COX-2与VEG F在子宫内膜增生症及子宫内膜癌的表达及意义

陈丽艳 脱 晋 郭秀娟

辽宁省大连市妇产医院急诊科，辽宁大连 116033

子宫内膜癌（endometrial carcinoma）是女性生殖系统常见的恶性肿瘤，自生育年龄至绝经后均可发生，发病高峰在50～69岁，近年来其发病率呈逐年上升趋势，但其发病机制尚未完全阐明[1]。子宫内膜增生症包括单纯增生、复杂性增生及非典型增生，其与内膜癌的发生关系密切。环氧化酶-2（Cyclooxygenase-2，COX-2）属于诱导型基因，一般只在诱导因子的作用下表达上调。大量研究证明血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）对内皮细胞有促进有丝分裂作用，并有促进血管增生的能力。本研究通过检测COX-2与VEGF在子宫内膜增生症及子宫内膜癌中的表达，探讨二者在子宫内膜癌发生、发展中的作用。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2008年1月1日～2011年9月1日大连市妇产医院术后病理诊断为子宫内膜癌的100例患者为研究对象。 患者年龄 28～75 岁，平均（53.1±7.4）岁；所有患者术前均未行化疗、放疗及内分泌治疗。取同时期子宫内膜增生症患者标本90例为子宫内膜增生症组，其中单纯性增生30例，复杂性增30例，不典型增生30例，患者年龄29～63岁，平均（51.3±8.2）岁。并取同时期因其他原因行全子宫切除术获得的正常子宫内膜增生期标本30例作为对照组，年龄 45～65 岁，平均（55.2±4.5）岁。

1.2 主要试剂

鼠抗人COX-2单克隆抗体，鼠抗人VEGF单克隆抗体，PV9000 Immuno-Bridge+二步法免疫组化试剂盒及3，3'-二氨基联苯胺显色剂（DAB），以上试剂购自北京中杉金桥生物技术有限公司。

1.3 实验方法

每例标本经常规甲醛溶液固定，石蜡包埋，连续组织切片成4 μm厚，按SP法试剂盒说明进行免疫组化染色。

1.4 结果判定

COX-2与VEGF免疫反应阳性物质主要位于细胞浆，呈棕黄色至棕褐色颗粒为阳性细胞，细胞无阳性反应为阴性。阳性细胞计数采用高倍镜（400×）下对每张切片随机选择5个视野，计数200个细胞/视野，共计1 000个以百分率表示，阳性细胞数＜1%为阴性（-），阳性细胞数1%～10%微弱阳性（+），11%～50%为中度阳性（++），＞50%为强阳性（+++）。

1.5 统计学处理

所有数据均用SPSS 13.0统计软件处理，等级资料采用秩和检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 COX-2与VEGF在正常增生期子宫内膜中的表达

COX-2在正常增生期子宫内膜无表达，在VEGF中2例呈弱阳性（+）表达，阳性率为6.67%。

2.2 COX-2与VEGF在子宫内膜增生症中的表达

COX-2与VEGF在不典型增生及复杂性增生内膜中的表达均明显强于单纯性增生，在不典型增生和复杂性增生的内膜表达差异无统计学意义（P＞0.05）；但它们在单纯型增生、复杂型增生、不典型增生子宫内膜组织中的表达逐渐增强（P ＜ 0.05）。 见表 1、2。

表1 COX-2在子宫内膜增生症的表达（n）

复杂性及不典型增生与单纯性增生比较，P＜0.05；复杂性与不典型增生相比较，P＞0.05；3种组织类型间的表达率比较，P均＜0.05。

表2 VEGF在子宫内膜增生症的表达（n）

复杂性及不典型增生与单纯性增生比较，P＜0.05；复杂性与不典型增生相比较，P＞0.05；3种组织类型间的表达率比较，P均＜0.05。

2.3 COX-2与VEGF在子宫内膜增生症及子宫内膜癌中的表达

子宫内膜癌组织中COX-2阳性染色不仅见于子宫内膜癌上皮细胞的胞浆，而且见于血管内皮细胞的胞浆，棕黄色颗粒弥漫分布于整个胞浆或沿核膜周边呈线状分布；VEGF表达于多数子宫内膜癌细胞和少数血管内皮细胞的胞浆；COX-2在正常增生期子宫内膜、子宫内膜增生症及子宫内膜癌中表达阳性率分别为0.0%、58.9%、88.0%，VEGF在正常增生期子宫内膜、子宫内膜增生症及子宫内膜癌中表达阳性率分别为6.7%、66.7%、92.0%。COX-2与VEGF在三种组织中的表达差异均有统计学意义 （P＜0.05）。 见表 3、4。

