宫平滑肌组织进行观察。所有入组患者均排除恶性肿瘤史、类固醇使用史（3个月内）。两组患者一般情况比较，差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。

1.2 检测方法

1.2.1 标本制作 将组织切取厚度约为0.2～0.3 cm，大小1.5 cm×1.5 cm×0.3 cm，用4%多聚甲醛溶液固定48 h。梯度酒精脱水，二甲苯透明，然后入熔解的石蜡浸透，每次30 min，共3次，备包埋。将包埋好组织蜡块切成5 μm的切片，进行免疫组化（IHC）进行检测，抗体使用兔抗人IGF-Ⅱ多克隆抗体（厦门鹭隆生物工程有限公司），鼠抗人增殖细胞核抗原单克隆抗体（武汉生工生物技术有限公司），操作按照说明书进行。

1.2.2 结果判定 IGF-Ⅱ阳性表达是细胞浆出现棕色颗粒；PCNA阳性表达是细胞核出现棕色颗粒；每张切片随机选择5个视野，统计着色细胞与为着色细胞的比值（阳性率）[3]。

1.3 统计学处理

采用SPSS 18.0对所得数据进行统计分析，组间显著性比较采用t检验；计数资料以百分率表示，组间显著性比较采用卡方检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

观察组IGF-Ⅱ、PCNA表达水平与对照组相比，差异有统计学意义（P<0.05），观察组高于对照组。具体见表1。IGF-Ⅱ与PCNA呈正相关关系，具体见表2。

表1 IGF-Ⅱ、PCNA在子宫肌瘤组织、肌瘤旁平滑肌组织以及正常平滑肌组织中表达[n（%）]

表2 子宫肌瘤组织中IGF-Ⅱ与PCNA的相关性

3 讨论

胰岛素样生长因子（IGFs）含有IGFⅠ和IGF-Ⅱ两个类别，均与细胞的增殖分化、凋亡转化有密切联系，IGF-Ⅱ是与胰岛素具有相似结构的氨基酸单链多肽，IGF-Ⅱ和受体IGF-ⅡR结合后介导细胞的有丝分裂，促进细胞的增殖，促进细胞中DNA、蛋白质、多糖的合成，对胚胎的生长发育起到良性刺激作用。正常生理条件下，IGF-Ⅱ的结合受体只在胚胎具有活性，出生后IGF-Ⅱ受体将处于沉默状态。肿瘤发生后，IGF-Ⅱ受体被激活，与IGF-Ⅱ重新结合后促使IGF-Ⅱ活性增强[4]。IGF-Ⅱ属于肿瘤组织的自分泌生长因子，因此在肿瘤组织中有高表达。雌激素在子宫肌瘤的发生发展中具主要介导作用，子宫肌瘤属于激素依赖型肿瘤，而生长激素、胎盘生乳素等内分泌激素也是子宫肌瘤形成的催化剂，子宫肌瘤的异常分泌导致胰岛素样生长因子IGF浓度增多而进一步加速子宫肌瘤细胞的有丝分裂，故内分泌失调是形成子宫肌瘤的重要危险因素。Li SR等[5]通过研究发现，IGF-Ⅱ的基因印记丢失导致其在消化道肿瘤中出现高表达；BYRNE等也通过细胞实验验证IGF-Ⅱ介导肿瘤发生发展的机制与血管新生有关。本研究结果显示IGFⅡ在子宫肌瘤、肌瘤旁平滑肌、正常子宫平滑肌的表达水平有差异存在，IGFⅡ在子宫肌瘤组织中的表达较其他组织上调，笔者认为这种结果存在的原因有以下几种：（1）机体通过自分泌系统产生IGFⅡ，细胞膜上的IGF受体与之相结合后激活体内酪氨酸激酶（PTK），PTK能催化多种底物蛋白质酪氨酸残基磷酸化，作用于细胞信号转导通路，促进细胞生长、增殖、分化。BYRNE AT等[6]发现敲除胎鼠IGFⅡ基因后胎鼠胚胎停止发育；将肝卵细胞株植入加有IGF-Ⅱ的培养基中，肝卵细胞株增生速度增快，在培养基中注入IGF-Ⅱ受体阻滞剂后，细胞增生减缓甚至停止。（2）凋亡系统是正常机体清除死亡细胞、异常细胞的途径，避免肿瘤的发生发展，IGF-Ⅱ可协助突变细胞逃逸凋亡机制的清理而发展为肿瘤，IGF-Ⅱ作用于Fas基因，导致其表达下调而达到抗凋亡的目的。（3）IGF-ⅡR与Ras、c-fos等信号通路相关，子宫肌瘤发生时，癌基因的过度表达刺激了信号通路，使IGF-ⅡR的活性上调，导致了IGF-Ⅱ表达的增高[7-10]。本研究结果表明，40例子宫肌瘤标本中IGF-Ⅱ阳性表达率高达60%，远远高于肌瘤旁平滑肌、正常子宫平滑肌的阳性表达率，故本文认为IGF-Ⅱ可作为子宫肌瘤生长发展的一种指标。

PCNA于1978年由Miyachi首次从红斑狼疮患者血清中分离发现的，由于其属于增殖性细胞而得名。PCNA是真核细胞DNA聚合酶的推动因子，能与多种蛋白质相结合，对细胞核组织内的DNA的复制起到辅助作用，细胞周期中蛋白cyclin、激酶CDK以及CKI的抑制蛋白CKI之间具有相互调节作用，可形成不同的复合体，相互协作调控细胞的周期，PCNA同时是一种功能转换因子，像纽带一样将cyclin、CDK、CKI与相应的底物连接起来，促进了其磷酸化的进程，通过对上述因子的调控实验对细胞凋亡周期进行作用[11-14]。本研究结果显示：PCNA在子宫肌瘤组织、肌瘤旁平滑肌组织以及正常子宫平滑肌组织中的阳性具有显著差异，子宫肌瘤的阳性表达率远高于其他组织。笔者通过本文证实IGF与PCNA存在正相关关系，笔者认为IGF通过促进PCNA的表达而使子宫肌瘤组织处于增殖状态，PCNA的表达量直接影响细胞的活性。陈文雪等[15]在研究中指出，子宫肌瘤组织PCNA阳性指数为（0.27±0.04），远远高于正常子宫平滑肌的PCNA阳性指数。这一数据与本研究的研究结果相符。本研究进一步发现子宫肌瘤的PCNA与肌瘤旁平滑肌的表达量亦存在差异。故笔者认为PCNA可作为评价细胞增殖状态的指标。PCNA与肿瘤发生发展、分级、分期、预后、复发和转移等各个方面具有密切相关性

总之，通过对IGF-Ⅱ、PCNA的测定，了解子宫肌瘤的发展程度，对肿瘤的预防及治疗亦有重要意义，降低IGF-Ⅱ、PCNA的表达水平可能可以成为治疗肿瘤的新靶向方案。

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