2.4 COX-2与VEGF表达的相关性

COX-2与VEGF在子宫内膜癌中的表达通过Spearman相关性分析发现呈正相关（P＜0.05）。

3 讨论

COX-2是前列腺素合成过程中的重要限速酶，COX-2是一种可诱导型酶具有促进细胞增生、抑制细胞凋亡以及刺激新生血管的生成等多种功能[2]。近年研究发现，COX-2在人的很多癌前病变和恶性肿瘤中高表达，并可能参与肿瘤的增殖、转移及分化[3-4]。正常情况下绝大部分组织细胞COX-2基因不表达，只有在细胞外广泛的刺激作用下才诱导表达，如：炎性细胞因子、生长因子和促癌因素等均可诱导体内组织产生COX-2。本研究显示，COX-2蛋白在正常子宫内膜中无表达，这与众多实验研究结论相符。COX-2蛋白在子宫内膜增生症中有较高表达，与病理组织学类型有相关性，在单纯性增生、复杂性增生与不典型增生之间比较有明显差别，且COX-2在子宫内膜癌中表达明显高于子宫内膜增生症中的表达。提示COX-2的表达水平与子宫内膜增生症的形成及内膜细胞的增殖密切相关，COX-2可能在子宫内膜癌的发生发展中起到重要作用。

VEGF是一种对血管生长有极强诱导作用的因子，能特异性作用于血管内皮细胞，是目前所知的唯一作用于血管内皮的生长因子。VEGF一个极其重要的生物学功能就是能增加血管通透性，促进内皮细胞的增殖和迁移，从而促进血管生成。VEGF在成年正常组织多呈低水平表达或不表达，血管的生成在正常生理状态是被封闭的。Kawano Y等[5]发现VEGF的表达与增生期子宫内膜的新血管生成呈正相关。Ancelin M等[6]发现VEGF（189）在细胞中的表达可能与子宫内膜水肿和不规则出血有相关性。据文献[7]报道VEGF在子宫内膜癌中呈现高表达，能够协同促进子宫内膜癌血管形成，可提高子宫内膜癌的侵袭能力，以及对预测子宫内膜癌的组织病理学、临床预后有价值。本研究提示，在正常子宫内膜可见VEGF少量表达，与VEGF参与女性正常子宫内膜增生期血管生成相符。本研究发现，VEGF蛋白在子宫内膜增生症及子宫内膜腺癌中的表达量较正常子宫内膜的表达明显增高，且在子宫内膜腺癌中的表达明显高于其他两种组织类型。提示VEGF参与了子宫内膜增生过长的血管生成及血管内皮细胞的增殖，VEGF与子宫内膜癌血管生成有关，在子宫内膜癌发生、发展的连续过程中，VEGF表达呈进行性升高，且与增殖密切相关。

COX-2与血管生成密切相关。有研究发现，COX-2的催化产物前列腺素E2（PEG-2）通过EP受体激活Her2/neu酪氨酸激酶信号通路及活化剂蛋白和转录激活因子促进VEGF表达，VEGF反过来又能促进COX-2的表达，其相互作用被某些因素（如炎症）激发后，即可加速恶性肿瘤的发生与发展[8-9]新近国外有资料证实COX-2能够上调VEGF表达，促进肿瘤新生血管形成，抑制COX-2则可抑制VEGF的表达[10]。COX-2可能通过产生前列腺素E调节VEGF的表达，单一前列腺素E在体内可刺激血管的生成，外源性前列腺素E可逆转吲哚美辛引起的VEGF表达下调[11]。本研究发现，子宫内膜癌中COX-2表达与VEGF表达呈正相关性，说明在子宫内膜癌中COX-2表达与VEGF表达密切相关，COX-2可能通过促进肿瘤血管形成来影响子宫内膜癌的侵袭和转移。因此COX-2抑制剂有可能成为治疗子宫内膜癌的新方法。近年来有关临床研究表明，COX-2的表达多与预后不良有关。根据COX-2在不同子宫内膜增生症患者中的不同表达，来分析判断患者的预后及向恶性疾病 （子宫内膜癌）的发展趋势。可根据COX-2在子宫内膜癌患者中的不同表达，来分析判断患者的预后及肿瘤的发生发展及转移的趋势。

表3 3种组织中COX-2的表达[n（%）]

表4 3种组织中VEGF的表达[n（%）]

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